Субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток Escherichia coli
Изучена субстратная специфичность уридинфосфорилазы и пуриннуклеозидфосфорилазы в составе целых клеток Е. coli БМ-11 на примере фосфоролиза ряда аналогов уридина и синтеза соответствующих аналогов аденозина. Показано, что наиболее существенные изменения активности указанных ферментов вызывают модифи...
Збережено в:
| Дата: | 1988 |
|---|---|
| Автори: | , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1988
|
| Назва видання: | Биополимеры и клетка |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/154113 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток Escherichia coli / А.И. Зинченко, Л.А. Брошевская, В.Н. Барай, И.А. Михайлопуло // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 6. — С. 298-302 . — Бібліогр.: 18 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-154113 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-1541132019-06-16T01:26:10Z Субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток Escherichia coli Зинченко, А.И. Ерошевская, Л.А. Барай, В.Н. Михайлопуло, И.А. Клеточная биология Изучена субстратная специфичность уридинфосфорилазы и пуриннуклеозидфосфорилазы в составе целых клеток Е. coli БМ-11 на примере фосфоролиза ряда аналогов уридина и синтеза соответствующих аналогов аденозина. Показано, что наиболее существенные изменения активности указанных ферментов вызывают модификации при С-3'-атоме углеводного фрагмента уридина и аналогичные изменения в структуре рибофуранозо-1- фосфата. Вивчено субстратну специфічність уридинфосфорилази і пуриннуклеозидфосфорилази у складі цілих клітин Е. coli БМ-11 на прикладі фосфоролізу низки аналогів уридину та синтезу відповідних аналогів аденозину. Показано, що найсуттєвіші зміни активності зазначених ферментів викликають модифікації при С-3'-атомі вуглеводного фрагмента уридину та аналогічні зміни в структурі рибофуранозо-1-фосфату. Substrate specificity of uridine and purine nucleoside phosphorylases of the whole cells of Escherichia coli BM-11 has been studied monitoring phosphorolysis of uridine and a series of its analogues modified in the carbohydrate moiety to uracil and pentofuranose-I-phosphate, and synthesis of corresponding adenine nucleosides. Both enzymes reveal similar requirements to the structure and stereochemistry of uracil nucleosides and of the pentofuranose-1-phosphates, respectively, namely: a) modifications at C-3' decrease the substrate activity to a greater extent as compared with the same modifications at C-2'; the order of substrate activity in the case of modifications at C-2' and C-3' is OH> H> NH2> OH-ara (xylo)» 2'(3')-C-methyl; b) substitution of a methyl group for one of the protons at carbon atom of 5'-CH₂OH group does not lead to an essential alterations of the substrate activity in such analogues in comparison with the natural substrates — uridine and ribofuranose-1-phosphate, respectively. 1988 Article Субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток Escherichia coli / А.И. Зинченко, Л.А. Брошевская, В.Н. Барай, И.А. Михайлопуло // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 6. — С. 298-302 . — Бібліогр.: 18 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.00023C http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/154113 577.113:577.15:579 ru Биополимеры и клетка Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Клеточная биология Клеточная биология |
| spellingShingle |
Клеточная биология Клеточная биология Зинченко, А.И. Ерошевская, Л.А. Барай, В.Н. Михайлопуло, И.А. Субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток Escherichia coli Биополимеры и клетка |
| description |
Изучена субстратная специфичность уридинфосфорилазы и пуриннуклеозидфосфорилазы в составе целых клеток Е. coli БМ-11 на примере фосфоролиза ряда аналогов уридина и синтеза соответствующих аналогов аденозина. Показано, что наиболее существенные изменения активности указанных ферментов вызывают модификации при С-3'-атоме углеводного фрагмента уридина и аналогичные изменения в структуре рибофуранозо-1- фосфата. |
