Характеристика ділянки lnd-кластера Streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndY, lndYR, lndW2 і lndW

Ділянка кластера генів біосинтезу ландоміцину Е (lnd-кластера) S. globisporus 1912, що фланкує структурні гени lndZ4-Z6, містить чотири відкриті рамки зчитування – lndW, lndW2, lndYR і lndY. Ген lndY кодує імовірну Ser/Thr протеїнкіназу, котра, як передбачалося, разом з репресором LndYR може контрол...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	2013
Hauptverfasser:	Ципік, О., Осташ, Б., Ребець, Ю., Федоренко, В.
Format:	Artikel
Sprache:	Ukrainian
Veröffentlicht:	Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України 2013
Schriftenreihe:	Цитология и генетика
Schlagworte:	Оригинальные работы
Online Zugang:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/126516
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Характеристика ділянки lnd-кластера Streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndY, lndYR, lndW2 і lndW / О. Ципік, Б. Осташ, Ю. Ребець, В. Федоренко // Цитология и генетика. — 2013. — Т. 47, № 1. — С. 11-16. — Бібліогр.: 12 назв. — укр.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-126516
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-1265162017-11-26T03:02:49Z Характеристика ділянки lnd-кластера Streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndY, lndYR, lndW2 і lndW Ципік, О. Осташ, Б. Ребець, Ю. Федоренко, В. Оригинальные работы Ділянка кластера генів біосинтезу ландоміцину Е (lnd-кластера) S. globisporus 1912, що фланкує структурні гени lndZ4-Z6, містить чотири відкриті рамки зчитування – lndW, lndW2, lndYR і lndY. Ген lndY кодує імовірну Ser/Thr протеїнкіназу, котра, як передбачалося, разом з репресором LndYR може контролювати продукцію ландоміцинів і морфогенез у S. globisporus 1912. Однак результати виконаних експериментів свідчать, що за лабораторних умов ген lndY не задіяний у цих процесах. З використанням транскрипційного злиття промотора lndWр із репортерним геном катехолдиоксигенази xylE вивчено характер взаємодії промотора lndWр з репресором LndYR у часі та опрацьовано систему скринінгу лігандів LndYR in vivo. Участок кластера генов биосинтеза ландомицина (lnd-кластера) Streptomyces globisporus 1912, фланкирующий структурные гены lndZ4-Z6, содержит четыре открытые рамки считывания – lndW, lndW2, lndYR и lndY. Ген lndY кодирует вероятную Ser/Thr протеинкиназу, которая, как пред-полагалось, вместе с репрессором LndYR может контролировать продукцию ландомицинов и морфогенез у S. globisporus 1912. Однако результаты наших экспериментов свидетельствуют о том, что в лабораторных условиях ген lndY не участвует в этих процессах. При помощи транскрипционного слияния промотора lndWр гена АВС-транспортера lndW с репортерным геном катехолдиоксигеназы xylE изучен временной характер взаимодействия этого промотора с LndYR и разработана система скрининга лигандов LndYR in vivo. Streptomyces globisporus 1912 lnd-cluster region which flanks structural lndZ5-lndZ6 genes contains four open reading frames lndW, lndW2, lndYR and lndY. The latter one encodes putative proteinase which can regulate landomycin production and morphogenesis like LndYR. However, results of lndY overexpression and gene knockout showed that lndY did not participate in regulation of landomycin production and morphogenesis of Streptomyces globisporus 1912. Using transcriptional fusion of promoter lndWð to catechol dioxygenase reporter gene xylE the temporal character of interaction of promoter lndWð and repressor LndYR was studied. 2013 Article Характеристика ділянки lnd-кластера Streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndY, lndYR, lndW2 і lndW / О. Ципік, Б. Осташ, Ю. Ребець, В. Федоренко // Цитология и генетика. — 2013. — Т. 47, № 1. — С. 11-16. — Бібліогр.: 12 назв. — укр. 0564-3783 DOI: 10.3103/S0095452713010106 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/126516 579.873.1:577.181.4 uk Цитология и генетика Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Ukrainian
topic	Оригинальные работы Оригинальные работы
spellingShingle	Оригинальные работы Оригинальные работы Ципік, О. Осташ, Б. Ребець, Ю. Федоренко, В. Характеристика ділянки lnd-кластера Streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndY, lndYR, lndW2 і lndW Цитология и генетика
description	Ділянка кластера генів біосинтезу ландоміцину Е (lnd-кластера) S. globisporus 1912, що фланкує структурні гени lndZ4-Z6, містить чотири відкриті рамки зчитування – lndW, lndW2, lndYR і lndY. Ген lndY кодує імовірну Ser/Thr протеїнкіназу, котра, як передбачалося, разом з репресором LndYR може контролювати продукцію ландоміцинів і морфогенез у S. globisporus 1912. Однак результати виконаних експериментів свідчать, що за лабораторних умов ген lndY не задіяний у цих процесах. З використанням транскрипційного злиття промотора lndWр із репортерним геном катехолдиоксигенази xylE вивчено характер взаємодії промотора lndWр з репресором LndYR у часі та опрацьовано систему скринінгу лігандів LndYR in vivo.
format	Article
author	Ципік, О. Осташ, Б. Ребець, Ю. Федоренко, В.
author_facet	Ципік, О. Осташ, Б. Ребець, Ю. Федоренко, В.
author_sort	Ципік, О.
title	Характеристика ділянки lnd-кластера Streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndY, lndYR, lndW2 і lndW
title_short	Характеристика ділянки lnd-кластера Streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndY, lndYR, lndW2 і lndW
title_full	Характеристика ділянки lnd-кластера Streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndY, lndYR, lndW2 і lndW
title_fullStr	Характеристика ділянки lnd-кластера Streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndY, lndYR, lndW2 і lndW
title_full_unstemmed	Характеристика ділянки lnd-кластера Streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndY, lndYR, lndW2 і lndW
title_sort	характеристика ділянки lnd-кластера streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndy, lndyr, lndw2 і lndw
publisher	Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
publishDate	2013
topic_facet	Оригинальные работы
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/126516
citation_txt	Характеристика ділянки lnd-кластера Streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndY, lndYR, lndW2 і lndW / О. Ципік, Б. Осташ, Ю. Ребець, В. Федоренко // Цитология и генетика. — 2013. — Т. 47, № 1. — С. 11-16. — Бібліогр.: 12 назв. — укр.
