Клонирование плазмидоподобных митохондриальных ДНК кукурузы и изучение некоторых свойств полученных рекомбинантных плазмид

Получены гибридные плазмиды двух типов, содержащие Sl- и S2- последовательности митохондриальных ДНК кукурузы линии ВИР 44МС. Первый тип включает фрагменты, а второй — полные последовательности с развернутыми инвертированными повторами в центре. Показано, что рекомбинантные плазмиды второго типа не...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Datum:1990
Hauptverfasser: Мартынов, С.А., Бух, И.Г., Малюта, С.С.
Format: Artikel
Sprache:Russian
Veröffentlicht: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1990
Schriftenreihe:Биополимеры и клетка
Schlagworte:
Online Zugang:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/154224
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:Клонирование плазмидоподобных митохондриальных ДНК кукурузы и изучение некоторых свойств полученных рекомбинантных плазмид / С.А. Мартынов, И.Г. Бух, С.С. Малюта // Биополимеры и клетка. — 1990. — Т. 6, № 6. — С. 100-105. — Бібліогр.: 20 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-154224
record_format dspace
spelling irk-123456789-1542242019-06-16T01:30:05Z Клонирование плазмидоподобных митохондриальных ДНК кукурузы и изучение некоторых свойств полученных рекомбинантных плазмид Мартынов, С.А. Бух, И.Г. Малюта, С.С. Краткие сообщения Получены гибридные плазмиды двух типов, содержащие Sl- и S2- последовательности митохондриальных ДНК кукурузы линии ВИР 44МС. Первый тип включает фрагменты, а второй — полные последовательности с развернутыми инвертированными повторами в центре. Показано, что рекомбинантные плазмиды второго типа не являются APП -элементами для дрожжей. При введении гибридных плазмид в интактные растения кукурузы обнаруживаются низкомолекулярные фракции в ДНК митохондрий. Отримано гібридні плазміди двох типів, що містять S1- і S2-послідовності мітохондріальних ДНК кукурудзи лінії ВІР 44МС. Перший тип включає фрагменти, а другий – повні послідовності з розгорнутими інвертованими повторами в центрі. Показано, що рекомбінантні плазміди другого типу не є APП-елементами для дріжджів. При введенні гібридних плазмід в інтактні рослини кукурудзи виявляються низькомолекулярні фракції в ДНК мітохондрій. Hybrid plasmids of two types containing S1 and S2-sequences of mitochondrial maize var. BUP 44 MC are obtained. The first type contains fragments, and the second one – the full sequences with the inverted repeated sequences in the centre of molecules. Recombinant plasmids of the second type have been shown not to be ARS-elements for yeast cells. While introducing hybrid plasmid into intact maize plants the low-weight fractions are found in mitochondrial DNA. 1990 Article Клонирование плазмидоподобных митохондриальных ДНК кукурузы и изучение некоторых свойств полученных рекомбинантных плазмид / С.А. Мартынов, И.Г. Бух, С.С. Малюта // Биополимеры и клетка. — 1990. — Т. 6, № 6. — С. 100-105. — Бібліогр.: 20 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0002AA http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/154224 577.113 + 123.5 ru Биополимеры и клетка Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Russian
topic Краткие сообщения
Краткие сообщения
spellingShingle Краткие сообщения
Краткие сообщения
Мартынов, С.А.
Бух, И.Г.
Малюта, С.С.
Клонирование плазмидоподобных митохондриальных ДНК кукурузы и изучение некоторых свойств полученных рекомбинантных плазмид
Биополимеры и клетка
description Получены гибридные плазмиды двух типов, содержащие Sl- и S2- последовательности митохондриальных ДНК кукурузы линии ВИР 44МС. Первый тип включает фрагменты, а второй — полные последовательности с развернутыми инвертированными повторами в центре. Показано, что рекомбинантные плазмиды второго типа не являются APП -элементами для дрожжей. При введении гибридных плазмид в интактные растения кукурузы обнаруживаются низкомолекулярные фракции в ДНК митохондрий.
format Article
author Мартынов, С.А.
Бух, И.Г.
Малюта, С.С.
author_facet Мартынов, С.А.
Бух, И.Г.
