Протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы

Протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы

Исследовали токсическое действие ртути хлорида (10.9 мкМ) на культуру клеток нейробластомы IMR-32 и возможное протективное действие кардиопротектора милдроната (тестированные концентрации 0.01–10.0 мг/мл культуральной среды) в подобных экспериментальных условиях. Изолированное добавление милдронат...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Datum:2014
Hauptverfasser: Сокуренко, Л.М., Чайковский, Ю.Б.
Format: Artikel
Sprache:Russian
Veröffentlicht: Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України 2014
Schriftenreihe:Нейрофизиология
Schlagworte:
Материалы VI Конгресса Украинского общества нейронаук, посвященного 90-летию со дня рождения академика П. Г. Костюка (Киев, 4 – 8 июня 2014 г.)
Online Zugang:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/148285
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:Протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы / Л.М. Сокуренко, Ю.Б. Чайковский // Нейрофизиология. — 2014. — Т. 46, № 3. — С. 297-299. — Бібліогр.: 6 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-148285
record_format dspace
spelling irk-123456789-1482852019-02-18T01:26:04Z Протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы Сокуренко, Л.М. Чайковский, Ю.Б. Материалы VI Конгресса Украинского общества нейронаук, посвященного 90-летию со дня рождения академика П. Г. Костюка (Киев, 4 – 8 июня 2014 г.) Исследовали токсическое действие ртути хлорида (10.9 мкМ) на культуру клеток нейробластомы IMR-32 и возможное протективное действие кардиопротектора милдроната (тестированные концентрации 0.01–10.0 мг/мл культуральной среды) в подобных экспериментальных условиях. Изолированное добавление милдроната к среде не приводило к значительным негативным эффектам (количество погибших клеток не превышало 8–10 % общего количества при всех указанных концентрациях). В случае изолированного воздействия HgCl₂ погибала почти половина культивируемых клеток IMR-32 (живыми оставались в среднем 55.8 ± 1.6 %). Милдронат в концентрации 0.01 мг/мл не проявлял существенного протективного действия, но при его дозах 1.0 и 10.0 мг/мл усредненное количество живых клеток в среде, содержащей HgCl2 , достигало почти 80 %. Таким образом, милдронат продемонстрировал относительную безопасность in vitro и существенный протективный эффект в условиях интоксикации ртутью в малых дозах. Досліджували токсичну дію ртуті хлориду (10.9 мкМ) на культуру клітин нейробластоми IMR-32 та можливу протективну дію кардіопротектора мілдронату (тестовані концентрації 0.01–10.0 мг/мл культурального середовища) в подібних експериментальних умовах. Ізольоване додання мілдронату до середовища не призводило до значних негативних ефектів (кількість загиблих клітин не перевищувала 8–10 % загальної кількості при всіх вказаних концентраціях). У разі ізольованої дії HgCl₂ гинула майже половина культивованих клітин IMR-32 (живими лишались у середньому 55.8 ± 1.6 %). Мілдронат у концентрації 0.01 мг/мл не виявляв істотної протективної дії, але при його дозах 1.0 і 10.0 мг/мл усереднена кількість живих клітин у середовищі з наявністю HgCl₂ сягала майже 80 %. Таким чином, мілдронат продемонстрував відносну безпечність in vitro та істотний протективний ефект в умовах інтоксикації ртуттю в малих дозах. 2014 Article Протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы / Л.М. Сокуренко, Ю.Б. Чайковский // Нейрофизиология. — 2014. — Т. 46, № 3. — С. 297-299. — Бібліогр.: 6 назв. — рос. 0028-2561 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/148285 616-066.487-018.1:546.49]-085:612.08 ru Нейрофизиология Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Russian
topic Материалы VI Конгресса Украинского общества нейронаук, посвященного 90-летию со дня рождения академика П. Г. Костюка (Киев, 4 – 8 июня 2014 г.)
Материалы VI Конгресса Украинского общества нейронаук, посвященного 90-летию со дня рождения академика П. Г. Костюка (Киев, 4 – 8 июня 2014 г.)
spellingShingle Материалы VI Конгресса Украинского общества нейронаук, посвященного 90-летию со дня рождения академика П. Г. Костюка (Киев, 4 – 8 июня 2014 г.)
Материалы VI Конгресса Украинского общества нейронаук, посвященного 90-летию со дня рождения академика П. Г. Костюка (Киев, 4 – 8 июня 2014 г.)
Сокуренко, Л.М.
Чайковский, Ю.Б.
Протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы
Нейрофизиология
description Исследовали токсическое действие ртути хлорида (10.9 мкМ) на культуру клеток нейробластомы IMR-32 и возможное протективное действие кардиопротектора милдроната (тестированные концентрации 0.01–10.0 мг/мл культуральной среды) в подобных экспериментальных условиях. Изолированное добавление милдроната к среде не приводило к значительным негативным эффектам (количество погибших клеток не превышало 8–10 % общего количества при всех указанных концентрациях). В случае изолированного воздействия HgCl₂ погибала почти половина культивируемых клеток IMR-32 (живыми оставались в среднем 55.8 ± 1.6 %). Милдронат в концентрации 0.01 мг/мл не проявлял существенного протективного действия, но при его дозах 1.0 и 10.0 мг/мл усредненное количество живых клеток в среде, содержащей HgCl2 , достигало почти 80 %. Таким образом, милдронат продемонстрировал относительную безопасность in vitro и существенный протективный эффект в условиях интоксикации ртутью в малых дозах.
format Article
author Сокуренко, Л.М.
Чайковский, Ю.Б.
author_facet Сокуренко, Л.М.
Чайковский, Ю.Б.
author_sort Сокуренко, Л.М.
title Протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы
title_short Протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы
title_full Протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы
title_fullStr Протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы
title_full_unstemmed Протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы
title_sort протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы
publisher Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України
publishDate 2014
topic_facet Материалы VI Конгресса Украинского общества нейронаук, посвященного 90-летию со дня рождения академика П. Г. Костюка (Киев, 4 – 8 июня 2014 г.)
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/148285
citation_txt Протективный эффект милдроната при токсическом воздействии ртути хлорида на культуру клеток нейробластомы / Л.М. Сокуренко, Ю.Б. Чайковский // Нейрофизиология. — 2014. — Т. 46, № 3. — С. 297-299. — Бібліогр.: 6 назв. — рос.
series Нейрофизиология
work_keys_str_mv AT sokurenkolm protektivnyjéffektmildronatapritoksičeskomvozdejstviirtutihloridanakulʹturukletoknejroblastomy
AT čajkovskijûb protektivnyjéffektmildronatapritoksičeskomvozdejstviirtutihloridanakulʹturukletoknejroblastomy
first_indexed 2025-07-12T19:02:58Z
last_indexed 2025-07-12T19:02:58Z
_version_ 1837469007112830976
fulltext NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2014.—T. 46, № 3 297 УДК 616-066.487-018.1:546.49]-085:612.08 Л. М. СОКУРЕНКО1, Ю. Б. ЧАЙКОВСКИЙ1 ПРОТЕКТИВНЫЙ ЭФФЕКТ МИЛДРОНАТА ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ВОЗДЕЙСТВИИ РТУТИ ХЛОРИДА НА КУЛЬТУРУ КЛЕТОК НЕЙРОБЛАСТОМЫ Надійшла 05.05.14 Исследовали токсическое действие ртути хлорида (10.9 мкМ) на культуру клеток ней- робластомы IMR-32 и возможное протективное действие кардиопротектора милдроната (тестированные концентрации 0.01–10.0 мг/мл культуральной среды) в подобных экс- периментальных условиях. Изолированное добавление милдроната к среде не приводи- ло к значительным негативным эффектам (количество погибших клеток не превышало 8–10 % общего количества при всех указанных концентрациях). В случае изолирован- ного воздействия HgCl2 погибала почти половина культивируемых клеток IMR-32 (жи- выми оставались в среднем 55.8 ± 1.6 %). Милдронат в концентрации 0.01 мг/мл не проявлял существенного протективного действия, но при его дозах 1.0 и 10.0 мг/мл усредненное количество живых клеток в среде, содержащей HgCl2, достигало почти 80 %. Таким образом, милдронат продемонстрировал относительную безопасность in vitro и существенный протективный эффект в условиях интоксикации ртутью в малых дозах. КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: интоксикация, ртути (II) хлорид, милдронат, культура кле- ток, нейробласт. 