Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro

Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2005
Автори: Любич, Л.Д., Лісяний, М.І.
Формат: Стаття
Мова:Ukrainian
Опубліковано: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2005
Назва видання:Проблемы криобиологии и криомедицины
Теми:
Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
Онлайн доступ:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/137023
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro / Л.Д. Любич, М.І. Лісяний // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 3. — С. 335-336. — укр.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-137023
record_format dspace
spelling irk-123456789-1370232018-06-17T03:12:37Z Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro Любич, Л.Д. Лісяний, М.І. Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии 2005 Article Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro / Л.Д. Любич, М.І. Лісяний // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 3. — С. 335-336. — укр. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/137023 57.085.23.008:611.018.82.018.013 uk Проблемы криобиологии и криомедицины Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Ukrainian
topic Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
spellingShingle Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
Любич, Л.Д.
Лісяний, М.І.
Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro
Проблемы криобиологии и криомедицины
format Article
author Любич, Л.Д.
Лісяний, М.І.
author_facet Любич, Л.Д.
Лісяний, М.І.
author_sort Любич, Л.Д.
title Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro
title_short Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro
title_full Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro
title_fullStr Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro
title_full_unstemmed Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro
title_sort експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro
publisher Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
publishDate 2005
topic_facet Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/137023
citation_txt Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro / Л.Д. Любич, М.І. Лісяний // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 3. — С. 335-336. — укр.
series Проблемы криобиологии и криомедицины
work_keys_str_mv AT lûbičld ekspresíâmarkernihproteínívvprocesíkulʹtivuvannâprogenítornihnejroklítininvitro
AT lísânijmí ekspresíâmarkernihproteínívvprocesíkulʹtivuvannâprogenítornihnejroklítininvitro
first_indexed 2025-07-10T03:11:56Z
last_indexed 2025-07-10T03:11:56Z
_version_ 1837227958099509248
fulltext 335ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 УДК 57.085.23.008:611.018.82.018.013 Експресія маркерних протеїнів в процесі культивування прогеніторних нейроклітин in vitro Л.Д. ЛЮБИЧ , М.І. ЛІСЯНИЙ Інститут нейрохірургії ім.акад.А.П.Ромоданова АМН України, м.Київ Унікальні властивості нейральних стовбурових клітин (НСК) покладено в основу розробки сучасних методів клітинної і генної терапії патології нервової системи, завдяки їх здатності під дією специфічних сигналів мікрооточення генерувати всі типи нейронів і клітин глії. У зв’язку з перспективою використання культур НСК для трансплантації при нейродегенеративних захворюваннях виникає необхідність вивчення закономірностей їх розвитку і підбору адекватних умов культивування. Метою нашого дослідження було вивчення експресії білків- маркерів нейрального диференціювання при культивуванні ембріональних нейроклітин in vitro. Матеріали для досліджень: 1) нейроклітини ембріонального мозку щура (15-16 день гестації); 2) нейроклітини людини з нативного абортивного матеріалу (5-12 тижнів гестації). Клітини культи- вували у безсироватковому середовищі ДМЕМ/F12 (“Sigma”, Німеччина) з додаванням препарату інсулін-трансферин-селеніт (ІТС) (PanEco Ltd., Росія), а також при додаванні ретинола ацетату (0,2 мг/мл) (Київський вітамінний завод). Цитологічні препарати досліджували в цитоаналізаторі зобра- ження “IBAS-2000” (Німеччина) з наступною