Малюта, С.С.
author_sort Мартынов, С.А.
title Клонирование плазмидоподобных митохондриальных ДНК кукурузы и изучение некоторых свойств полученных рекомбинантных плазмид
title_short Клонирование плазмидоподобных митохондриальных ДНК кукурузы и изучение некоторых свойств полученных рекомбинантных плазмид
title_full Клонирование плазмидоподобных митохондриальных ДНК кукурузы и изучение некоторых свойств полученных рекомбинантных плазмид
title_fullStr Клонирование плазмидоподобных митохондриальных ДНК кукурузы и изучение некоторых свойств полученных рекомбинантных плазмид
title_full_unstemmed Клонирование плазмидоподобных митохондриальных ДНК кукурузы и изучение некоторых свойств полученных рекомбинантных плазмид
title_sort клонирование плазмидоподобных митохондриальных днк кукурузы и изучение некоторых свойств полученных рекомбинантных плазмид
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate 1990
topic_facet Краткие сообщения
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/154224
citation_txt Клонирование плазмидоподобных митохондриальных ДНК кукурузы и изучение некоторых свойств полученных рекомбинантных плазмид / С.А. Мартынов, И.Г. Бух, С.С. Малюта // Биополимеры и клетка. — 1990. — Т. 6, № 6. — С. 100-105. — Бібліогр.: 20 назв. — рос.
series Биополимеры и клетка
work_keys_str_mv AT martynovsa klonirovanieplazmidopodobnyhmitohondrialʹnyhdnkkukuruzyiizučenienekotoryhsvojstvpolučennyhrekombinantnyhplazmid
AT buhig klonirovanieplazmidopodobnyhmitohondrialʹnyhdnkkukuruzyiizučenienekotoryhsvojstvpolučennyhrekombinantnyhplazmid
AT malûtass klonirovanieplazmidopodobnyhmitohondrialʹnyhdnkkukuruzyiizučenienekotoryhsvojstvpolučennyhrekombinantnyhplazmid
first_indexed 2025-07-14T05:53:23Z
last_indexed 2025-07-14T05:53:23Z
_version_ 1837600503299571712
fulltext S Краткие сообщения УДК 577.113 + 123.5 С. А. Мартынов, И. Г. Бух, С, С. Малюта КЛОНИРОВАНИЕ ПЛАЗМИДОПОДОБНЫХ МИТОХОНДРИАЛЬНЫХ ДНК КУКУРУЗЫ И ИЗУЧЕНИЕ НЕКОТОРЫХ СВОЙСТВ ПОЛУЧЕННЫХ РЕКОМБИНАНТНЬІХ ПЛАЗМИД * Получены гибридные плазмиды двух типов, содержащие Sl- и S2- последовательности митохондриальных ДНК кукурузы линии ВИР 44МС. Первый тип включает фрагменты, а второй — полные последовательности с развернутыми инвертированными повторами в центре. Показано, что рекомбинантные плазмиды второго типа не являются AP Π - элементами для дрожжей. При введении гибридных плазмид в интактные растения кукурузы обнаруживаются низкомолекулярные фракции в ДНК митохондрий. Введение. За последние годы появилось большое количество работ, посвященных изучению структурно-функциональных особенностей вне- ядерных геномов высших растений. Исследованию митохондриального генома растений, как одной из этих систем, уделяется особое внимание, поскольку накоплено большое количество данных о связи митохондрий с целым рядом практически важных свойств, таких как адаптационная изменчивость, устойчивость к патотоксинам и химическим стрессовым факторам, цитоплазматическая мужская стерильность (ЦМС) и др. [1, 2]. При формировании ЦМС, проявляющейся в наследственной де- градации пыльцы на определенном этапе микроспорогенеза, наблюда- ются сложные взаимодействия генома ядра и цитоплазмы. Подтвержде- нием такого взаимодействия является обнаруженная гомология между последовательностями Д Н К митохондрий, хлоропластов и ядер [3]. Одним из интереснейших аспектов изучения ЦМС является ее связь с наличием в митохондриях растений наряду с высокомолекулярной Д Н К во многих, хотя и не во всех, случаях плазмидоподобных кольце- вых и линейных молекул Д Н К размером от 1 до 10 т.