1 Национальный медицинский университет им. А. А. Богомольца МЗ Украины, Киев (Украина). Эл. почта: l-sokurenko@i.ua (Л. М. Сокуренко); yuchaiko@i.ua (Ю. Б. Чайковский). ВВЕДЕНИЕ Известно, что длительное воздействие загрязни- телей окружающей среды даже в небольших до- зах может привести к патологическим процессам в нервной системе. Тяжелые металлы, особенно ртуть, играют в данном аспекте важнейшую роль [1]. В связи с этим актуален поиск препаратов, по- тенциально способных защищать ЦНС от отравле- ния малыми количествами ртути [2]. Было установлено, что милдронат – один из кар- диопротективных препаратов [3] – оказывает также заметное положительное влияние при нарушениях мозгового кровообращения и функционирования ЦНС [4]. Не исключено, что спектр позитивных эффектов этого агента может оказаться более ши- роким и он может проявлять защитное действие в условиях интоксикации солями тяжелых металлов. Мы попытались оценить эффективность и без- опасность использования милдроната in vitro при токсическом воздействии ртути хлорида (сулемы) в малых дозах на культуру клеток нейробластомы че- ловека. МЕТОДИКА Использовали метод двойного серийного культи- вирования клеток линии IMR-32 (нейробластомы человека). Культуры готовили в стандартных усло- виях; культивируемые клетки образовывали моно- слой. Данная линия культивируемых клеток была выбрана с учетом того, что она получена из орга- низма человека, ее сравнительно легко выращивать и она является нейрогенной (это позволяет экстра- полировать получаемые результаты на нейроны). Клетки культивировали в полной культуральной среде RPMI 1640 («Sigma», США) с добавлени- ем 4 мМ L-глутамина и 10 % эмбриональной те- лячьей сыворотки («Sigma», США) в увлажненной воздушной среде с 5 % СО2 при 37 °С. Среду заме- няли через день; пересев клеток производили раз в четыре дня. После двух недель культивирования культуральную среду заменяли средой идентично- го состава, но содержащую в себе ртути (II) хлорид в концентрации 10.9 мкМ. Каждое культивирова- ние в присутствии токсического агента производи- ли в трех параллельных рядах. Клетки в среде без NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2014.—T. 46, № 3298 Л. М. СОКУРЕНКО, Ю. Б. ЧАЙКОВСКИЙ добавления ртути хлорида служили контролем. Чувствительность клеток к действию ртути хло- рида, милдроната и ртути хлорида в присутствии милдроната оценивали после их окрашивания три- пановым синим в соответствии с методикой Май- Грюнвальда. Концентрацию милдроната в культу- ральной среде варьировали от 0.01 до 10.0 мг/мл. Живые клетки подсчитывали с использованием ге- моцитометра и определяли их относительное коли- чество (%). Межгрупповые сравнения выполняли с помощью t-теста Стьюдента. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ В культурах с добавлением к среде милдроната во всех использованных концентрациях наблюдалось значительное количество плотно упакованных жи- вых клеток. Среди них преобладали небольшие ба- зофильные веретеновидные, треугольные или по- лигональные клетки с несколькими отростками. Подобные клеточные элементы определялись как нейробласты. Большие светлые округлые клетки были идентифицированы как фибробласты. По- врежденные клетки обнаруживались в небольших количествах (рис. 1). Нормированное количество живых клеток было самым высоким при концен- трации милдроната 1.0 мг/мл и самым низким при высшей тестированной концентрации (10.0 мг/мл;). Таким образом, изолированное присутствие мил- дроната в культуральной среде обусловливало некоторое уменьшение количества живых кле- ток, но соответствующий декремент незначитель- но превышал 10 % лишь в случае концентрации 10.0 мг/мл (см. рисунок, 1, 3). Воздействие ртути хлорида без фармакологиче- ской коррекции приводило к существенному сни- жению относительного количества живых культи- вируемых клеток (почти вдвое, в среднем на 45.2 % по сравнению с контролем). В условиях же со- вместного присутствия ртути хлорида и милдро- ната в концентрациях 10.0 и 1.0 мг/мл количество живых клеток было существенно бóльшим, чем в условиях изолированного воздействия интоксикан- та. Относительное количество погибших клеточных элементов не превышало 21 % (см. рисунок, 2, 4). Многие клетки находились в процессе митотиче- ского деления. В случаях применения ртути хлорида и милдро- ната в низких концентрациях (0.1 и 0.01 мг/мл соот- ветственно) количества живых клеток оказались за- метно меньшими, чем в культурах с более высокой концентрацией возможного протектора. Милдронат в самой низкой из использованных концентраций (0.01 мг/мл) почти не проявлял протективного дей- ствия. Таким образом, оценка последствий применения милдроната в культуре клеток IMR-32 показала, что данный препарат оказался относительно без- опасным во всем диапазоне исследованных концен- траций (0.01–10.0 мг/мл); количество живых кле- ток в культуре было наивысшим при концентрации 1.0 мг/мл (в этих случаях погибало менее 8-9 % клеток). Экспозиция клеточной культуры IMR-32 в условиях воздействия сулемы выявила весьма су- щественную нейропротективную эффективность Р и с. 1. Нормированные количества жи- вых культивируемых клеток нейробла- стомы (%). 