| format |
Article |
| author |
Зинченко, А.И. Ерошевская, Л.А. Барай, В.Н. Михайлопуло, И.А. |
| author_facet |
Зинченко, А.И. Ерошевская, Л.А. Барай, В.Н. Михайлопуло, И.А. |
| author_sort |
Зинченко, А.И. |
| title |
Субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток Escherichia coli |
| title_short |
Субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток Escherichia coli |
| title_full |
Субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток Escherichia coli |
| title_fullStr |
Субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток Escherichia coli |
| title_full_unstemmed |
Субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток Escherichia coli |
| title_sort |
субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток escherichia coli |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| publishDate |
1988 |
| topic_facet |
Клеточная биология |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/154113 |
| citation_txt |
Субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток Escherichia coli / А.И. Зинченко, Л.А. Брошевская, В.Н. Барай, И.А. Михайлопуло // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 6. — С. 298-302 . — Бібліогр.: 18 назв. — рос. |
| series |
Биополимеры и клетка |
| work_keys_str_mv |
AT zinčenkoai substratnaâspecifičnostʹuridiniurinnukleozidfosforilazvsostavecelyhkletokescherichiacoli AT eroševskaâla substratnaâspecifičnostʹuridiniurinnukleozidfosforilazvsostavecelyhkletokescherichiacoli AT barajvn substratnaâspecifičnostʹuridiniurinnukleozidfosforilazvsostavecelyhkletokescherichiacoli AT mihajlopuloia substratnaâspecifičnostʹuridiniurinnukleozidfosforilazvsostavecelyhkletokescherichiacoli |
| first_indexed |
2025-07-14T05:39:28Z |
| last_indexed |
2025-07-14T05:39:28Z |
| _version_ |
1837599627795234816 |
| fulltext |
УДК 577.113:577.15:579
СУБСТРАТНАЯ СПЕЦИФИЧНОСТЬ УРИДИН-
И ЦУРИННУКЛЕОЗИДФОСФОРИЛАЗ
В СОСТАВЕ ЦЕЛЫХ КЛЕТОК Escherichia coli
А. И. Зинченко, Л. А. Брошевская, В. Н. Барай, И. А. Михайлопуло
Введение. Нуклеозиды и нуклеотиды, модифицированные в углеводном
фрагменте молекулы, играют прогрессивно возрастающую роль в ка-
честве инструментов биохимических и молекулярно-биологических ис-
следований [1, 2], а также как виро- и цитостатики [3, 4]. Успешное
развитие исследований в указанных направлениях связано с разработ-
кой эффективных методов получения разнообразных аналогов природ-
ных рибо- и 2 /-дезоксирибонуклеозидов. Среди известных способов в
последнее время все более широко используются реакции химического
и микробиологического трансгликозилирования.
Еще в 50-е годы было показано, что некоторые бактериальные
клетки способны осуществлять тип реакций, представленный на
схеме [5]:
Бактериальные нуклеозидфосфорилазы, катализирующие вышеука-
занные реакции, представлены в основном тремя видами ферментов:
уридинфосфорилазой (КФ 2.4.2.3; УНФ), тимидинфосфорилазой (КФ
2.4.2.4) и пуриннуклеозидфосфорилазой (КФ 2.4.2.1; ПНФ). Природны-
ми субстратами для них служат соответственно уридин (Urd), тимидин
и пуриновые нуклеозиды [6]. Указанный тип равновесных реакций был
с успехом использован в последнее время для препаративного синтеза
ряда модифицированных пуриновых нуклеозидов, исходя из пуриновых
азотистых оснований и пиримидиновых нуклеозидов с модифицирован-
ным углеводным компонентом [7—10]. Преимущества этого подхода
заключаются прежде всего в существенно большей доступности моди-
фицированных пиримидиновых нуклеозидов в сравнении с аналогичны-
ми пуриновыми нуклеозидами. Кроме того, реакции микробиологиче-
ского трансгликозилирования являются стерео- и региоспецифичными и
приводят к образованию исключительно М-9~Р-нуклеозидов пуринов,
тогда как в результате химического синтеза образуются, как правило,
смеси а- и β-аномеров и позиционных изомеров [11, 12].