п. н. [4]. Такие Д Н К найдены в митохондриях кукурузы, сорго, конских бобов, лука, подсолнечника, петунии и др. [5—10]. Для кукурузы, геиетика ЦМС которой изучена наиболее детально, характерно наличие трех типов стерильности: T f C f S . Митохондриальпая Д Н К S-типа характеризуется присутствием двух плазмид, названных Sl и S2, имеющих размеры 6,4 и 5,4 т. п. н. соответственно. Транспозоноподобная структура этих эпи- сом, а также другие структурно-функциональные особенности предпо- лагают их участие в рекомбинационных событиях, являющихся причи- ной перестроек в митохондриальной ДНК, что в свою очередь и при- водит к появлению ЦМС у растений [11]. Целью данного исследования является изучение структурных изме- нений митохондриального генома кукурузы при взаимодействии с соз- * Представлена членом редколлегии В. А. Кордюмом. © С. А. МАРТЫНОВ, И. Г. БУХ, С. С. МАЛЮТА, 1990 100 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1990. Т. 0. Л<> б данными нами гибридными плазмидами, содержащими как фрагменты Si-, ^-последовательностей, так и оригинальные конструкции, имею- щие в своем составе полные плазмидоподобные митохондриальные ДНК. Кроме того, нам представлялось интересным проверить клониро- ванные структуры Sl и S2 на наличие в них последовательностей, спо- собных к автономной репликации (АРП-элементы) в гетерологичной системе — клетках дрожжей. Материалы и методы. В работе использовали фертильную линию кукурузы Вир 44 и ее ЦМС-аналог ВИР 44МС, полученные из Краснодарской опытной станции Всесоюз. Ин-та растениеводства. Штамм дрожжей Saccharomyces eerevisiae L-20 и плазмиды дрожжей RB4, pYF40, YIpl предоставлены сотрудниками отдела регуляторных механизмов клетки Ин-та молекуляр. биологии и генетики АН УССР. Остальные плазмиды и реципиентные штаммы бактерий взяты из коллекции отдела генной инженерии того же института. Очистку и выделение митохондрий, получение из них препаратов митохопдриаль- ной Д Н К проводили но методу Хэнсона [4]. S l - и 52-плазмидоподобные Д Н К митохондрий кукурузы элюировали из 0,8 %- ного агарозного геля с последующей трехкратной депротеинизацией смесыо: фенол — хлороформ — изоамиловый спирт (1:1:24). Электронную микроскопию митохондриальной Д Н К и Si, S2 плазмидоподобных Д Н К осуществляли по методу Дэвиса [12]. Трансформацию дрожжевых клеток в при- сутствии LiCl — по [13]. Реакции рестрикции, лигирования, ник-трансляции и блот-гибридизацию по Саузер- ну проводили, как описано в руководстве [14]; обработку растений кукурузы гибрид- ными плазмидами — согласно [15]. Результаты и обсуждение. Из кукурузы линии ВИР 44МС (мужскостерильная цитоплазма S-типа) был получен лизат митохон- дрий. При электронно-микроскопическом анализе лизата наряду с вы- сокомолекулярными фрагментами нами были обнаружены два типа кольцевых молекул с контурной длиной 1,9 и 1,7 мкм (рис. 1). После фенольной депротеинизации и элюции из агарозного геля S l - и S2-no- следовательностей в препаратах присутствовали в основном линейные молекулы с контурными длинами 2,0 и 1,8 мкм соответственно. Соглас- но литературным данным [16, 17], кольцевая структура Д Н К неочи- щенного лизата митохондрий может быть обусловлена наличием моле- кулы белка, ковалентно связанной с ней в области повторяющихся по- следовательностей. В качестве вектора при конструировании рекомбинантных плазмид,. содержащих Sl- и S^-последовательности митохондриальной ДНК кукурузы, была использована плазмида pBR322. На основе этого век- тора получены плазмиды, содержащие фрагменты последовательностей Sl и S2 (плазмиды I типа). Одна из рекомбинантных плазмид I типа ·— pZMS8 — содержит фрагмент Si-последовательности от уникального сайта SalGI и включает область гомологии с 52-последовательностьк> около 5 392 п.о. Вторая плазмида — pZMH65 — содержит фрагмент ^-последовательности от уникального сайта HitidIII до конца плазми- ды с областью гомологии со структурой Sl около 3600 п. о. Для обеих плазмид характерно наличие открытой рамки считывания URF-2 (1017 п. о.), что соответствует 339 аминокислотным остаткам. А у плаз- миды pZMS8 в клонированной последовательности присутствует откры- тая рамка считывания URF-4 (768 п. о.), что соответствует 256 амино- кислотным остаткам [18]. Транспозоноподобная структура Sl- и 52-последовательностей ми- тохондриальной Д Н К кукурузы, а именно: наличие в их составе на концах длинных