1 – в условиях контроля (принято за 100 %), 2 – в присутствии в культураль- ной среде 10.9 мкМ ртути хлорида, 3 – милдроната, 4 – одновременного присут- ствия ртути хлорида и милдроната. На фрагментах 3 и 4 концентрация милдро- ната для столбцов а – г 0.01, 0.1, 1.0 и 10.0 мг/мл соответственно. Звездочкой обозначены случаи достоверного разли- чия (P < 0.05) при сравнении с контро- лем, крестиком – различия при сравне- нии с показателем при изолированном действии ртути хлорида. Р и с. 1. Нормовані кількості живих куль- тивованих клітин нейробластоми (%). 0 a б в г a б в г 1 2 3* * * * * * * *+ +* 4 20 40 60 80 100 % NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2014.—T. 46, № 3 299 ПРОТЕКТИВНЫЙ ЭФФЕКТ МИЛДРОНАТА ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ РТУТИ ХЛОРИДА милдроната в случаях его наличия в концентраци- ях 1.0 и 10.0 мг/мл. Неврологические повреждения, вызываемые ма- лыми количествами ртути и ее соединений, обу- словлены воздействием ряда факторов. Это, прежде всего, взаимодействие ртути с белками, в которых присутствуют SH-группы, и развитие оксидатив- ного стресса, сопровождаемого гиперпродукци- ей свободных радикалов. Подобные эффекты обу- словливают формирование иммунных реакций и нарушения в системе гемостаза (микро- и макро- ангиопатии). Упомянутые факторы в той или иной степени связаны с метаболизмом жирных кислот и перекисным окислением липидов, что имеет особое значение для функций нервной ткани [5]. Кардио- и нейропротекторное действие милдроната, очевид- но, обусловлено прежде всего его ингибирующим влиянием на перекисное окисление жирных кислот [3, 6]. Поэтому можно предположить, что именно подавление перекисного окисления жирных кислот милдронатом в определенной степени защищает нейроны (или нейроподобные клетки) в условиях интоксикации малыми количествами ртути. Таким образом, милдронат продемонстрировал относительную безопасность в случае его изоли- рованного присутствия in vitro в концентрации по- рядка 1.0 мг/мл. Его нейропротективная эффектив- ность при интоксикации тяжелыми металлами (в частности, ртутью) может быть связана с ингибиро- ванием перекисного окисления жирных кислот. Ре- зультаты нашего исследования дают основания для дальнейшего исследования нейропротективных эф- фектов милдроната в экспериментах in vivo. Л. М. Сокуренко1, Ю. Б. Чайковський1 ПРОТЕКТИВНИЙ ЕФЕКТ МІЛДРОНАТУ ПРИ ТОКСИЧНІЙ ДІЇ РТУТІ ХЛОРИДУ НА КУЛЬТУРУ КЛІТИН НЕЙРОБЛАСТОМИ 1 Національний медичний університет ім. О. О. Богомоль- ця МОЗ України, Київ (Україна). Р е з ю м е Досліджували токсичну дію ртуті хлориду (10.9 мкМ) на культуру клітин нейробластоми IMR-32 та можливу про- тективну дію кардіопротектора мілдронату (тестовані кон- центрації 0.01–10.0 мг/мл культурального середовища) в подібних експериментальних умовах. Ізольоване додання мілдронату до середовища не призводило до значних нега- тивних ефектів (кількість загиблих клітин не перевищува- ла 8–10 % загальної кількості при всіх вказаних концентра- ціях). У разі ізольованої дії HgCl2 гинула майже половина культивованих клітин IMR-32 (живими лишались у серед- ньому 55.8 ± 1.6 %). Мілдронат у концентрації 0.01 мг/мл не виявляв істотної протективної дії, але при його дозах 1.0 і 10.0 мг/мл усереднена кількість живих клітин у середови- щі з наявністю HgCl2 сягала майже 80 %. Таким чином, міл- дронат продемонстрував відносну безпечність in vitro та іс- тотний протективний ефект в умовах інтоксикації ртуттю в малих дозах. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. T. W. Clarkson and L. Magos, “The toxicology of mercury and its chemical compounds,” Crit. Rev. Toxicol., 36, 609-662 (2006). 2. J. P. Rooney, “The role of thiols, dithiols, nutritional factors and interacting ligands in the toxicology of mercury,” Toxicology, 234, 145-156 (2007). 3. I. Kalvinsh, Mildronate: The Mechanisms of Action and Perspectives of Use, Grindex, Riga (2002). 4. N. Sjakste, A. Gutaits, and I. Kalvinsh, “Mildronate: an antiischemic drug for neurological indications,” CNS Drug Rev., 11, 151-168 (2005). 5. I. M.Trachtenberg, Yu. B. Chaikovsky, and L. M. Sokurenko, “Morphological views on mercury intoxication pathogenesis (Review of literature,” Mod. Probl. Toxicol., 1, 11-17 (2008). 6. E. Liepinsh, R. Vilskersts, D. Loca, et al., “Mildronate, an inhibitor of carnitine biosynthesis, induces an increase in gamma-butyrobetaine contents and cardioprotection in isolated rat heart infarction,” J. Cardiovascul. Pharmacol., 48, 314-319 (2006).

Ähnliche Einträge