Стимуляция синтеза РНК диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток

С помощью количественной радиоавтографии 3Н-уридиновой импульсной метки на трансформированных фибробластах джунгарского хомячка (линия 4/21) изучалось действие 1 %-ного ДМСО (обработка в течение 2 ч). Обнаружено 2–3-кратное усиление синтеза РНК в однодневной культуре с низким исходным уровнем синтез...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	1988
Hauptverfasser:	Эренпрейса, Е.А., Сьяксте, Т.Г.
Format:	Artikel
Sprache:	Russian
Veröffentlicht:	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1988
Schriftenreihe:	Биополимеры и клетка
Schlagworte:	Краткие сообщения
Online Zugang:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/153821
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Стимуляция синтеза РНК диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток / Е.А. Эренпрейса, Т.Г. Сьяксте // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 2. — С. 105-107. — Бібліогр.: 7 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-153821
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-1538212019-06-15T01:31:37Z Стимуляция синтеза РНК диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток Эренпрейса, Е.А. Сьяксте, Т.Г. Краткие сообщения С помощью количественной радиоавтографии 3Н-уридиновой импульсной метки на трансформированных фибробластах джунгарского хомячка (линия 4/21) изучалось действие 1 %-ного ДМСО (обработка в течение 2 ч). Обнаружено 2–3-кратное усиление синтеза РНК в однодневной культуре с низким исходным уровнем синтеза до уровня 3–7-дневной культуры. Последние к действию ДМСО невосприимчивы. Обсуждается триггерный характер механизма действия ДМСО на синтез РНК. За допомогою кількісної радіоавтографії 3Н-уридинової імпульсної мітки на трансформованих фібробластах джунгарського хом’яка (лінія 4/21) вивчали діи 1 %-го ДМСО (обробка протягом 2 год). Виявлено 2-3-разове посилення синтезу РНК в одноденній культурі з низьким вихідним рівнем синтезу до рівня 3–7-денної культури. Останні до дії ДМСО несприйнятливі. Обговорюється тригерний характер механізму дії ДМСО на синтез РНК. The work has been carried out by the method of quantitative pulse 3H-uridine autoradio-graphy on the line 4/21 of transformed hamster fibroblasts. As previously stated on Zaj-dela ascite hepatoma 2 h treatment with 1 % DMSO causes 2-3-fold enhancing of RNA synthesis. However, it manifests only on 24 h culture with the low ground level of RNA synthesis. The later cultures with the high RNA-synthetic activity do not respond. The trigger-like mechanism of DMSO action is discussed. 1988 Article Стимуляция синтеза РНК диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток / Е.А. Эренпрейса, Т.Г. Сьяксте // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 2. — С. 105-107. — Бібліогр.: 7 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000219 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/153821 577.21:576.3 ru Биополимеры и клетка Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Краткие сообщения Краткие сообщения
spellingShingle	Краткие сообщения Краткие сообщения Эренпрейса, Е.А. Сьяксте, Т.Г. Стимуляция синтеза РНК диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток Биополимеры и клетка
description	С помощью количественной радиоавтографии 3Н-уридиновой импульсной метки на трансформированных фибробластах джунгарского хомячка (линия 4/21) изучалось действие 1 %-ного ДМСО (обработка в течение 2 ч). Обнаружено 2–3-кратное усиление синтеза РНК в однодневной культуре с низким исходным уровнем синтеза до уровня 3–7-дневной культуры. Последние к действию ДМСО невосприимчивы. Обсуждается триггерный характер механизма действия ДМСО на синтез РНК.
format	Article
author	Эренпрейса, Е.А. Сьяксте, Т.Г.
author_facet	Эренпрейса, Е.А. Сьяксте, Т.Г.
author_sort	Эренпрейса, Е.А.
title	Стимуляция синтеза РНК диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток
title_short	Стимуляция синтеза РНК диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток
title_full	Стимуляция синтеза РНК диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток
title_fullStr	Стимуляция синтеза РНК диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток
title_full_unstemmed	Стимуляция синтеза РНК диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток
title_sort	стимуляция синтеза рнк диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток
publisher	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate	1988
topic_facet	Краткие сообщения
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/153821
citation_txt	Стимуляция синтеза РНК диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток / Е.А. Эренпрейса, Т.Г. Сьяксте // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 2. — С. 105-107. — Бібліогр.: 7 назв. — рос.