series	Цитология и генетика
work_keys_str_mv	AT cipíko harakteristikadílânkilndklasterastreptomycesglobisporus1912ŝomístitʹgenilndylndyrlndw2ílndw AT ostašb harakteristikadílânkilndklasterastreptomycesglobisporus1912ŝomístitʹgenilndylndyrlndw2ílndw AT rebecʹû harakteristikadílânkilndklasterastreptomycesglobisporus1912ŝomístitʹgenilndylndyrlndw2ílndw AT fedorenkov harakteristikadílânkilndklasterastreptomycesglobisporus1912ŝomístitʹgenilndylndyrlndw2ílndw
first_indexed	2025-07-09T05:11:01Z
last_indexed	2025-07-09T05:11:01Z
_version_	1837144855856283648
fulltext	11ISSN 0564–3783. Öèòîëîãèÿ è ãåíåòèêà. 2013. ¹ 1 УДК 579.873.1:577.181.4 О. ЦИПІК 1, Б. ОСТАШ 1, Ю. РЕБЕЦЬ 2, В. ФЕДОРЕНКО 1 1 Львівський національний університет ім. Івана Франка Е-mail: v_fedorenko@franko.lviv.ua 2 Гарвардська медична школа, США ХАРАКТЕРИСТИКА ДІЛЯНКИ lnd-КЛАСТЕРА STREPTOMYCES GLOBISPORUS 1912, ЩО МІСТИТЬ ГЕНИ lndY, lndYR, lndW2 ТА lndW Ä³ëÿíêà êëàñòåðà ãåí³â á³îñèíòåçó ëàíäîì³öèíó Å (lnd-êëàñòåðà) S. globisporus 1912, ùî ôëàíêóº ñòðóêòóðí³ ãåíè lndZ4-Z6, ì³ñòèòü ÷îòèðè â³äêðèò³ ðàìêè ç÷èòóâàííÿ – lndW, lndW2, lndYR ³ lndY. Ãåí lndY êîäóº ³ìîâ³ðíó Ser/Thr ïðîòå¿íê³íàçó, êîòðà, ÿê ïåðåäáà÷àëîñÿ, ðàçîì ç ðåïðåñîðîì LndYR ìîæå êîíòðîëþâàòè ïðîäóêö³þ ëàíäîì³öèí³â ³ ìîðôîãåíåç ó S. globisporus 1912. Îäíàê ðåçóëüòàòè âèêîíàíèõ åêñïåðèìåíò³â ñâ³ä÷àòü, ùî çà ëàáîðàòîðíèõ óìîâ ãåí lndY íå çàä³ÿíèé ó öèõ ïðîöåñàõ. Ç âèêîðèñòàí- íÿì òðàíñêðèïö³éíîãî çëèòòÿ ïðîìîòîðà lndWð ³ç ðåïîðòåðíèì ãåíîì êàòåõîëäèîêñèãåíàçè xylE âèâ÷å- íî õàðàêòåð âçàºìîä³¿ ïðîìîòîðà lndWð ç ðåïðåñî- ðîì LndYR ó ÷àñ³ òà îïðàöüîâàíî ñèñòåìó ñêðèí³íãó ë³ãàíä³â LndYR in vivo. Âñòóï. Øòàì S. globisporus 1912 ïðîäóêóº àíãóöèêë³÷íèé àíòèá³îòèê ëàíäîì³öèí Å, ÿêèé âèÿâëÿº àêòèâí³ñòü ïðîòè íèçêè ðàêî- âèõ êë³òèí òà ïðèãí³÷óº ð³ñò àíòðàöèêë³í- ðåçèñòåíòíèõ ïóõëèí, ùî º éîãî óí³êàëüíîþ âëàñòèâ³ñòþ [1]. Ëàíäîì³öèí Å àêòèâí³øèé ïðîòè ðàêîâèõ êë³òèí ïîð³âíÿíî ç òàêèìè â³äîìèìè õ³ì³îòåðàïåâòè÷íèìè àãåíòàìè, ÿê áëåîì³öèí, öèñïëàòèí, ì³òîì³öèí Ñ, äîêñî- ðóá³öèí [2]. Âèÿâëåííÿ ãåíåòè÷íèõ ìåõàí³ç- ì³â, ùî ðåãóëþþòü ïðîäóêö³þ ëàíäîì³öèíó Å, º âàæëèâèì çàâäàííÿì, âèð³øåííÿ ÿêîãî äàñòü çìîãó ðîçðîáèòè ìåòîäè ðàö³îíàëüíîãî êîíñòðóþâàííÿ íàäïðîäóöåíò³â ëàíäîì³öèí³â ³ àíòèá³îòèê³â çàãàëîì. Á³îñèíòåç ëàíäîì³öèíó Å ó S. globispo- rus 1912 êîíòðîëþºòüñÿ êëàñòåðîì ç 32 ãåí³â (lnd-êëàñòåðîì). Ó íüîìó ³äåíòèô³êîâàíî ÷î- òèðè ðåãóëÿòîðíèõ ãåíè – lnd², prx, lndY òà lndYR. Äâà ïåðø³ ðîçì³ùåí³ íà 5 -ôëàíç³ lnd- êëàñòåðà. Ãåí lnd² êîäóº øëÿõ-ñïåöèô³÷íèé ðåãóëÿòîð ðîäèíè SARP, à prx – éìîâ³ðíó ïðîòå¿íàçó/åíäîïåïòèäàçó [3, 4]. Íàòîì³ñòü ãå- íè lndY ³ lndYR âèÿâëåíî íà 3 -ôëàíç³ lnd- êëàñòåðà. Ãåí lndY ìåæóº ç ãåíîì ôîñôî- ïàòåòå¿íòðàíñôåðàçè lndZ6. Ì³æ íèì âèÿâëå- íî ä³ëÿíêó ðîçì³ðîì 600 ï.í., ùî ì³ñòèòü, ³ìî- â³ðí³øå âñüîãî, ïðîìîòîð ãåíà lndY (ðèñ. 1). Ïðîäóêò ãåíà lndY âèÿâëÿº ãîìîëîã³þ äî íèçêè â³äîìèõ ïðîòå¿íê³íàç S. coelicolor. Ðàçîì ç òèì lndY ìåæóº ç ãåíîì lndYR, ùî êîäóº ðåãóëÿ- òîðíèé á³ëîê ðîäèíè GntR. ÄÍÊ-çâ’ÿçó- âàëüíà àêòèâí³ñòü á³ëê³â ö³º¿ ðîäèíè ìîäó- ëþºòüñÿ ïðè âçàºìîä³¿ ç åôåêòîðíèìè ìîëå- êóëàìè (ë³ãàíäàìè) àíàëîã³÷íî äî TetR-ïîä³á- íèõ á³ëê³â [5]. Íàø³ ïîïåðåäí³ äîñë³äæåííÿ ïîêàçàëè, ùî LndYR çàä³ÿíèé ó ïðîöåñàõ á³îñèíòåçó ëàíäîì³öèíó Å ³ ñïîðóëÿö³¿ [6]. Ç îãëÿäó íà ô³çè÷íå ç÷åïëåííÿ lndY ³ lndYR ìîæíà ïðèïóñòèòè, ùî ¿õí³ ïðîäóêòè óòâî- ðþþòü äâîêîìïîíåíòíó ñèñòåìó ñèãíàëüíî¿ òðàíñäóêö³¿, äå LndY ôîñôîðèëþº LndYR ³ ó òàêèé ñïîñ³á ìîäóëþº éîãî àêòèâí³ñòü. Ïî- ä³áí³ äâîêîìïîíåíòí³ ðåãóëÿòîðè âèÿâëåíî ó ñòðåïòîì³öåò³â. Òèïîâèì ïðèêëàäîì º ñèñòå- ìà AbsA1-AbsA2, ÿêà ëîêàë³çîâàíà ó ìåæàõ êëàñòåðà ãåí³â á³îñèíòåçó êàëüö³é-çàëåæíîãî àíòèá³îòèêà S. coelicolor [7]. Ó íàøîìó âèïàäêó ïåðøèì îá’ºêòîì ðåãóëÿòîðíî¿ ä³¿ LndYR º ãåíè ÀÂÑ-òðàíñïîðòåð³â lndW ³ lndW2, ùî ðîçì³ùåí³ ïîðó÷ ³ç lndYR [6]. Íàø³ ïîïåðåäí³ äîñë³äæåííÿ çàñâ³ä÷èëè ó÷àñòü öèõ ãåí³â ó © Î. ÖÈÏ²Ê, Á. ÎÑÒÀØ, Þ. ÐÅÁÅÖÜ, Â. ÔÅÄÎÐÅÍÊÎ, 2013 12 Î. Öèï³ê, Á. Îñòàø, Þ. Ðåáåöü, Â. Ôåäîðåíêî ISSN 0564–3783. Öèòîëîãèÿ è ãåíåòèêà. 2013. ¹ 1 íàäàíí³ ñò³éêîñò³ äî ëàíäîì³öèíó Å çà óìîâ ãåòåðîëîã³÷íî¿ åêñïðåñ³¿ [8]. Òàêèì ÷èíîì, ä³ëÿíêà lnd-êëàñòåðà, ùî ì³ñòèòü ãåíè lndY, lndYR, lndW2 ³ lndW, ìî- æå áóòè çàä³ÿíà ó ðåãóëÿö³¿ ïðîäóêö³¿ ëàí- äîì³öèí³â, çîêðåìà íà åòàï³ ¿õíüîãî òðàíñïîð- òóâàííÿ. Îäíàê ðîëü ãåíà lndY ³ ë³ãàíäè á³ëêà LndYR çàëèøàëèñü íåâ³äîìèìè. Íåâ³äîìî áóëî é òå, ÿê ó ÷àñ³ åêñïðåñóþòüñÿ ãåíè lndW ³ lndYR, ùî ìàº âàæëèâå çíà÷åííÿ, îñîáëèâî äëÿ ïîøóêó ³ìîâ³ðíèõ ë³ãàíä³â á³ëêà LndYR. Òîìó ìåòà ö³º¿ ðîáîòè ïîëÿãàëà ó äîñë³äæåí- í³ ðîë³ ãåíà lndY ³ âèâ÷åíí³ ÷àñîâîãî õà- ðàêòåðó åêñïðåñ³¿ ãåí³â lndW ³ lndYR ìåòîäîì òðàíñêðèïö³éíîãî çëèòòÿ ³ç ðåïîðòåðíèì ãå- íîì êàòåõîëäèîêñèãåíàçè xylE. Ìàòåð³àëè òà ìåòîäè. Ó ðîáîò³ âèêîðèñ- òàíî øòàì-ïðîäóöåíò ëàíäîì³öèíó Å äèêîãî òèïó S. globisporus 1912, à òàêîæ øòàìè Esche- richia coli – DH5 òà ET12567 (pUB307) [6, 7]. S. globisporus 1912 òà éîãî ïîõ³äí³ âèðî- ùóâàëè íà â³âñÿíîìó ñåðåäîâèù³, àãàð³ ×àïå- êà, ì³í³ìàëüíîìó ñåðåäîâèù³ Õîïâóäà (ÌÑ) òà â