Значительный интерес представляет использование в ряде случаев
для синтеза нуклеозидов нуклеозидфосфорилазы в составе целых кле-
ток бактерий [7, 9, 10], что имеет, на наш взгляд, существенное пре-
имущество с практической точки зрения в сравнении с использованием
индивидуальных ферментов [8, 13].
Ранее нами был отобран штамм Е. coli БМ-11, клетки которого
содержат высокоактивные УНФ и ПНФ и способны осуществлять син-
тез нуклеозидного антибиотика 9 -β-арабинофуранозиладенина (ага-
Ade) из Ι-β-β-арабинофуранозилурацила (ara-Ura) и аденина [14], а
также кинетинрибозида из Urd и соответствующего гетероциклического
основания [15]. Целью настоящего исследования явилось изучение суб-
стратной специфичности УНФ и ПНФ по отношению к модифициро-
ванным в углеводной части нуклеозидам, поскольку именно этот вопрос
недостаточно освещен в научной литературе.
Материалы и методы. В работе были использованы аденозин, 2'-дезоксиаденозин,
гуанозин, инозин и 2'-дезоксиуридин (2'-dUrd) фирмы «Serva» (ФРГ), аденин («Rea-
nal», ВНР) . Аминодезоксинуклеозиды любезно предоставлены А. А. Краевским и
298 БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА,— 1988,—Т. 4, № 6
Л. А. Александровой, 2'-, 3'- и Б'-С-метилнуклеозиды — С. Н. Михайловым. Синтез
ara-Ade описан ранее [14]. Все остальные нуклеозиды синтезированы в лаборатории
химии нуклеотидов и полинуклеотидов Ин-та биоорг. химии АН БССР.
Биомассу клеток Е. соїі БМ-11 получали, как описано в работе [14].
Фосфоролиз нуклеозидов изучали следующим образом: реакционную смесь
(0,5 мл), содержащую 0,2 мг клеток (здесь и далее в расчете на сухую массу), нуклео-
зид в концентрации 10 мМ, 50 мМ К-фосфатный буфер, рН 7,0, инкубировали при
60 °С. После завершения инкубации пробы (50 мкл) помещали на кипящую водяную
баню (2 мин), осветляли центрифугированием при 10000 g (5 мин) и хроматографи-
ровали на тонкослойных пластинках Silufol UV-254 («Kavalier», ЧССР). Вещества
обнаруживали в УФ-свете, идентифицировали сравнением их с положением образцов-
свидетелей и элюировали 10 мМ К-фосфатным буфером, рН 7,0. Спектры поглощения
элюатов получали на спектрофотометре «Specord UV-VIS» (ГДР) . Концентрации ве-
ществ рассчитывали, используя известные коэффициенты молярных экстинкций, учиты-
вая тог факт, что изучаемые модификации в углеводной части молекулы нуклеозидов
практически не сказываются на величине молярных коэффициентов экстинкции этих
соединений. Указанная процедура анализа реакционной среды являлась общей для
всех последующих экспериментов за исключением того, что при тонкослойной хрома-
тографии продуктов фосфоролиза природных нуклеозидов применяли систему раствори-
телей бутанол-2—25 %-ный водный аммиак ( 7 : 2 ) , модифицированных — систему ра-
створителей хлороформ — этанол ( 6 : 1 ) , а при синтезе аденозина и его аналогов раз-
деление продуктов проводили в воде при температуре 2—4 °С. В тех случаях, когда не
удавалось тестировать ход реакции фосфоролиза или синтеза нуклеозидов, концентра-
цию клеток в реакционной среде увеличивали в 10 раз. Этот прием был использован
для определения эффективности фосфоролиза ara-Ura, 2 /-амино-2 /-дезоксиуридина
(2 /-NH2-2 /-dUrd), 2'-С-метилуридина (2'-C-MeUrd), ксилоуридина (xylo-Urd), З'-дезок-
сиуридина (З'-dUrd), З'-амино-З'-дезоксиуридина (3 ,-NH2-3 /-dUrd), З'-фтор-З'-дезокси-
уридина (3'-F-3'-dUrd), З'-С-метилуридина (З'-C-MeUrd) и эффективности синтеза ara-
Ade, 2'-амино-2'-дезоксиаденозина, З'-дезоксиаденозина, З'-амино-З'-дезоксиаденозина.