инвертированных повторов предполагает существова- ние возможных механизмов интеграции в ядерную или мйтохондриаль- ную ДНК. Вероятность такого события явилась предпосылкой для кон- 101 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1990. Т. 0. Л<> б струирования рекомбинантных плазмид, в которых бы присутствовали инвертированные повторы в общей структуре плазмиды. При конструи- ровании плазмид такого типа (II тип плазмид) концы каждой клони- руемой последовательности были лигированы, а полученные в резуль- тате кольцевые формы рестрицированы по одиночным сайтам SalGI и HindIII для SI- и 52-структур соответственно. Развернутые линейные молекулы, содержащие в центре по два инвертированных повтора, Рис. 1. Электроннограмма препаратов Sl и S2 плазмидоподобных митохондриальных Д Н К кукурузы (в качестве репера использована Д Н К плазмиды pBR322) Fig. 1. Electron microscopic photo of Sl and S2 plasmid-like mitochondrial DNAs from Zeya mats (pBR322 DNA has been used as a control molecule) Рис. 2. Схема получения рекомбинантных плазмид, содержащих Sl- и ,^-последова- тельности митохондриальных Д Н К кукурузы Fig. 2. A flow chart of production of recombinant plasmids containing Sl-and S2-sequen- ces from mitochondrial maize DNA примыкающих друг к другу, были встроены в pBR322 по указанным сайтам. Схема конструирования гибридных плазмид I и II типа и их рестрикционный анализ представлены на рис. 2 и 4. Опыт создания гибридных плазмид, имеющих в своем составе раз- вернутые Sl- и 52-молекулы с двумя инвертированными повторами в центре, показал их отличие от плазмид с фрагментами Sl- и ^ - посл е - довательностей не только структурно, но и по ростовым характеристи- кам содержащих их бактериальных культур. Так, например, в плане физиологических признаков отмечался слабый рост всех 24 полученных клонов, содержащих последовательности митохондриальной Д Н К ку- курузы в жидкой питательной среде. В связи с этим наработку биомас- сы этих клеток проводили на чашках Петри с последующим смыванием бактериального газона. Отличие таких плазмид по ростовым характе- ристикам бактериальных клеток, их содержащих, наводит на мысль, что присутствие в плазмиде двух лигированных разнонаправленных повторов, принадлежащих концам Sl- и S-2-последовательностей, затруд- няет репликацию гибридной молекулы. Одним из возможных объясне- 102 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1990. Т. 0. Л<> б ний такого явления могла бы оказаться инициация репликации в обла- сти инвертированных повторов и столкновение репликативных комп- лексов, движущихся навстречу друг другу со стороны инвертированно- го повтора и области инициации репликации векторной части плазмиды pBR322. Именно поэтому представлялось целе- сообразным проверить способность Si-, S2-ми- тохондриальных плазмид инициировать репли- кацию в гетерологичных для них системах, в частности, в клетках дрожжей. С этой целью мы сконструировали рекомбинантные плазмиды pYF40Sl и YIplS2, (рис. 3), не имеющие обла- сти инициации репликации для клеток дрож- жей. О наличии автономно реплицирующихся последовательностей (АРП-элементы) судили по эффективности трансформации клеток дрож- жей рекомбинантными плазмидами со встроен- ными Sl- и ^-последовательностями митохонд- риальных Д Н К кукукузы. Согласно литератур- ным данным, присутствие А Р П в гибридных Рис. 3. Схема получения рекомбинантных плазмид на основе дрожжевых векторов, содержащих Sl- и S2- последовательности Д Н К кукурузы Fig. 3. A flow chart of production of recombinant plasmids using yeast vectors, contai- n ing Sl - and S-2-m.aize DNA sequences Рис. 4. Электрофореграммы препаратов Д Н К гибридных плазмид, обработанных рест- риктазами: а — плазмида pZMH65 — обработка SalGI (1)\ pZMS8 — BamHI (2)\ pBR322 — BamHI (S); Д Н К бактериофага X-HindIII (4)\ б —плазмида pZMS25 — обработка SalGI (/); pZMH26 — HindIII (2); Д Н К бактериофага λ -EcoRi (3); Д Н К бактериофага λ —BamHI (4)\ Д Н К бактериофага λ — HindIII (5); в — плазмида pZMS25 — обработка BamHI (1); pZMH26 —SalGI (2); Д Н К бактериофага λ — HindIII (3) Fig. 4. Elecirophoregrams of restricted hybrid plasmid DNAs: a — pZmII65 plasrnid after SalGI treatment (I); pZMS8 — BamHI (2); pBR322 — BamHI (3); λ phage DNA- HindIII (4); б — pZMS25 plasmid after SalGI treatment (1); pZMH26 — HindIII (2); λ phage DNA — ECORI (3); λ phage D N A - BamHI (4); λ phage ON A —Hind III (5); в — pZMS25 plasmid after BamHI treatment (Z); pZMS26 — SalGI (2); λ phage D N A - HindIII (3) плазмидах обеспечивает повышение эффективности трансформации клеток дрожжей в десятки и сотни раз [19]. Это и было предпосылкой к использованию для наших целей разработанной системы трансфор- мации клеток дрожжей, обработанных солями щелочных металлов [13]. Контролем уровня трансформации служила двурепликонная плаз- мида RB4, имеющая область инициации репликации как кишечной па- лочки, так и дрожжей. Данные проведенных экспериментов по транс- формации приведены в таблице. Как можно видеть из полученных дан- ных, рекомбинантные плазмиды pYF40Sl и YIplS2 не трансформируют клеток дрожжей, т. е. при данной конструкции Sl- и 52-структуры ми- 103 I S S N 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1990. Т. 0. Л<> б тохондриальной ДНК, встроенные в векторы для клеток дрожжей, не осуществляют функции автономно реплицирующихся последова- тельностей. Для того чтобы установить, влияет ли обработка кукурузы гибрид- ными плазмидами на состояние ее ДНК, мы предприняли попытку проследить судьбу этих плазмид в митохондриях растений. При иссле- довании митохондриальной ДНК, выделенной из линии кукурузы Эффективность трансформации реципиентных клеток дрожжей и кишечной палочки рекомбинантными плазмидами Transformation efficiency of yeast and Ε. coli recipient cells hy recombinant plasmids Число Селектив- трансфор- Штамм Плазмида ный мар- мантов кер на 1 мкг Д Н К Рис. 5. Электрофоретический (а) и гибридизационный (б) анализ Д Н К митохондрий кукурузы: 1 — митохон- дриальная Д Н К кукурузы ВИР 44 — вариант обработки растений S2-со- держащей плазмидой; 2 — то же, но 57-содержащей плазмидой; 3 — м и т о - хондриальная Д Н К кукурузы ВИР 44; 4 — плазмида pZMH65 Fig. 5. Analysis of maize mitochon- drial DNAs using electrophoresis (a) and hybridization (б): 1 — mitochon- drial DNA of maize BUP44 — from S2-plasmid-treated plants; 2 — the sa- me object treated by Sl-plasmid, 3— mitochondrial DNA of maize BUP 44; 4 — pZMH65 plasmid E. coli S. cerevisiae pY F 40 pYF40Sl YJpl YlpS 2 RB4 pYF40 pYF40Sl YIpl YlplS ? RB 4 Ap Ap Cm Cm Ap his his leu leu leu 3,4-IO4 1,8-IO4 3.7-IO3 8.8-IO3 5,3-IO3 3,7· IO1 0 2-Ю1 0 1,6-Ю8 ВИР 44 (фертильный вариант), об- работанной гибридными плазмида- ми (плазмиды I типа), мы обнаружи- ли ряд изменений. На рис. 5 пред- ставлены данные экспериментов по блот-гибридизации препаратов мито- хондриальной Д Н К из контрольных и опытных, обработанных гибридны- ми плазмидами с Sl- и 52-последова- тельностями, растений кукурузы. Из результатов следует, что мито- хондриальная Д Н К из контрольного варианта растений не содержит свободных плазмидоподобных структур, в то время как в опытных вариантах наблюдается появление фрагментов, гибридизующихся с зондом (плазмида pZMH65, меченная [3 2P] СТР) и приблизительно соответствующих по молекулярной массе Sl- и ^-последовательнос- тям митохондриальной Д Н К кукурузы. Итак, результаты проведенных исследований показывают, что, с одной стороны, Sl- и ^-последовательности Д Н К митохондрий куку- рузы в составе бактериальных векторов не обладают свойствами авто- номно реплицирующихся структур (данные по трансформации клеток дрожжей), что, казалось бы, не свидетельствует в пользу наличия в них области инициации репликации; с другой стороны, гибридные плазми- ды, вероятно, обладают способностью к репликации в митохондриях (данные блот-гибридизации). Последнее обстоятельство согласуется с данными других авторов [20], которые на интактных митохондриях проростков кукурузы показали не только способность к репликации, но и наличие определенной матричной активности бактериальных векторов. Дальнейшие исследования в этом направлении могут оказаться одним из подходов к изучению некоторых аспектов структурно-функ- циональных особенностей митохондриального генома растений. 