series	Биополимеры и клетка
work_keys_str_mv	AT érenprejsaea stimulâciâsintezarnkdimetilsulʹfoksidomzavisitotstadiirazvitiâkulʹturytransformirovannyhkletok AT sʹâkstetg stimulâciâsintezarnkdimetilsulʹfoksidomzavisitotstadiirazvitiâkulʹturytransformirovannyhkletok
first_indexed	2025-07-14T05:16:46Z
last_indexed	2025-07-14T05:16:46Z
_version_	1837598199214243840
fulltext	в Краткие сообщения УДК 577.21:576.3 СТИМУЛЯЦИЯ СИНТЕЗА РНК ДИМЕТИЛСУЛЬФОКСИДОМ ЗАВИСИТ ОТ СТАДИИ РАЗВИТИЯ КУЛЬТУРЫ ТРАНСФОРМИРОВАННЫХ КЛЕТОК Е. А. Эренпрейса, Т. Г. Сьяксте Диметилсульфоксид (ДМСО) привлекает внимание исследователей своей способностью вызывать в нетоксической концентрации (1—2%) дифференцировку опухолевых кле- ток, что связывают с индукцией им однонитевых разрывов Д Н К [1]. Интерес к изуче- нию непосредственного влияния ДМСО на синтез РНК возник в связи с обнаружением в клетках асцитной гепатомы Зайдела после их обработки 1 %-ным ДМСО в течение 2 ч ультраструктурных признаков интенсификации синтеза РНК [2]. Изучение включе- ния импульсной 3Н-уридиновой метки на этой модели выявило значительное увели- чение синтеза Р Н К по сравнению с контролем — в 3,2 и 4,6 раз в двух различных опы- тах [3]. В литературе имеются данные лишь о подавлении синтеза Р Н К токсическими дозами ДМСО [4]. Дальнейшее исследование этого вопроса проводилось на трансфор- мированных вирусом SV40 фибробластах джунгарского хомячка линии 4/21. Нам уда- лось выявить новые закономерности этого явления, что и является предметом данного сообщения. Материалы и методы. Линия 4/21 представлена более чем на 90 % диплоидными клетками. Культура, выращиваемая в течение 24 ч, состоит из прикрепившихся клеток, только часть которых распластана и начинает ориентироваться. Двух- и трехдневные Гистограммы распределения интенсив- ности синтеза Р Н К по клеткам в популя- ции (данные опыта № 3 табл. 2): а, б— культура, выращиваемая в течение 24 ч; в, г — 7 дней; а, в — контроль; б, г — обработка 1 %-ным ДМСО (2 ч). По вер- тикали— число клеток (%) , по горизон- тали — интенсивность синтеза РНК, вы- раженная в количестве зерен серебра в клетке 3Н-уридин-автографов (п—120) Distribution of cells according to their RNA synthetic activity (data from exp. 3, Table 2). Ordinate — the number of cells in per cents, abscissa — the number of silver grains per a cell (n= 120). а, б— 24 h culture; в, г — 7-day culture; a, в— control; б, г —trea tment with 1 % DMSO (2 h) культуры содержат полностью распластанные клетки в фазе экспоненциального роста. Семидневная культура представлена плотным монослоем. Культуру пересевали на 7-й день в среде, содержащей среду Игла, гидролизат лактальбумина и бычью сыворотку в отношении 4 , 5 : 4 , 5 : 1, а также пенициллин и стрептомицин. Клетки высевали в равных количествах (примерно по 106) во флаконы Карреля с равным количеством среды. В различные дни роста в среду на 2 ч добавляли ДМСО («Serva», ФРГ) до 1 %-ной концентрации. За 15 мин до окончания инкубации добавляли 3Н-уридин до конечной концентрации 74 кБк/мл. 105 БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА— 1988.