ð³äêèõ ñåðåäîâèùàõ SG, R5A ïðè òåì- ïåðàòóð³ 28 °Ñ [4, 7, 9]. Øòàìè E. coli âè- ðîùóâàëè ïðè òåìïåðàòóð³ 37 °Ñ ó ñåðåäîâè- ùi LB [7]. Ïëàçì³äè ³ âåêòîðè, ùî âèêîðèñ- òàí³ àáî ñêîíñòðóéîâàí³ ó ö³é ðîáîò³, íàâåäå- íî ó òàáëèö³. Âèä³ëåííÿ ïðåïàðàò³â ñóìàðíî¿ òà ïëàçì³ä- íî¿ ÄÍÊ, îáðîáêó ÄÍÊ åíäîíóêëåàçàìè ðåñò- ðèêö³¿, Ò4-ÄÍÊ-ë³ãàçîþ, åëåêòðîôîðåòè÷íèé àíàë³ç ÄÍÊ, òðàíñôîðìàö³þ E. coli âèêîíó- âàëè çã³äíî ç³ ñòàíäàðòíèìè ìåòîäèêàìè [7]. Ïîë³ìåðàçíó ëàíöþãîâó ðåàêö³þ (ÏËÐ) ïðîâî- äèëè, ÿê îïèñàíî ó [2], ç âèêîðèñòàííÿì ÏËÐ- ðîáîòà MiniCycler («MJ Research», ÑØÀ). Ì³æðîäîâó êîí’þãàö³þ E. coli – S. globisporus çä³éñíþâàëè çà ìîäèô³êîâàíîþ ìåòîäèêîþ Ìàçîä³ºðà [2, 9, 10]. Ëàíäîì³öèíè åêñòðàãó- âàëè òà àíàë³çóâàëè çã³äíî ç îïèñàíèìè ìå- òîäèêàìè [1, 8]. Àêòèâí³ñòü êàòåõîëäèîêñè- ãåíàçè íà 2–6-é äåíü âèðîùóâàííÿ â ÷àøêàõ âèçíà÷àëè, ÿê îïèñàíî â [7]. Ðåçóëüòàòè äîñë³äæåíü òà ¿õ îáãîâîðåííÿ. Íàäåêñïðåñ³ÿ òà ñïðÿìîâàíå ðóéíóâàííÿ ãåíà lndY ó S. globisporus 1912. ²ìîâ³ðíèé ïðîäóêò òðàíñëÿö³¿ ãåíà lndY (690 àì³íîêèñëîòíèõ çà- ëèøê³â) ïîä³áíèé (30–40 %) äî ê³ëüêîõ â³äî- ìèõ ïðîòå¿íê³íàç S. coelicolor M145 – SCO3621, SCO4487 (PkaG) òà SCO4507, ³ ì³ñòèòü õàðàê- òåðí³ êîíñåðâàòèâí³ N-òåðì³íàëüí³ ìîòèâè [6]. Ùîá ç’ÿñóâàòè, ÷è çàä³ÿíèé ïðîäóêò ãåíà lndY ó ðåãóëÿö³¿ á³îñèíòåçó ëàíäîì³öèíó Å, éîãî ôóíêö³þ äîñë³äæåíî çà äîïîìîãîþ ãåí- íî¿ íàäåêñïðåñ³¿ òà çàì³ùåííÿ â õðîìîñîì³ íà ³íàêòèâîâàíèé àëåëü lndY::aadA. Äëÿ íàä- åêñïðåñ³¿ ñòâîðåíî ïëàçì³äó ðÊÑÎÂY, ÿêà ì³ñ- òèòü lndY ï³ä êîíòðîëåì êîíñòèòóòèâíîãî ñèëüíîãî ïðîìîòîðà ãåíà ñò³éêîñò³ äî åðèò- ðîì³öèíó ermEp Saccharopolyspora erythraea [7]. Ôðàãìåíò ÄÍÊ ðîçì³ðîì 3 ò.ï.í., ùî ì³ñòèòü àëåëü lndY äèêîãî òèïó, âèä³ëåíî ç ïëàçì³äè ðÊÑ35 ÿê XbaI-EcoRI-ðåñòðèêò òà êëîíîâàíî ó âåêòîð åêñïðåñ³¿ pKC1218E ó â³äïîâ³äí³ ñàéòè, ùî ïðèâåëî äî óòâîðåííÿ ïëàçì³äè ðÊÑÎÂY. Ïëàçì³äó ðÊÑÎÂY ïåðåíåñåíî ó S. globisporus 1912 çà äîïîìîãîþ ì³æðîäîâî¿ êîí’þãàö³¿ ç Âåêòîðè ³ ïëàçì³äè, âèêîðèñòàí³ â ðîáîò³ Íàçâà Õàðàêòåðèñòèêà Ïîñèëàííÿ pSET152 pKC1139 pKC1218E pGX1 pKC35 pKCOBY pKC35aadA pSETWxylE int C31-attP aac(3)IV (Amr) lacZ oripUC19 oripSG5 (ts) aac(3)IV (Amr) lacZ oripUC19 oriSCP2 aac(3)IV (Amr) lacZ::ermEp oripUC19 pUC19, ùî ì³ñòèòü ãåí xylE pKC1139, ùî ì³ñòèòü ôðàãìåíò lnd-êëàñòåðà ðîçì³ðîì 3,5 ò.ï.í. ç ãåíîì lndY pKC1218E, ùî ì³ñòèòü BamHI-EcoRI ôðàãìåíò lnd-êëàñòåðà ðîçì³ðîì 3 ò.ï.í. ç ãåíîì lndY ï³ä êîíòðîëåì ermEp pKC35, â óí³êàëüíèé XcmI-ñàéò ÿêî¿ ó ìåæàõ ãåíà lndY êëîíîâàíî ãåí ñò³éêîñò³ äî ñïåêòèíîì³öèíó aadA pSET152, â ÿêó êëîíîâàíî òðàíñêðèïö³éíå çëèòòÿ lndWp-xylE [7] [7] [7] [10] [5] Öÿ ðîáîòà Öÿ ðîáîòà Öÿ ðîáîòà 13 Õàðàêòåðèñòèêà ä³ëÿíêè lnd-êëàñòåðà Streptomyces globisporus 1912 ISSN 0564–3783. Öèòîëîãèÿ è ãåíåòèêà. 2013. ¹ 1 Å. ñîl³. Êîëîí³¿ îòðèìàíèõ ðÊÑÎÂY+-òðàíñ- êîí’þãàíò³â íå â³äð³çíÿëèñÿ â³ä øòàìó S. glo- bisporus äèêîãî òèïó çà ìîðôîëîã³ºþ òà ð³âíåì ñïîðóëÿö³¿. Íå çì³íþâàëàñÿ é äèíàì³êà ðîñ- òó ðÊÑÎÂY+-øòàì³â çà óìîâ ãëèáèííîãî êóëüòèâóâàííÿ. Îòæå, íàäåêñïðåñ³ÿ lndY íå âïëèâàº íà ìîðôîëîã³÷íèé ðîçâèòîê S. glo- bisporus. Ìè ïîð³âíÿëè ñïåêòðè ñò³éêîñò³ S. glo- bisporus 1912 òà pKCOBY+-òðàíñêîí’þãàíò³â äî íèçêè àíòèá³îòèê³â – êàíàì³öèíó, íåîì³- öèíó, ñòðåïòîì³öèíó, ã³ãðîì³öèíó, öåôàëîòè- íó, ïåí³öèë³íó, åðèòðîì³öèíó, îëåàíäîì³öè- íó, òåòðàöèêë³íó òà ðèôàìï³öèíó, ïðîòå â³ä- ì³ííîñòåé ì³æ íèìè íå âèÿâèëè. Íàäåêñïðåñ³ÿ lndY íå âïëèâàëà òàêîæ ³ íà ð³âåíü ñèíòåçó ëàíäîì³öèíó Å â ð³äêîìó ñåðåäîâèù³ SG òà íà àãàðèçîâàíîìó â³âñÿíîìó ñåðåäîâèù³. Ñïðÿìîâàíå ðóéíóâàííÿ lndY çä³éñíþâà- ëè øëÿõîì ³íñåðö³¿ â éîãî êîäóþ÷ó ïîñë³- äîâí³ñòü ãåíà àì³íîãë³êîçèä-àäåí³ë³ëòðàíñôå- ðàçè aadA, ùî íàäàº ñò³éêîñò³ äî ñïåêòèíî- ì³öèíó [7]. Êîäóþ÷à ïîñë³äîâí³ñòü ãåíà lndY ì³ñòèòü óí³êàëüíèé ñàéò âï³çíàâàííÿ äëÿ åí- äîíóêëåàçè ðåñòðèêö³¿ XcmI, ÿêèé âèêîðèñ- òàëè äëÿ ³íñåðö³¿ ãåíà aadA. Ó ðåçóëüòàò³ îò- ðèìàëè ïëàçì³äó ðÊÑ35ààdÀ, ùî ì³ñòèòü ìó- òàíòíèé àëåëü lndY::aadA (ðèñ. 1). Òðàíñêîí’þãàíòè S. globisporus ðÊÑ35ààdÀ+ â³äáèðàëè íà ñåðåäîâèù³ ç³ ñïåêòèíîì³öèíîì ïðè 30 °Ñ. Çà öèõ óìîâ ïëàçì³äà ðåïë³êóºòüñÿ ³ ï³äòðèìóºòüñÿ ó êë³òèíàõ ñòðåïòîì³öåò³â ÿê àâòîíîìíèé ãåíåòè÷íèé åëåìåíò. Øòàì ðÊÑ35ààdÀ+ äëÿ îäåðæàííÿ ìóòàíò³â S. glo- bisporus 1912 ç³ çðóéíîâàíèì ãåíîì lndY::ààdÀ âèðîñòèëè â ð³äêîìó ñåðåäîâèù³ ÒSÂ ïðîòÿ- ãîì òðüîõ ä³á çà òåìïåðàòóðè 39 °Ñ, ïðè ÿê³é òåðìî÷óòëèâèé ðåïë³êîí pSG5 íå ôóíêö³îíóº [7]. Ï³ñëÿ ³íêóáàö³¿ çà öèõ óìîâ êë³òèíè âèñ³âàëè íà ñåðåäîâèùå ç³ ñïåêòèíîì³öèíîì. Ó ðåçóëüòàò³ âäàëîñü îòðèìàòè áëèçüêî 150 ñïåêòèíîì³öèí-ñò³éêèõ êëîí³â, ùî âîäíî- ÷àñ âèÿâèëèñü ñò³éêèìè ³ äî àïðàì³öèíó. Öå ñâ³ä÷èòü ïðî ïðîõîäæåííÿ ïåðâèííîãî êðî- ñèíãîâåðó, âíàñë³äîê ÿêîãî âñÿ ïëàçì³äà ³í- òåãðóºòüñÿ ó õðîìîñîìó çà ðàõóíîê ãîìî- ëîã³÷íî¿ ðåêîìá³íàö³¿. Äëÿ îòðèìàííÿ âòî- ðèííîãî êðîñèíãîâåðó îäèí ç êëîí³â ïåðå- ñ³ÿëè çà íåñåëåêòèâíèõ óìîâ òðè÷³. Ð³äêó êóëüòóðó ï³ñëÿ òðüîõ ïàñàæ³â ïîñ³ÿëè ó ðîç- âåäåííÿõ íà â³âñÿíå ñåðåäîâèùå. Ï³ñëÿ àíà- ë³çó 300 êëîí³â, ùî âèðîñëè íà ÷àøêàõ, âèÿâ- ëåíî îäèí êëîí, ñò³éêèé äî ñïåêòèíîì³öèíó òà ÷óòëèâèé äî àïðàì³öèíó, ùî ³ìîâ³ðíî âè- íèê âíàñë³äîê âòðàòè ïîñë³äîâíîñòåé âåêòî- ðà. Ôàêò çàì³ùåííÿ ãåíà lndY íà ìóòàíòíèé àëåëü lndY::aadA äîâåäåíî çà äîïîìîãîþ ÏËÐ ç ïðàéìåðàìè (lndYup: AATTCGTGGCC- GTGGCCGTGGC; lndYrp TTCCCCTGTG- GCCGCGACGCGC) äî ê³íö³â ãåíà lndY. Ç ãåíîìó øòàìó äèêîãî òèïó 1912 îòðèìàëè àìïë³êîí ðîçì³ðîì 2 ò.