фотореєстрацією. Дані спостережень у довготривалій культурі in vitro за динамікою кількості ембріональних нейро- клітин-попередників свідчать про те, що до 9 доби культивування у безсироватковому середо-вищі ДМЕМ диференційовані клітини гинуть, а зали- шаються переважно життєздатні переживаючі малодиференційовані або недиференційовані клі- тини, очевидно, стовбурові нейральні клітини. Дода- вання в культиваційне середовище додаткових факторів (ретинола ацетату, ростового фактора з лімфоцитів, нейротрофічного фактора) стимулює проліферацію клітин-попередників або дифе- ренціювання стовбурових клітин. Морфологічне вивчення культур ембріональних нейроклітин показало, що протягом всього періоду спостереження (до 22 діб) такі клітини зберігали шаровидну форму без наявних ознак дифе- ренціювання. В культурах нейроклітин, культи- вованих в поживному середовищі з додаванням ретинола ацетату, а потім перенесених на підложку, на 15 добу культивування спостерігалось форму- вання багатоклітинних шаровидних агрегатів, описаних в літературі як нейросфери. В процесі культивування ембріональних нейро- клітин в середовищі ДМЕМ/F12 із збільшенням терміну культивування зростав відсоток клітин, що експресували віментин – маркер стовбурових/ прогеніторних клітин – (з (28,6±3,6)% на 2 добу культивування до (77,0±13,9)% на 16 добу). При цьому максимуму експресія віментину досягала на 9 добу культивування. Експресія GFAP – маркера гліобластів і астроцитів - в процесі культивування ембріональних нейроклітин в середовищі ДМЕМ/F12 практично не змінювалась із збільшенням терміну культивування. Наші дані узгоджуються з даними (Подгор- ный О.В. и др., 2004), які при вивченні культур клітин мозку ембріонів людини 9-10 тижнів гестації встановили, що при фарбуванні клітин антитілами на віментин виявляється найбільша кількість позитивних клітин, при цьому у більшості нестин- позитивних клітин коекспресований віментин (Подгорный О.В. и др., 2004; Almazryn G. et al., 2001). Як відомо, нестин маркує нейральні стовбурові клітини, а віментин – клітини-попе- редники. Крім того, частина GFAP-позитивних клітин також експресує і віментин, ці клітини мають астроцитоподібну морфологію з досить великими ядрами. Подвійна експресія ембріональними нейроклітинами GFAP і віментину може поясню- ватись тим, що для НСК характерна певна астроцитарна мімікрія (Alvarez-Buylla A. et al., 2001; Цимбалюк В.І., Медведєв В.В., 2003). Таким чином, культивовані ембріональні нейроклітини включають клітини, що знаходяться на різних стадіях розвитку: стовбурові клітини, прогенітори, нейробласти і гліобласти. Ми вважаємо, що зростання кількості віментин-пози- тивних клітин із збільшенням терміну культивування ембріональних нейроклітин у безсироватковому середовищі ДМЕМ підтверджує нашу думку про те, що в процесі тривалого культивування у вказаних умовах диференційовані клітини гинуть, а зали- шаються переважно тільки життєздатні пережи- ваючі стовбурові або прогеніторні нейральні клітини. На деяких препаратах спостерігалися клітини з двома відростками і сателітними клітинами, що прикріплялись по ходу відростків, підтверджуючи, що клітини-попередники, отримані в результаті тривалого культивування у безсироватковому Адреса для кореспонденції: Любич Л.Д., Інститут нейрохірургії імені акад. А.П.Ромоданова АМН України, м. Київ; e-mail: alla@neuro.kiev.ua 336ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 середовищі, зберігали свою поліпотентність і здат- ність до диференціювання у нейрональному на- прямку in vitro. Не виключено, що ці комплекси клітин являють собою класичні ланцюги міграції, тобто тіла нейробластоїдних клітин, що перемі- щуються вздовж відростків, і є аналогом танген- ціальної міграції слабко диференційованих нейро- бластів (Чистякова И.А. и др., 2004), а при певних умовах ці клітини можуть створювати міграційні потоки після трансплантації у мозок. Таким чином, нами встановлено, що на 9 добу культивування ембріональних нейроклітин у середовищі ДМЕМ/F12 можна отримати суспен- зію, збагачену прогеніторними нейроклітинами (віментин-позитивними на 80-85%).

Схожі ресурси