Эффективность фосфоролиза определяли за время, при котором выход урацила не пре-
вышал 10 %, и рассчитывали как количество урацила в мкмолях, образовавшегося в
результате реакции за 1 мин на 1 мг клеток.
Субстратную специфичность ПНФ изучали согласно следующей схеме: пробы
(0,4 мл), содержащие 0,2 мг клеток, соответствующие нуклеозиды урацила в концент-
рации 37,5 мМ, 37,5 мМ К-фосфатный буфер, рН 7,0, инкубировали при 60 °С и по исте-
чении времени, за которое достигался 30 %-ный выход продуктов реакции фосфороли-
за нуклеозида (5—120 мин), помещали на кипящую водяную баню (2 мин), после чего
клетки осаждали центрифугированием. Полученные супернатанты переносили в пробир-
ки, содержащие 100 мкл 50 мМ водного раствора аденина и 0,2 мг клеток. Пробирки
выдерживали при 60 °С и через определенные промежутки времени отбирали для ана-
лиза аликвоты по 50 мкл. Эффективность синтеза рассчитывали как количество обра-
зующегося нуклеозида аденина в мкмолях за 1 мин на 1 мг клеток.
Результаты и обсуждение. Ранее было показано [8, 16, 17], что
равновесие реакции фосфоролиза Urd под действием УНФ сдвинуто
в сторону распада нуклеозида в большей степени, чем в случае ана-
логичной реакции пуриновых нуклеозидов под действием ПНФ. Как
видно из рисунка, подобная закономерность сохраняется и для нуклео-
зидфосфорилаз изученного штамма Е. coli БМ-11. Указанная особен-
ность функционирования нуклеозидфосфорилаз обусловливает совмест-
ное применение двух рассматриваемых ферментов для синтеза моди-
фицированных пуриновых нуклеозидов [7—10, 14, 15]: УНФ служит
для гидролиза пиримидинового нуклеозида, тогда как ПНФ осуществ-
ляет синтез пуринового нуклеозида, исходя из экзогенного пуринового
гетероциклического основания и образующегося в результате первой
реакции пентофуранозо-1-фосфата (ПФФ, см. схему).
В связи с этим, субстратная специфичность УНФ была изучена
на примере фосфоролиза ряда нуклеозидов урацила, а специфичность
ПНФ — на примере синтеза пуриновых нуклеозидов.
Анализ данных по фосфоролизу урацильных нуклеозидов (табли-
ца) позволяет сделать следующие выводы. Во-первых, замена гидрок-
сильной группы при С—2'- или С—З'-атомах углерода фуранозного
БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА.— 1988.—Т. 4, № 6 299
кольца на другие атомы или атомные группы с сохранением конфигу-
рации приводит к существенному снижению субстратной активности.
Следует подчеркнуть тот факт, что присутствие гидроксильной группы
при С—2' не является важным условием для реакции фосфоролиза,
так как при переходе от Urd к 2 /-dUrd субстратная активность снижа-
ется только в 2,8 раза. Напротив, наличие гидроксильной группы при
С—3' является существенным тре-
бованием фермента к субстрату, что
следует из снижения активности в
15,6 раз при переходе от Urd к
S'-dUrd. Еще в большей мере умень-
шается субстратная активность при
Кинетика действия нуклеозидфосфорилаз
Е. coli БМ-11 на Urd (1), инозин (2), аде-
нозин (3) и гуанозин (4). За 100 % принят
полный фосфоролиз нуклеозидов
Kinetics of the Ε. coli ΒΜ-11 nucleoside pho-
sphorylase action on Urd (1), inosine (2),
adenosine (3) and guanosine (4). The com-
plete phosphorolysis of nucleosides is taken
as 100 %
переходе от Τ - и З'-dUrd к соответствующим аминодезоксианалогам,
что позволяет предположить участие 2 /-ОН-группы и в значительно
большей степени З'-ОН-группы Urd в связывании с ферментом в каче-
стве донора водородной связи. В этой связи следует отметить, что энер-
гия образования водородной связи с участием в качестве донора ОН-
группы (10—13 кДж/моль) превосходит таковую алифатических ами-
нов (1—3 кДж/моль) [18]. Дополнительным подтверждением данного
предположения является низкая субстратная активность S'-F-S'-dUrd.
