Характеризація очищеної рекомбінантної субодиниці В дифтерійного токсину як інструмента його дослідження
Очищення препаратів рекомбінантної субодиниці В (SbB) дифтерійного токсину (DT), синтезованої в цитоплазмі, периплазмі і нерозчинних тільцях включення клітин Escherichia coli, проведене за допомогою металоафінної хроматографії після руйнування бактеріальної ДНК та клітинної стінки ензимами, дало...
Saved in:
| Date: | 2017 |
|---|---|
| Main Authors: | , , , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Ukrainian |
| Published: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2017
|
| Series: | Доповіді НАН України |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/126418 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Характеризація очищеної рекомбінантної субодиниці В дифтерійного токсину як інструмента його дослідження / К.Ю. Манойлов, O.Б. Горбатюк, М.О. Усенко, О.Я. Шатурський, T.O. Борисова, Д.В. Колибо, С.В. Комісаренко // Доповіді Національної академії наук України. — 2017. — № 2. — С. 88-99. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| Summary: | Очищення препаратів рекомбінантної субодиниці В (SbB) дифтерійного токсину (DT), синтезованої в
цитоплазмі, периплазмі і нерозчинних тільцях включення клітин Escherichia coli, проведене за допомогою
металоафінної хроматографії після руйнування бактеріальної ДНК та клітинної стінки ензимами, дало
можливість позбутися домішок ендогенних пороформуючих протеїнів. Показано, що рекомбінантні
похідні DT, SbB та CRM197 мають однакову спорідненість з рецепторами чутливих та резистентних
до токсину клітин ліній Vero і L929 відповідно. Прикладання позитивного потенціалу з боку додавання
SbВ (0,3 мкг/мл) до фосфатидилетаноламінвмісної бішарової мембрани у розчині 1 M KCl (pH 4,8) призводить до утворення потенціалозалежних іонних каналів з провідністю 20 пСм, як показано у класичних
дослідженнях природного DT. За даними порівняльного аналізу, характеристики утворення і функціонування каналів DT найкраще відтворюються SbB, синтезованою в неактивній формі у вигляді тілець включення,
та ренатурованою in vitro. |
|---|