—Т. 4, ЛЬ 2 Затем клетки снимали со стекла раствором трипсина и версена, объединяя каждый раз по три флакона на контроль и опыт, отмывали средой, приготавливали мазки в капле бычьей сыворотки, фиксировали их этанолом и уксусной кислотой (3 : 1, 10 мин), отмывали от избытка уридина 3%-ным раствором хлорной кислоты при 4°С (20 мин), промывали и высушивали. В каждой серии экспериментов использовали одни и те же реактивы, а препараты покрывали фотоэмульсией (типа М) и проявляли в одном дер- жателе одновременно. Интенсивность синтеза РНК определяли по среднему числу зе- рен проявленного серебра на 80—120 клеток, подсчет митотического индекса произво- дили в 1000 клеток. Результаты и обсуждение. В опытах на 2—3-дневных культурах усиления синтеза Р Н К под влиянием ДМСО не обнаружено (табл. 1). Предположив, что эффект ДМСО может проявиться на иной стадии выращивания, мы взяли для контрастного сравнения культуры после 24 ч и 7 дней роста. Были поставлены три одинаковые серии экспери- ментов на трех посевах. Их результаты даны в табл. 2. Обнаружено, что ДМСО вызы- Т а б л и ц а 1 в а е т У с и л е н и е синтеза Р Н К — в сред- Влияние ДМСО на интенсивность включения н е м в 2 ' 4 Р а з а в к л е т к а х 24-часовой ъ Η-уридина * культуры. На 7-дневную, как и на Influence of DMSO on a pulse label with 2—3-дневную культуры, он влияния 3 H-uridine не оказывает. Изучение гистограмм показывает, что в 7-дневной культуре ДМСО существенно не влияет на рас- пределение интенсивности синтеза Р Н К по клеткам; в 24-часовой куль- туре некоторая часть клеток устойчи- ва к действию ДМСО (рисунок). Сравниваемые культуры имеют следующие показатели пролиферации: митотические индексы составляют для 24-часовой культуры — 22 %0 (/г = 4), для 3-дневной — 22 %0 (п — 5) и для 7-дневной — 3 %о (п = 4). Таким образом, нам удалось подтвердить усиление синтеза РНК, что выражается в раннем ответе опухолевых клеток на действие не- токсической концентрации ДМСО и на другом объекте — фибробластах линии 4/21. Как и на клетках гепатомы Зайдела, повышение синтеза Р Н К весьма значительно. Вместе с тем выявляется новая закономерность — способность ДМСО вызывать эффект в зависимости от стадии роста культуры. Эффект проявляется на очень молодой куль- туре с низким уровнем синтеза РНК, он отсутствует на 2—7-дневных культурах с вы- соким уровнем синтеза РНК. Более того, анализируя данные, приведенные в табл. 2, мы видим, что ДМСО вызывает прирост синтеза РНК в 24-часовой культуре до уровня синтеза Р Н К в 7-дневной культуре. Это позволяет предположить, что ДМСО приводит в действие естественный потенциал синтеза РНК, который нормально реализуется в данных клетках при дальнейшем росте культуры. Обнаруженная нами интенсивность и альтернативность клеточного ответа дает основание предположить триггерный характер механизма действия ДМСО. Включение Т а б л и ц а 2 Влияние ДМСО на интенсивность включения 3Я-уридина в зависимости от срока роста культуры Influence of DMSO on a pulse label with 3H-uridine depending on the term of cell cultivation № опыта Возраст культуры, дни Среднее количество зерен серебра на клетку ** № опыта Возраст культуры, дни Контроль ДМСО 1 2 8 , 8 + 1 9 , 7 ± 2 2 3 1 6 ± 2 1 7 ± 3 3 3 27 ± 5 2 6 ± 7 * Здесь и в табл. 2 сравнение интенсивности синтеза Р Н К правомочно только по горизонта- ли, так как продолжительность экспозиции автографов в сериях различна. Исключение — опыт № 1 табл. 1 и опыт № 3 табл. 2. ** До- верительные интервалы рассчитаны для вероят- ности 95 % (то же в табл. 2). Среднее количество зерен серебра на клетку 24-часовая культура 7-дневная культура периментов Контроль ДМСО Прирост (кратно), Р<0,05 Контроль ДМСО Прирост (кратно), Р<0,05 1 3 , 5 ± 0 , 3 6 , 6 ± 0 , 7 1 , 9 6 , 0 ± 0 , 5 5 , 4 ± 0 , 6 Нет 2 2 , 1 ± 0 , 4 7 , 2 ± 1 , 4 3 , 4 6 , 8 ± 0 , 5 6 , 8 ± 0 , 9 Нет 3 4 , 2 ± 0 , 5 8 , 2 ± 0 , 8 2 8 , 5 ± 1 , 3 8 , 4 ± 1 , 3 Нет 106 БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА— 1988.