Во-вторых, введение в молекулу Urd объемных метальных групп при
С—2'- и С—З'-атомах фуранозного кольца вместо соответствующих
протонов полностью лишает такие аналоги субстратной активности.
Отсутствие фосфоролитического расщепления рассматриваемых анало-
гов, по всей вероятности, обусловлено наличием объемных метальных
групп при С — 2 Г - и С—З'-атомах, препятствующих связыванию анало-
гов с активным центром фермента. Последнее предположение под-
тверждается тем, что, как было показано нами в отдельном экспери-
Субстратная специфичность УНФ и ПНФ в составе целых клеток Е. coli БМ-11
The substrate specificity of uridine phosphorylase and purine nucleoside phosphor у lase
of the E. coli BM-11 whole cells
Фосфоролиз нуклеозидов урацила Синтез адениновых нуклеозидов
Относительная Относительная
Субстрат активность УНФ, Субстрат (ПФФ) активность Субстрат
% ПНФ, %
Urd 100 Rib-1-P 100
2'-dUrd 35,5 2-dRib-l-P 78 ,8
З'-dUrd 6 ,4 3-dRib-l-P 4 ,8
2'-NH2-2'-dUrd 11,6 2-NH2-2-dRib-l-P 2 ,7
3'-NH2-3'-dUrd 0 ,6 3-NH2-3-dRib-l-P 0 ,2
3'-F-3'-dUrd 0 ,1 —
0 ,2
Ara-Ura 3 ,2 Ara-l-P 1,6
Xylo-Ura 0 ,1 —
1,6
2'-C-MeUrd 0 —
3'-C-MeUrd 0 —
5'-C-MeUrd- 5-C-MeRib-l-P-
a-L-Ыо 100 a-L-talo 92
β-D-alio 50 β-D-allo 41
П р и м е ч а н и е . Представлены средние величины результатов четырех экспериментов.
300 БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА.— 1988 — т . 4, № 6
менте, указанные С-метилпроизводные Urd не являются ингибиторами
фосфоролиза Urd под действием УНФ. В-третьих, обращение конфи-
гурации ОН-группы у С—2'- и С—З'-атомов углерода Urd приводит
к аналогам — ara-Ura и xylo-Ura — с низкой субстратной активностью.
В полном соответствии с обсуждавшимися выше данными для дезокси-
и аминодезоксианалогов Urd эффективность фосфоролиза xylo-Ura су-
щественно меньше, чем ara-Ura. В-четвертых, аналоги Urd, содержащие
метальную группу при С—Б'-атоме экзоциклической СНгОН-группы,—
б'-дезокси-а-І-талофуранозилурацил (5'-C-a-L-talo-MeUrd) и б'-дезок-
си-Р-^-аллофуранозилурацил (S'-C-p-O-allo-MeUrd) — неожиданно об-
наруживают субстратную активность на уровне природного субстра-
т а — Urd или несколько меньшую в случае последнего аналога. В дан-
ном случае размер заместителя — метальной группы при С—5'-атоме —
практически не оказывает влияния на реакцию фосфоролиза.