ï.í., à ç ãåíîìó lndY- ìóòàíòà – 4 ò.ï.í., ÿêèé º ðåçóëüòàòîì ³íñåðö³¿ êàñåòè ñò³éêîñò³ aadA ðîçì³ðîì 2 ò.ï.í. â êî- äóþ÷ó ïîñë³äîâí³ñòü lndY. Âèêîðèñòàâøè òàê³ ñàì³ ï³äõîäè, ÿê ³ ï³ä ÷àñ àíàë³çó íàäåêñïðåñ³¿ lndY, âñòàíîâèëè, ùî ìóòàíò íå â³äð³çíÿºòüñÿ Ðèñ. 1. Ôðàãìåíò lnd-êëàñòåðà S. globisporus 1912; ãåí lndY – êîäóº ñåðèí/òðåîí³íîâó ïðîòå¿íê³íàçó, lndYR – òðàíñêðèïö³éíèé ðåãóëÿòîð ðîäèíè GntR , lndW2 – òðàíñìåìáðàííà ñóáîäèíèöÿ ÀÂÑ-òðàíñïîðòåð³â, lndW – ÀÒÔàçíà ñóáîäèíèöÿ ÀÂÑ-òðàíñïîðòåð³â; Â – BamHI, E – EcoRI, Xc – XcmI 14 Î. Öèï³ê, Á. Îñòàø, Þ. Ðåáåöü, Â. Ôåäîðåíêî ISSN 0564–3783. Öèòîëîãèÿ è ãåíåòèêà. 2013. ¹ 1 â³ä øòàìó äèêîãî òèïó çà ñò³éê³ñòþ äî àí- òèá³îòèê³â, ñïîðóëÿö³ºþ ³ ð³âíåì á³îñèíòåçó ëàíäîì³öèíó Å. Îòæå, ïðîòå¿íê³íàçà LndY íå çàä³ÿíà â ðåãóëÿö³¿ ñèíòåçó ëàíäîì³öèíó Å òà ñïîðóëÿö³¿ S. globisporus 1912. Ìîæëèâî, lndY º ìîâ÷àçíèì ãåíîì ³ íå åêñïðåñóºòüñÿ çà ëà- áîðàòîðíèõ óìîâ àáî êîíòðîëþº ³íø³ îçíàêè S. globisporus 1912, ùî íå äîñë³äæóâàëèñÿ ó ö³é ðîáîò³. Ùîá ïåðåâ³ðèòè, ÷è â³äáóâàºòüñÿ åêñïðåñ³ÿ lndY â S. globisporus, âèêîðèñòàëè ìåòîä ÇÒ-ÏËÐ ³ ïðàéìåðè, ÿê³ îïèñàíî íà- ìè ðàí³øå [6]. Íå âèÿâèëè òðàíñêðèïòà lndY çà óìîâ âèðîùóâàííÿ S. globisporus ó ïîâíî- ö³ííîìó ñåðåäîâèù³ R5A (ðèñ. 2), íà ÿêîìó ñïîñòåð³ãàºòüñÿ âèñîêèé ð³âåíü ïðîäóêö³¿ ëàíäîì³öèí³â [6]. Öåé ðåçóëüòàò óçãîäæóºòüñÿ ç ïðèïóùåííÿì ïðî òå, ùî ãåí lndY íå åêñïðåñóºòüñÿ çà ëàáîðàòîðíèõ óìîâ âèðî- ùóâàííÿ S. globisporus. Ìîæíà òàêîæ çðîáèòè âèñíîâîê, ùî lndY íå º åëåìåíòîì äâîêîì- ïîíåíòíî¿ ñèñòåìè òðàíñäóêö³¿ çà óìîâ, çà ÿêèõ ³íø³ lnd-ãåíè àêòèâíî åêcïðåñóþòüñÿ [6]. Íà ñüîãîäí³ îïèñàíî â³äñóòí³ñòü åêñïðåñ³¿ ðåãóëÿòîðíèõ ãåí³â, ùî êîäóþòü ðåïðåñîðè á³îñèíòåçó àíòèá³îòèê³â â àêòèíîì³öåò³â, çà óìîâ ³íòåíñèâíîãî ñèíòåçó àíòèá³îòèêà. Öå, î÷åâèäíî, ïîòð³áíî äëÿ òîãî, ùîá ðîçïî÷à- ëàñü åêñïðåñ³ÿ àêòèâàòîðíèõ ãåí³â ³ â³äòàê – ñòðóêòóðíèõ ãåí³â á³îñèíòåçó àíòèá³îòèêà [11], îäíàê íîêàóò òàêèõ ãåí³â çàçâè÷àé ïðè- âîäèòü äî çì³í ó ñèíòåç³ àíòèá³îòèêà. Ó íà- øîìó âèïàäêó íîêàóò lndY íå âïëèâàâ íà ñèí- òåç ëàíäîì³öèí³â. Çàëèøàºòüñÿ íåçðîçóì³ëèì, ÿê³ ôàêòîðè íåîáõ³äí³ äëÿ ³í³ö³àö³¿ åêñïðåñ³¿ ïðîìîòîðà ãåíà lndY. Ó áóäü-ÿêîìó âèïàäêó íàøà ðîáîòà º ñâ³ä÷åííÿì, ùî ð³âåíü åêñ- ïðåñ³¿ ðåãóëÿòîðíèõ ãåí³â á³îñèíòåçó àíòè- á³îòèêà ó ìåæàõ ãåííèõ êëàñòåð³â ìîæå çíà÷- íî â³äð³çíÿòèñÿ. Òðàíñêðèïö³éíå çëèòòÿ ïðîìîòîðà ãåíà lndW òà ðåïîðòåðíîãî ãåíà xylE. Ðåçóëüòàòè ïîïåðåäí³õ äîñë³äæåíü câ³ä÷àòü, ùî LndYR ïðèãí³÷óº åêñïðåñ³þ ãåí³â ÀÂÑ-òðàíñïîðòå- ð³â lndW/W2, çâ’ÿçóþ÷èñü ç ïðîìîòîðîì ãåíà lndW [6], îäíàê õàðàêòåð åêñïðåñ³¿ lndW ³ lndYR ó ÷àñ³ â êë³òèíàõ S. globisporus íå âèâ- ÷åíî. ßê âæå çàçíà÷åíî, ðåãóëÿòîðè ðîäèíè GntR – öå ðåïðåñîðè, àêòèâí³ñòü ÿêèõ ìîäó- ëþºòüñÿ ïðè âçàºìîä³¿ ç ë³ãàíäàìè [12]. Íèí³ âæå îïèñàíî íèçêó ë³ãàíä³â äëÿ äåÿêèõ GntR- ïîä³áíèõ á³ëê³â, á³ëüø³ñòü ç ÿêèõ – äèñàõàðè- äè àáî ¿õí³ ïîõ³äí³ [5]. Ë³ãàíä, ùî âçàºìîä³º ç LndYR – íåâ³äîìèé. Äëÿ âèâ÷åííÿ õàðàêòåðó åêñïðåñ³¿ ãåí³â lndW ³ lndYR ó ÷àñ³ òà âèÿâëåí- íÿ ë³ãàíäó LndYR ñêîíñòðóþâàíî ïëàçì³äó, â ÿê³é ðåïîðòåðíèé ãåí xylE çíàõîäèòüñÿ ï³ä ïðîìîòîðîì lndWp ãåíà lndW. Ãåí xylE êîäóº êàòåõîëäèîêñèãåíàçó, ÿêà ðîçùåïëþº áåçáàðâ- íèé êàòåõîë äî çàáàðâëåíîãî ó æîâòèé êîë³ð 2-ã³äðîêñèìóêîíîâîãî íàï³âàëüäåã³äó [7]. Ä³- ëÿíêó lnd-êëàñòåðà, ùî ì³ñòèòü lndWp, àìï- ë³ô³êîâàíî çà äîïîìîãîþ ïðàéìåð³â lndWp- HindIII-up ÀÀÀÀÀTTAGACGTTCCGGGTG- ACTGCC) òà lndWp-XbaI-rp (AAATCTAGA- Ðèñ. 2. Ðåçóëüòàòè íàï³âê³ëüê³ñíîãî ÇÒ-ÏËÐ-àíà- ë³çó åêñïðåñ³¿ âèáðàíèõ lnd-ãåí³â â S. globisporus 1912: 1 – lndJ; 2 – lndY; 3 – lndYR; 4 – lndW; 5 – êîíòðîëü 16S ðÐÍÊ (rrnA) Ðèñ. 3. Ñõåìà ôóíêö³îíóâàííÿ xylE-ðåïîðòåðíî¿ ñèñòåìè: – òðàíñêðèïö³éíèé ðåãóëÿòîð LndYR, – ë³ãàíä LndYR, – LndYR, ³íàêòèâîâàíèé ë³- ãàíäîì 15 Õàðàêòåðèñòèêà ä³ëÿíêè lnd-êëàñòåðà Streptomyces globisporus 1912 ISSN 0564–3783. Öèòîëîãèÿ è ãåíåòèêà. 2013. ¹ 1 GTGTCTGCCACGCGCCTCAC). Î÷èùåíèé ïðîäóêò ÏËÐ êëîíóâàëè ó ïëàçì³äó pGX1 ïåðåä êîäóþ÷îþ ïîñë³äîâí³ñòþ ãåíà xylE, âè- êîðèñòàâøè ñàéòè ä³¿ åíäîíóêëåàç ðåñòðèê- ö³¿ HindIII ³ XbaI. Äàë³ ôðàãìåíò lndWp-xylE ðîçì³ðîì 1,7 ò.ï.