—Т. 4, ЛЬ 2 этого механизма, на что указывает пролиферативная активность культур, непосред- ственно от нее не зависит. Общим для двух объектов, чувствительных к ДМСО (клеток асцитной гепатомы и 24-часовой культуры линии 4/21) , является отсутствие или слабое взаимодействие клеток с субстратом и между собой, существенных для реализации тка- невой дифференцировки [5]. Можно думать, что ДМСО запускает в них процесс, кото- рый естественно индуцируется в культуре при установлении монослоя. В связи с этим выполнен ряд работ по изучению положительной корреляции между плотностью клеток в культуре (точнее, степенью развития их контактов) и активацией их ядер [б]. Ран- ние явления дерепрессии генома обнаружены и при действии иного индуктора диффе- ренцировки — бутирата натрия [7]. Учитывая вышеизложенное, выдвигается предположение, что активация генома как начальный этап дифференцировки — общебиологическая закономерность. STIMULATION OF RNA SYNTHESIS BY DIMETHYL SULPHOXIDE DEPENDS ON THE DEVELOPMENTAL STAGE OF THE TRANSFORMED CELLS' CULTURE E. A. Erenpreisa, T. G. Sjakste Institute of Experimental and Clinical Medicine, Ministry of Public Health of the Latvian SSR, Riga S u m m a r y The work has been carried out by the method of quantitative pulse 3H-uridine autoradio- graphy on the line 4/21 of t ransformed hamster fibroblasts. As previously stated on Zaj- dela ascite hepatoma 2 h treatment with 1 % DMSO causes 2-3-fold enhancing of RNA synthesis. However, it manifests only on 24 h culture with the low ground level of RNA synthesis. The later cultures with the high RNA-synthetic activity do not respond. The trigger-like mechanism of DMSO action is discussed. 1. Scher W.f Friend C. Breakage of DNA and alterations in folded genoms ,by inducers of differentiation in Friend erythroleukemic ce l l s / /Cancer Res.— 1978.— 38, N 3.— P. 841—849. 2. Эренпрейса Ε. Α., Зирне Ρ. Α., Эренпрейс Я. Г. Влияние диметилсульфоксида на ультраструктуру клеток асцитной гепатомы Зайд ела/ /Цитология.— 1984.— 26, № 9.—С. 1085. 3. Эренпрейса Ε. Α., Сьяксте Т. Г., Зирне Р. А. Влияние однонитевых разрывов Д Н К на ультраструктуру и РНК-синтетическую активность хроматина опухолевых кле- ток Ц Тез. IX Всесоюз. симпоз. «Структура и функции клеточного ядра».— Черного- ловка, 1987.— С. 99. 4. Hagemann R. F. Effect of dimethyl sulfoxide on RNA synthesis in S-180 tumor cells // Experientia.— 1969.— 19, N 12.—P. 1298—1300. 5. Васильев Ю. Μ. Опухолевые клетки и их микроокружение // Вопр. онкологии.— 1984.—25, № 19.—С. 4512—4517. 6. Bolund L., Darzynkiewicz Ζ., Ringertz N. R. Cell concentration and the staining pro- perties of nuclear deoxyribonucleoprotein/ /Exp. Cell Res.— 1970.— 62, N 1.— P. 76— 89. 7. Reeves R., Cserjesi P. Sodium butyrate induces new gene expression in Friend erythro- leukemic ce l l s / / J . Biol. Chem— 1979 —254, N 10.—P. 4283—4290. НИИ эксперим. и клин, медицины М З ЛатвССР, Рига Получено 25.11.86 УДК 579.887.111:579.252 ДНК МИКОПЛАЗМ СОДЕРЖАТ ФРАГМЕНТЫ, ГОМОЛОГИЧНЫЕ ДЛИННЫМ КОНЦЕВЫМ ПОВТОРАМ ВИРУСА РАУШЕРА С. Н. Борхсениус, И. В. Раковская, О. А. Чернова, Н. А. Меркулова Микоплазмы — самые малые прокариотические организмы, способные к самостоя- тельному воспроизведению. В природе большинство микоплазм являются парази- тами растений, животных и человека [1, 2]. Микоплазмы часто сопутствуют дру- гим инфекциям и активируют персистирующие, в том числе онкогенные вирусы [3]. Осо- 107 БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА— 1988.—Т. 4, ЛЬ 2

Стимуляция синтеза РНК диметилсульфоксидом зависит от стадии развития культуры трансформированных клеток

Institution

Ähnliche Einträge