Субстратная специфичность ПНФ изучалась с использованием тех
аналогов Urd, для которых была показана возможность фосфоролиза
под действием УНФ. Следует подчеркнуть, что оба изучаемых фермен-
та предъявляют близкие структурные и стереохимические требования
к молекулам субстратов. Так, характер модификации при С—2'- и
С—З'-атомах ПФФ играет решающую роль в процессе синтеза адени-
новых нуклеозидов. Далее подобно реакции фосфоролиза нуклеозидов
урацила 5'—С-метилпроизводные ПФФ — 6-дезокси^-£-талофуранозо-
1-фосфат (5-C^-L-talo-MeRib-l-P) и 6-дезокси-а-Ь-аллофуранозо-1-
фосфат (5-C-a-/)-allo-MeRib-l-P) —являются эффективными субстра-
тами ПНФ.
Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют о том,
что модификации при С—2'- и С—З'-атомах углерода уменьшают суб-
стратную активность аналогов по отношению к обоим изученным фер-
ментам. При этом ряд относительных величин субстратных активнос-
тей имеет следующий вид ОН>Н>ЫН2>ОН-ага /ху1о>>2 / (3 ' ) -С-метал .
Замена одного из протонов при атоме углерода Б'-СНгОН-группы на
метильную группу не влияет существенно на изученные ферментатив-
ные реакции.
В заключение следует отметить, что, несмотря на заметное сниже-
ние эффективности реакции фосфоролиза нуклеозидов урацила и син-
теза адениновых нуклеозидов под действием соответственно УНФ и
ПНФ при переходе от природных субстратов к аналогам, модифици-
рованным при С—2'- и С—З'-атомах, высокая активность и термоста-
бильность указанных ферментов в составе целых клеток изучаемого
нами штамма бактерий позволяет подбирать такие экспериментальные
условия, в которых может быть осуществлен синтез адениновых нуклео-
зидов, исходя из существенно более доступных пиримидиновых нуклео-
зидов даже в том случае, когда они значительно уступают в субстрат-
ной активности природным нуклеозидам. Как было отмечено выше,
возможность реализации такого подхода была продемонстрирована
нами ранее на примере препаративного синтеза ara-Ade [14].
SUBSTRATE SPECIFICITY OF URIDINE AND PURINE NUCLEOSIDE
PHOSPHORYLASES OF THE ESCHERICHIA COLI WHOLE CELLS
A. I. Zintchenko, L. A. Eroshevskaya, V. N. Barai, I. A. Mikhailopulo
Institute of Microbiology, Academy of Sciences of the Byelorusian SSR, Minsk
Institute of Bioorganic Chemistry,
Academy of Sciences of the Byelorussian SSR, Minsk
S u m m a r y
Substrate specificity of uridine and purine nucleoside phosphorylases of the whole cells
of Escherichia coli BM-11 has been studied monitoring phosphorolysis of uridine and a
series of its analogues modified in the carbohydrate moiety to uracil and pentofuranose-
БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА.— 1988.—Τ. 4, № 6 4 — 8-598 301
I-phosphate, and synthesis of corresponding adenine nucleosides. Both enzymes reveal
similar requirements to the structure and stereochemistry of uracil nucleosides and of
the pentofuranose-1-phosphates, respectively, namely: a) modifications at C-3' decrease
the substrate activity to a greater extent as compared with the same modifications at
C-2'; the order of substrate activity in the case of modifications at C-2' and C-3' is OH)
H) NH2) OH-ara (xylo)» 2' (3') -C-methyl; b) substitution of a methyl group for one of
the protons at carbon atom of 5'-CH9OH group does not lead to an essential alterations
of the substrate activity in such analogues in comparison with the natural substrates —
uridine and ribofuranose-1-phosphate, respectively.
1. Suhadolnik R. J. Nucleosides as biological probes.— New York: Wiley-Interscience,
1980.-346 p.
2. Краевский Α. Α., Куханова Μ. К. Репликация ДНК у эукариот / / Итоги науки и
техники. Молекуляр. биология.— М. : ВИНИТИ, 1986.—С. 5—164 (Биоорг. химия;
Т. 2 2 ) .
3. Преображенская М. П., Мельник С. Я. Аналоги компонентов нуклеиновых кислот —
ингибиторы нуклеинового обмена / / Итоги науки и техники. Биоорг. химия.— М. :
ВИНИТИ, 1984,—Т. 1.—244 с.