í. êëîíóâàëè ó âåêòîð pSET152, ÿêèé ³íòåãðóºòüñÿ â õðîìîñîìó ñòðåïòîì³öå- ò³â ó attB-ñàéò àêòèíîôàãà Ñ31 [7]. Áóäîâó ïëàçì³äè pSET152WXylE ï³äòâåðäæåíî çà äî- ïîìîãîþ ñåêâåíóâàííÿ. Çã³äíî ç íàøîþ âèõ³äíîþ ã³ïîòåçîþ ðåï- ðåñ³ÿ òðàíñêðèïö³¿ ãåí³â ðåãóëÿòîðàìè GntR òðèâàº äîòè, äîêè êîíöåíòðàö³ÿ ë³ãàíäó LndYR íå ïåðåâèùóº ïåâíîãî ïîðîãîâîãî ð³â- íÿ. Ï³ñëÿ ïåðåâèùåííÿ öüîãî ð³âíÿ ë³ãàíä åôåêòèâíî âçàºìîä³º ç ðåïðåñîðîì, ïðèãí³÷ó- þ÷è éîãî çäàòí³ñòü çâ’ÿçóâàòè ÄÍÊ [5, 12]. LndYR ðåïðåñóº lndW çà ðàõóíîê âçàºìîä³¿ ç ïðîìîòîðîì lndW (lndWp). Öå ìîæíà âè- ÿâèòè çà â³äñóòí³ñòþ åêñïðåñ³¿ ðåïîðòåðíîãî ãåíà, òîìó ùî çì³íà çàáàðâëåííÿ êîëîí³é ïðè äîäàâàíí³ õðîìîãåííîãî ñóáñòðàòó êàòåõîëäè- îêñèãåíàçè íå â³äáóâàºòüñÿ (ðèñ. 3). Ïåðøà ÷àñîâà òî÷êà, êîëè ç’ÿâëÿºòüñÿ çàáàðâëåííÿ íàâêîëî êîëîí³é ðåïîðòåðíîãî øòàìó, ³ áóäå ò³ºþ òî÷êîþ, êîëè â êë³òèí³ íàêîïè÷èëàñü äî- ñòàòíÿ ê³ëüê³ñòü ìîëåêóë ë³ãàíäó, ùîá åôåê- òèâíî äåðåïðåñóâàòè lndWp. Òîìó íà ïåðøî- ìó åòàï³ äîñë³äæåíü ìè âèð³øèëè âèçíà÷èòè ÷àñ, êîëè â³äáóâàºòüñÿ äîñòàòíº íàêîïè÷åí- íÿ ë³ãàíäó LndYR. Ó öèõ äîñë³äàõ S. globis- porus âèðîùóâàëè íà ñåðåäîâèùàõ ×àïåêà ³ ÌÑ, îñê³ëüêè âîíè çàáåçïå÷óþòü ³íòåíñèâ- íèé ð³ñò, íå ì³ñòÿòü âóãëåâîä³â, ÿê³ ìîæóòü áóòè éìîâ³ðíèìè ë³ãàíäàìè LndYR, òà º áåç- êîë³ðíèìè. Øòàìè WXylE+ òà 1912 (êîíò- ðîëü) âèðîùóâàëè ïðîòÿãîì ï’ÿòè ä³á. Çàáàðâ- ëåííÿ íàâêîëî êîëîí³é íå ç’ÿâëÿëîñü ðàí³- øå ÷åòâåðòî¿ äîáè. Îòæå, ëèøå íà ÷åòâåðòó äîáó â êë³òèí³ ç’ÿâëÿºòüñÿ ïåâíà ðå÷îâèíà, ùî çäàòíà âçàºìîä³ÿòè ³ç LndYR, çâ³ëüíÿþ÷è ó òàêèé ñïîñ³á ïðîìîòîð lndWp. Ö³ äàí³ ï³ä- òâåðäæóþòü ïîïåðåäíº ïðèïóùåí-íÿ ïðî òå, ùî LndYR íå çâ’ÿçóºòüñÿ áåçïîñåðåäíüî ç ïðîìîòîðàìè ñòðóêòóðíèõ lnd-ãåí³â, îñê³ëüêè ï³ê åêñïðåñ³¿ lnd-ãåí³â ïðèïàäàº íà òðåòþ äî- áó [4, 6], ³, î÷åâèäíî, âîíè íå ìîæóòü ï³ä- ëÿãàòè ðåïðåñîð-í³é ä³¿ LndYR. Ñòâîðåíó ðåïîðòåðíó ñèñòåìó ìîæíà âè- êîðèñòàòè äëÿ ³äåíòèô³êàö³¿ ë³ãàíäó LndYR. Äëÿ îïðàöþâàííÿ öüîãî ï³äõîäó ìè âèðîùó- âàëè øòàìè 1912 òà WXylE ïðîòÿãîì òðüîõ ä³á. Íà öåé ìîìåíò åêñïðåñ³ÿ lndWp-xylE ïðàê- òè÷íî ïîâí³ñòþ çàáëîêîâàíà, ³ ò³ëüêè çîâ- í³øíº âíåñåííÿ ë³ãàíäó ìîæå àêòèâóâàòè ðå- ïîðòåðíèé ãåí. ßê òåñòåðí³ ìîëåêóëè âèêî- ðèñòàíî íàéá³ëüø âàæëèâ³ òà ðîçïîâñþäæåí³ ìîíî- òà äèñàõàðèäè, à ñàìå ãëþêîçó, N-àöå- òèëãëþêîçàì³í, ëàêòîçó òà ìàëüòîçó. Îñê³ëüêè S. globisporus 1912 º ïðîäóöåíòîì ëàíäîì³öèíó Å, íå âèêëþ÷åíî, ùî ñàìà ìîëåêóëà àíòèá³îòè- êà ìîæå âçàºìîä³ÿòè ç ðåãóëÿòîðîì LndYR. Öå ñòîñóºòüñÿ ³ äåÿêèõ ³íøèõ ïðåäñòàâíèê³â ðîäèíè ðåãóëÿòîð³â [5, 12], òîìó ìè äîñë³- äèëè ëàíäîì³öèí Å ÿê ïîòåíö³éíèé ë³ãàíä LndYR. Â óñ³õ âèïàäêàõ ìè íå ñïîñòåð³ãàëè çì³íè çàáàðâëåííÿ ñåðåäîâèùà. Öå ñâ³ä÷èòü ïðî òå, ùî æîäíà ç àïðîáîâàíèõ ìîëåêóë íå âèñòóïàº åôåêòîðîì LndYR. Îòæå ë³ãàíä LndYR â³äð³çíÿºòüñÿ â³ä îïèñàíèõ íà ñüîãîäí³ ë³ãàíä³â äëÿ ³íøèõ á³ëê³â íàäðîäèíè GntR ó áàêòåð³é. Äàë³ ïëàíóºòüñÿ ïðîàíàë³çóâàòè øè- ðîêå êîëî ñïîëóê ÿê ³ìîâ³ðíèõ ë³ãàíä³â LndYR . Âèñíîâêè. Âñòàíîâëåíî, ùî ãåí lndY íå âïëèâàº íà ñïîðóëÿö³þ ³ ïðîäóêö³þ ëàíäî- ì³öèí³â øòàìîì S. globisporus, îñê³ëüêè öåé ãåí íå åêïðåñóºòüñÿ çà óìîâ âèðîùóâàííÿ, ÿê³ îïòèìàëüí³ äëÿ åêñïðåñ³¿ ðåøòè lnd-ãåí³â. Âèâ÷åíî ÷àñîâèé õàðàêòåð âçàºìîä³¿ ïðîìî- òîðà lndWð ç ðåïðåñîðîì LndYR. Çà äîïîìî- ãîþ ðåïîðòåðíî¿ ñèñòåìè ïîêàçàíî, ùî ëè- øå íà ÷åòâåðòó äîáó ó êë³òèíàõ S. globisporus íàêîïè÷óºòüñÿ ñïîëóêà, ùî âçàºìîä³º ç öèì ðåïðåñîðîì. O. Tsypik, B. Ostash, Y. Rebets, V. Fedorenko CHARACTERIZATION OF STREPTOMYCES GLOBISPORUS 1912 lnd-CLUSTER REGION CONTAINING lndY, lndYR, lndW2 AND lndW GENES Streptomyces globisporus 1912 lnd-cluster region which flanks structural lndZ5-lndZ6 genes contains four open reading frames lndW, lndW2, lndYR and lndY. The latter one encodes putative proteinase which can regulate landomycin production and morphogenesis like LndYR. However, results of lndY overexpression and gene knockout showed that lndY did not participate in regulation of landomycin production and morphogenesis of Streptomyces globisporus 1912. Using transcriptional fusion of promoter lndWð to catechol dioxygenase re- porter gene xylE the temporal character of interaction of promoter lndWð and repressor LndYR was studied. 16 Î. Öèï³ê, Á. Îñòàø, Þ. Ðåáåöü, Â. Ôåäîðåíêî ISSN 0564–3783. Öèòîëîãèÿ è ãåíåòèêà. 2013. ¹ 1 Î. Öûïèê, Á. Îñòàø, Þ. Ðåáåö, Â. Ôåäîðåíêî ÕÀÐÀÊÒÅÐÈÑÒÈÊÀ Ó×ÀÑÒÊÀ lnd-ÊËÀÑÒÅÐÀ STREPTOMYCES GLOBISPORUS 1912, ÑÎÄÅÐÆÀÙÅÃÎ ÃÅÍÛ lndY, lndYR, lndW2 È lndW Ó÷àñòîê êëàñòåðà ãåíîâ áèîñèíòåçà ëàíäîìè- öèíà (lnd-êëàñòåðà) Streptomyces globisporus 1912, ôëàíêèðóþùèé ñòðóêòóðíûå ãåíû lndZ4-Z6, ñîäåð- æèò ÷åòûðå îòêðûòûå ðàìêè ñ÷èòûâàíèÿ – lndW, lndW2, lndYR è lndY. Ãåí lndY êîäèðóåò âåðîÿò- íóþ Ser/Thr ïðîòåèíêèíàçó, êîòîðàÿ, êàê ïðåä- ïîëàãàëîñü, âìåñòå ñ ðåïðåññîðîì LndYR ìîæåò êîíòðîëèðîâàòü ïðîäóêöèþ ëàíäîìèöèíîâ è ìîð- ôîãåíåç ó S. globisporus 1912. Îäíàêî ðåçóëüòàòû íàøèõ ýêñïåðèìåíòîâ ñâèäåòåëüñòâóþò î òîì, ÷òî â ëàáîðàòîðíûõ óñëîâèÿõ ãåí lndY íå ó÷àñòâóåò â ýòèõ ïðîöåññàõ. Ïðè ïîìîùè òðàíñêðèïöèîííîãî ñëèÿíèÿ ïðîìîòîðà lndWð ãåíà ÀÂÑ-òðàíñïîðòåðà lndW ñ ðåïîðòåðíûì ãåíîì êàòåõîëäèîêñèãåíàçû xylE èçó÷åí âðåìåííîé õàðàêòåð âçàèìîäåéñòâèÿ ýòîãî ïðîìîòîðà ñ LndYR è ðàçðàáîòàíà ñèñòåìà ñêðèíèíãà ëèãàíäîâ LndYR in vivo. ÑÏÈÑÎÊ Ë²ÒÅÐÀÒÓÐÈ 1. Rebets Yu., Ostash B., Fukuhara M., Nakamura T., Fedorenko V. Expression of the regulatory protein lndI for landomycin E production in S. globisporus 1912 is controlled by the availability of tRNA for the rare UUA codon // FEMS Microbiol. Lett. – 2006. – 256. – P. 30–37. 2. Ôåäîðåíêî Â.Î., Îñòàø Á.Î., Ãîí÷àð Ì.Â., Ðå- áåöü Þ.