4. De Clercq Ε. Chemothcrapeutic approaches to the treatment of the acquired immune
deficiency syndrome ( A I D S ) / / J . Med. Chem.— 1986,—29, N 9,—P. 1561—1569.
5. Корнберг А. Синтез ДНК.—Μ. : Мир, 1977.—360 с.
6. Hammer-Jespersen К. Nucleoside catabol ism//Metabol ism of nucleotides, nucleosi-
des and nucleobases in microorganisms / Ed. K. Hammer-Jespersen.— New York; Lon-
don: Acad, press, 1983.—P. 203—258.
7. A new method for the synthesis of some 9-p-D-arabinofuranosylpurines by a combi-
nation of chemical and enzymatic reactions / H. Morisawa, T. Utagawa, T. Mijoshi
et a l . / /Te t r ahedron Lett.— 1980,—21, N 3,—P. 479—482.
8. Krenitsky Τ. Α., Koszalka G. W., Tattle J. V. Purine nucleoside synthesis, an efficient
method employing nucleosid phosphorylases//Biochemistry.— 1981.—20, N 12.—
P. 3615—3621.
9. Microbiological synthesis of adenine arabinoside / T. Utagawa, H. Morisawa, F. Yoshi-
naga et al. / / Agr. and Biol. Chem.— 1985,—49, N 4,—P. 1053—1058.
10. Microbial synthesis of purine 2 /-amino-2 /-deoxyribosides / T. Utagawa, H. Morisawa,
S. Yamanaka et a l . / / I b i d . — N 9.—P. 2711—2717.
11. Jmazawa AL, Eckstein F. Synthesis of 3 /-azido-2 /, З'-dcoxvribofuranosyl p u r i n e s / / J .
Org. Chem.— 1978.—43, N 15.—P. 3044—3047.
12. Vorbruggen H. Methods of nucleoside synthesis / /Nucleoside analogues. Chemistry,
biology and medical applications.— New York; London: Plenum press, 1979.— V. 26.—
P. 35—69.
13. Analogs of 2 /-deoxyadenosine: facile enzymatic preparation and growth inhibitory
effects of human cell lines / M. Ch. Huang, K- Hatfield, Α. W. Roetker et a l . / / B i o -
chem. Pharmacol.— 1981,—30, N 19,—P. 2663—2671.
14. Препаративный синтез противовирусного нуклеозида 9-р-/)-арабинофуранозиладе-
нина с помощью бактериальных клеток / Л. А. Брошевская, В. Н. Барай, А. И. Зин-
ченко и др. / /Антибиотики и мед. биотехнология.— 1986.-31, № 3.— С. 174—178.
15. Synthesis of kinetin riboside and its 5'-monophosphate by immobilized bacterial cells /
I. A. Mikhailopulo, Ε. I. Kvasyuk, V. I. Lyakhovets et al. / / Nucl. Acids Symp. Ser.—
1984 — N 14 — P . 291.
16. Jensen K. F., Nygaard P. Purine nucleoside phosphorylase from Escherichia coli and
Salmonella tуphimurium / / Eur. J. Biochem.— 1975.—51, N 1— P. 253—265.
17. Properties of nucleoside phosphorylase from Enterobacter aerogenes / T. Utagawa,
H. Morisawa, S. Yamanaka et a l . / / A g r . and Biol. Chem.— 1985,—49, N 11,—
P. 3239—3246.
18. Mikhailopulo I. Α., Wieder M., Cramer F. Substrate specificity of adenosine deamina-
se: the role of the substituents at the 2'- and З'-carbons of' adenine nucleosides, of
their configuration and of the conformation of the furanose r ing / /B iochem. Pharma-
col.—1981—30, N 9,—P. 1001—1004.
Ин-т микробиологии АН БССР, Минск Получено 03.06.87
Ин-т биоорг. химии АН БССР, Минск
302 " ^ Щ ^ И И Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА.— 1У88.—Т. 4, № б
|