Â. Âåëèêèé ïðàêòèêóì ç ãåíåòèêè, ãåíåòè÷íî¿ ³íæåíåð³¿ òà àíàë³òè÷íî¿ á³îòåõíî- ëîã³¿ ì³êðîîðãàí³çì³â. – Ëüâ³â, 2007. – 279 ñ. 3. Dutko L., Rebets Y., Ostash B., Luzhetskyy A., Becht- hold A., Nakamura T., Fedorenko V. A putative proteinase gene is involved in regulation of lan- domycin E biosynthesis in Streptomyces globisporus 1912 // FEMS Microbiol. Lett. – 2006. – 255. – P. 280–285. 4. Rebets Y., Ostash B., Luzhetskyy A. et al. DNA- binding activity of LndI protein and temporal expression of the gene that upregulates landomycin E production in Streptomyces globisporus 1912 // Microbiology. – 2005. – 151. – P. 281–290. 5. Hoskisson P.A., Rigali S. Variation in form and function: the helix-turn-helix regulators of the GntR superfamily // Adv. Appl. Microbiol. – 2009. – 69. – P. 1–22. 6. Ostash B., Rebets Y., Myronovskyy M. et al. Iden- tification and characterization of Streptomyces glo- bisporus 1912 regulatory gene lndYR that affects spo- rulation and antibiotic production // Microbiology. – 2011. – 157, ¹ 4. – P. 1241–1250. 7. Kieser T., Bibb M.J., Buttner M.J., Chater K.F., Hopwood D.A. Practical Streptromyces genetics. – Norwich : John Innes Found, 2000. – 634 p. 8. Ostash I., Ostash B., Kobylyanskyy A., Myronovs- kyy M., Nakamura T., Walker S., Fedorenko V. An ABC transporter encoding gene lndW confers resistance to landomycin E // Arch. Microbiol. – 2008. – 190. – P. 105–109. 9. Flett F., Mersinias V., Smith C.P. High efficiency intergeneric conjugal transfer of plasmid DNA from Escherichia coli to methyl-DNA-restricting Streptomycetes // FEMS Microbiol. Lett. – 1997. – 155. – P. 223–229. 10. Lushetskyy A., Ostash B., Fedorenko V. Intergeneric conjugation Escherichia coli – Streptomyces globi- sporus 1912 using integrative plasmid pSET152 and derivatives // Rus. J. Genet. – 2001 – 37. – P. 1123– 1130. 11. Stratigopoulos G., Cundliffe E. Expression analysis of the tylosin-biosynthetic gene cluster: pivotal regulatory role of the tylQ product // Chem. Biol. – 2002. – 9, ¹ 1. – Ð. 71–78. 12. Rigalli S., Derouaux A., Giannotta F., Dusart J. Subdivision of the helix-turn-helix GntR family of bacterial regulators in the FadR, HutC, MocR and YtrA subfamilies // J. Biol. Chem. – 2002. – 277. – P. 12507–12515. Íàä³éøëà 17.12.11 << /ASCII85EncodePages false /AllowTransparency false /AutoPositionEPSFiles true /AutoRotatePages /None /Binding /Left /CalGrayProfile (Dot Gain 20%) /CalRGBProfile (sRGB IEC61966-2.1) /CalCMYKProfile (U.S. Web Coated \050SWOP\051 v2) /sRGBProfile (sRGB IEC61966-2.1) /CannotEmbedFontPolicy /Error /CompatibilityLevel 1.4 /CompressObjects /Tags /CompressPages true /ConvertImagesToIndexed true /PassThroughJPEGImages true /CreateJobTicket false /DefaultRenderingIntent /Default /DetectBlends true /DetectCurves 0.0000 /ColorConversionStrategy /CMYK /DoThumbnails false /EmbedAllFonts true /EmbedOpenType false /ParseICCProfilesInComments true /EmbedJobOptions true /DSCReportingLevel 0 /EmitDSCWarnings false /EndPage -1 /ImageMemory 1048576 /LockDistillerParams false /MaxSubsetPct 100 /Optimize true /OPM 1 /ParseDSCComments true /ParseDSCCommentsForDocInfo true /PreserveCopyPage true /PreserveDICMYKValues true /PreserveEPSInfo true /PreserveFlatness true /PreserveHalftoneInfo false /PreserveOPIComments false /PreserveOverprintSettings true /StartPage 1 /SubsetFonts true /TransferFunctionInfo /Apply /UCRandBGInfo /Preserve /UsePrologue false /ColorSettingsFile () /AlwaysEmbed [ true ] /NeverEmbed [ true ] /AntiAliasColorImages false /CropColorImages true /ColorImageMinResolution 300 /ColorImageMinResolutionPolicy /OK /DownsampleColorImages true /ColorImageDownsampleType /Bicubic /ColorImageResolution 1200 /ColorImageDepth -1 /ColorImageMinDownsampleDepth 1 /ColorImageDownsampleThreshold 1.50000 /EncodeColorImages false /ColorImageFilter /DCTEncode /AutoFilterColorImages true /ColorImageAutoFilterStrategy /JPEG /ColorACSImageDict << /QFactor 0.15 /HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1] >> /ColorImageDict << /QFactor 0.15 /HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1] >> /JPEG2000ColorACSImageDict << /TileWidth 256 /TileHeight 256 /Quality 30 >> /JPEG2000ColorImageDict << /TileWidth 256 /TileHeight 256 /Quality 30 >> /AntiAliasGrayImages false /CropGrayImages true /GrayImageMinResolution 300 /GrayImageMinResolutionPolicy /OK /DownsampleGrayImages true /GrayImageDownsampleType /Bicubic /GrayImageResolution 1200 /GrayImageDepth -1 /GrayImageMinDownsampleDepth 2 /GrayImageDownsampleThreshold 1.50000 /EncodeGrayImages false /GrayImageFilter /DCTEncode /AutoFilterGrayImages true /GrayImageAutoFilterStrategy /JPEG /GrayACSImageDict << /QFactor 0.15 /HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1] >> /GrayImageDict << /QFactor 0.15 /HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1] >> /JPEG2000GrayACSImageDict << /TileWidth 256 /TileHeight 256 /Quality 30 >> /JPEG2000GrayImageDict << /TileWidth 256 /TileHeight 256 /Quality 30 >> /AntiAliasMonoImages false /CropMonoImages true /MonoImageMinResolution 1200 /MonoImageMinResolutionPolicy /OK /DownsampleMonoImages true /MonoImageDownsampleType /Bicubic /MonoImageResolution 1200 /MonoImageDepth -1 /MonoImageDownsampleThreshold 1.50000 /EncodeMonoImages false /MonoImageFilter /CCITTFaxEncode /MonoImageDict << /K -1 >> /AllowPSXObjects false /CheckCompliance [ /None ] /PDFX1aCheck false /PDFX3Check false /PDFXCompliantPDFOnly false /PDFXNoTrimBoxError true /PDFXTrimBoxToMediaBoxOffset [ 0.00000 0.00000 0.00000 0.00000 ] /PDFXSetBleedBoxToMediaBox true /PDFXBleedBoxToTrimBoxOffset [ 0.00000 0.00000 0.00000 0.00000 ] /PDFXOutputIntentProfile (None) /PDFXOutputConditionIdentifier () /PDFXOutputCondition () /PDFXRegistryName () /PDFXTrapped /False /CreateJDFFile false /Description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> /CHS <FEFF4f7f75288fd94e9b8bbe5b9a521b5efa7684002000410064006f006200650020005000440046002065876863900275284e8e9ad88d2891cf76845370524d53705237300260a853ef4ee54f7f75280020004100630072006f0062006100740020548c002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000204ee553ca66f49ad87248672c676562535f00521b5efa768400200050004400460020658768633002> /CHT <FEFF4f7f752890194e9b8a2d7f6e5efa7acb7684002000410064006f006200650020005000440046002065874ef69069752865bc9ad854c18cea76845370524d5370523786557406300260a853ef4ee54f7f75280020004100630072006f0062006100740020548c002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000204ee553ca66f49ad87248672c4f86958b555f5df25efa7acb76840020005000440046002065874ef63002> /CZE <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> /DAN <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> /DEU <FEFF00560065007200770065006e00640065006e0020005300690065002000640069006500730065002000450069006e007300740065006c006c0075006e00670065006e0020007a0075006d002000450072007300740065006c006c0065006e00200076006f006e002000410064006f006200650020005000440046002d0044006f006b0075006d0065006e00740065006e002c00200076006f006e002000640065006e0065006e002000530069006500200068006f006300680077006500720074006900670065002000500072006500700072006500730073002d0044007200750063006b0065002000650072007a0065007500670065006e0020006d00f60063006800740065006e002e002000450072007300740065006c006c007400650020005000440046002d0044006f006b0075006d0065006e007400650020006b00f6006e006e0065006e0020006d006900740020004100630072006f00620061007400200075006e0064002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e00300020006f0064006500720020006800f600680065007200200067006500f600660066006e00650074002000770065007200640065006e002e> /ESP <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> /ETI <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> /FRA <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> /GRE <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a stvaranje Adobe PDF dokumenata najpogodnijih za visokokvalitetni ispis prije tiskanja koristite ove postavke. Stvoreni PDF dokumenti mogu se otvoriti Acrobat i Adobe Reader 5.0 i kasnijim verzijama.) /HUN <FEFF004b0069007600e1006c00f30020006d0069006e0151007300e9006701710020006e0079006f006d00640061006900200065006c0151006b00e90073007a00ed007401510020006e0079006f006d00740061007400e100730068006f007a0020006c006500670069006e006b00e1006200620020006d0065006700660065006c0065006c0151002000410064006f00620065002000500044004600200064006f006b0075006d0065006e00740075006d006f006b0061007400200065007a0065006b006b0065006c0020006100200062006500e1006c006c00ed007400e10073006f006b006b0061006c0020006b00e90073007a00ed0074006800650074002e0020002000410020006c00e90074007200650068006f007a006f00740074002000500044004600200064006f006b0075006d0065006e00740075006d006f006b00200061007a0020004100630072006f006200610074002000e9007300200061007a002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e0030002c0020007600610067007900200061007a002000610074007400f3006c0020006b00e9007301510062006200690020007600650072007a006900f3006b006b0061006c0020006e00790069007400680061007400f3006b0020006d00650067002e> /ITA <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> /JPN <FEFF9ad854c18cea306a30d730ea30d730ec30b951fa529b7528002000410064006f0062006500200050004400460020658766f8306e4f5c6210306b4f7f75283057307e305930023053306e8a2d5b9a30674f5c62103055308c305f0020005000440046002030d530a130a430eb306f3001004100630072006f0062006100740020304a30883073002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000204ee5964d3067958b304f30533068304c3067304d307e305930023053306e8a2d5b9a306b306f30d530a930f330c8306e57cb30818fbc307f304c5fc59808306730593002> /KOR <FEFFc7740020c124c815c7440020c0acc6a9d558c5ec0020ace0d488c9c80020c2dcd5d80020c778c1c4c5d00020ac00c7a50020c801d569d55c002000410064006f0062006500200050004400460020bb38c11cb97c0020c791c131d569b2c8b2e4002e0020c774b807ac8c0020c791c131b41c00200050004400460020bb38c11cb2940020004100630072006f0062006100740020bc0f002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e00300020c774c0c1c5d0c11c0020c5f40020c2180020c788c2b5b2c8b2e4002e> /LTH <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> /LVI <FEFF0049007a006d0061006e0074006f006a00690065007400200161006f00730020006900650073007400610074012b006a0075006d00750073002c0020006c0061006900200076006500690064006f00740075002000410064006f00620065002000500044004600200064006f006b0075006d0065006e007400750073002c0020006b006100730020006900720020012b00700061016100690020007000690065006d01130072006f00740069002000610075006700730074006100730020006b00760061006c0069007401010074006500730020007000690072006d007300690065007300700069006501610061006e006100730020006400720075006b00610069002e00200049007a0076006500690064006f006a006900650074002000500044004600200064006f006b0075006d0065006e007400750073002c0020006b006f002000760061007200200061007400760113007200740020006100720020004100630072006f00620061007400200075006e002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e0030002c0020006b0101002000610072012b00200074006f0020006a00610075006e0101006b0101006d002000760065007200730069006a0101006d002e> /NLD (Gebruik deze instellingen om Adobe PDF-documenten te maken die zijn geoptimaliseerd voor prepress-afdrukken van hoge kwaliteit. De gemaakte PDF-documenten kunnen worden geopend met Acrobat en Adobe Reader 5.0 en hoger.) /NOR <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> /POL <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> /PTB <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> /RUM <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> /RUS <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> /SKY <FEFF0054006900650074006f0020006e006100730074006100760065006e0069006100200070006f0075017e0069007400650020006e00610020007600790074007600e100720061006e0069006500200064006f006b0075006d0065006e0074006f0076002000410064006f006200650020005000440046002c0020006b0074006f007200e90020007300610020006e0061006a006c0065007001610069006500200068006f0064006900610020006e00610020006b00760061006c00690074006e00fa00200074006c0061010d00200061002000700072006500700072006500730073002e00200056007900740076006f00720065006e00e900200064006f006b0075006d0065006e007400790020005000440046002000620075006400650020006d006f017e006e00e90020006f00740076006f00720069016500200076002000700072006f006700720061006d006f006300680020004100630072006f00620061007400200061002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e0030002000610020006e006f0076016100ed00630068002e> /SLV <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> /SUO <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> /SVE <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> /TUR <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> /UKR <FEFF04120438043a043e0440043804410442043e043204430439044204350020044604560020043f043004400430043c043504420440043800200434043b044f0020044104420432043e04400435043d043d044f00200434043e043a0443043c0435043d044204560432002000410064006f006200650020005000440046002c0020044f043a04560020043d04300439043a04400430044904350020043f045604340445043e0434044f0442044c00200434043b044f0020043204380441043e043a043e044f043a04560441043d043e0433043e0020043f0435044004350434043404400443043a043e0432043e0433043e0020043404400443043a0443002e00200020042104420432043e04400435043d045600200434043e043a0443043c0435043d0442043800200050004400460020043c043e0436043d04300020043204560434043a0440043804420438002004430020004100630072006f006200610074002004420430002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e0030002004300431043e0020043f04560437043d04560448043e04570020043204350440044104560457002e> /ENU (Use these settings to create Adobe PDF documents best suited for high-quality prepress printing. Created PDF documents can be opened with Acrobat and Adobe Reader 5.0 and later.) >> /Namespace [ (Adobe) (Common) (1.0) ] /OtherNamespaces [ << /AsReaderSpreads false /CropImagesToFrames true /ErrorControl /WarnAndContinue /FlattenerIgnoreSpreadOverrides false /IncludeGuidesGrids false /IncludeNonPrinting false /IncludeSlug false /Namespace [ (Adobe) (InDesign) (4.0) ] /OmitPlacedBitmaps false /OmitPlacedEPS false /OmitPlacedPDF false /SimulateOverprint /Legacy >> << /AddBleedMarks false /AddColorBars false /AddCropMarks false /AddPageInfo false /AddRegMarks false /ConvertColors /ConvertToCMYK /DestinationProfileName () /DestinationProfileSelector /DocumentCMYK /Downsample16BitImages true /FlattenerPreset << /PresetSelector /MediumResolution >> /FormElements false /GenerateStructure false /IncludeBookmarks false /IncludeHyperlinks false /IncludeInteractive false /IncludeLayers false /IncludeProfiles false /MultimediaHandling /UseObjectSettings /Namespace [ (Adobe) (CreativeSuite) (2.0) ] /PDFXOutputIntentProfileSelector /DocumentCMYK /PreserveEditing true /UntaggedCMYKHandling /LeaveUntagged /UntaggedRGBHandling /UseDocumentProfile /UseDocumentBleed false >> ] >> setdistillerparams << /HWResolution [2400 2400] /PageSize [612.000 792.000] >> setpagedevice

Характеристика ділянки lnd-кластера Streptomyces globisporus 1912, що містить гени lndY, lndYR, lndW2 і lndW

Institution

Ähnliche Einträge