104 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1990. Т. 0. Л<> б STRUCTURAL AND FUNCTIONAL CHARACTERS OF PLASMID-LIKE MITOCHONDRIAL MAIZE DNA S. A. Martynov, I. G. Bukh, S. S. Malyuta Institute of Molecular Biology and Genetics, Academy of Sciences of the Ukrainian SSR, Kiev S u m m a r y Hybrid plasmids of two types containing Sl and S2-sequenccs of mitochondrial maize var. BUP 44 MC are obtained. The first type contains fragments, and the second one — the full sequences with the inverted repeated sequences in the centre of molecules. Re- combinant plasmids of the second type have been shown not to be ARS-elements for yeast cells. While introducing hybrid plasmid into intact maize plants the low-weight fractions are found in mitochondrial DNA. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Mitochondrial sensitivity to Drechslera maydis T-toxin and synthesis of a variant mitochondrial polypeptide in plants derived from maize tissue culture with texas male- sterile cy top l a sm/L . K- Dixon, C. J. Leaver, R. I. S. Brettell et a l . / /Theor . and Appl. Genet.— 1982.—63, N 1.—P. 75—80. 2. Levings C. S., III. Cytoplasmic male s ter i l i ty / /Genet , eng. of plants: Agr. perspect. proc. symp.—New York; London, 1983 — P . 81—92. 3. Kemble R. J., Mans R. J., Gabay-Laughman S. Sequences homologous to episomal mitochondrial DNAs in the maize nuclear genome // Nature .— 1983.— 304.— P. 744—747. 4. Hanson M. R., Conde M. F. Functioning and variation of cytoplasmic genomes: les- sons from cytoplasmic-nuclear interactions affecting male fertility in plants 11 Int. Rev. Cytol.— 1985,— 94.— P. 213—267. 5. Laughman F. RGabay-Laughman S. Cytoplasmic male sterility in ma ize / /Ann . Rev. Genet.— 1983,— 17,— P. 24—48. 6. Chase C. D., Pring D. R. Circular plasmid DNAs from mitochondria of sorgum bico- I o r / / P l a n t . Мої. Biol.—1985.—5, N 5,—P. 303—312. 7. Mitochondrial plasmid-like molecules and male sterile Vicia faba L. / J. Golbet. M. Boutry, G. Due, M. Br iquet / / Ib id .— 1983.—2, N 5.—P. 305—309. 8. Holford P., Newbury H. JGroft / . H. Differences in the mitochondrial DNA of male-fertile, cms-S and cms-T onions/ /Eucarpia-Sec. Vegetables: Proc. 4th Allium Symp. (Coventry, 6—9 Sept., 1988).— Wellssbourne, 1988,—P. 205—211. 9. Sequence of a mitochondrial plasmid of sunflower and its relationship to other mi- tochondrial p l a s m i d s / C . Perez, B. Dujon, P. Heizman, S. Berville // Plant Sci.— 1988.—58, N L — P . 59—69. 10. Hanson M. R., Young E. G., Rothenberg M. Sequence and expression of a fuced mitochondrial gene, associated with Petunia cytoplasmic male sterility, compared with normal mitochondrial genes in fertile and sterile plants // Phil. Trans. Roy. Soc. London В.— 1988.—319, N 1193.—P. 199—208. 11. Brendel V., Segel L. A. On modes of recombination, replication, and segregation of the higher plant mitochondrial g e n o m e / / J . Theor. Biol— 1987— 125, N 2 - P. 163—176. 12. Davis R., Simon M., Davidson N. Electrone microscope heteroduplex methods for mapping regions of base sequences homology in nucleic acids // Meth. Enzymol.— 1971,—21.— P. 413—428. 13. Transformation of intact yeast cell treated with alkali cations / H. Ito, G. Fucuda, K. Murata et al. / / J . Bacter id .— 1983.— 153, N 1,—P. 163—169. 14. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекуляр- ное клонирование.— М. : Мир, 1984.— 480 с. 15. Ohta Y. High-efficiency genetic t ransformation of maize by a mixture of pollen and exogenous D N A / / P r o c . Nat. Acad. Sci. USA.— 1986.—83, N 2 ,—P. 715—719. 16. Kemble R. J., Thompson R. D. Sl and S2, the linear mitochondrial DNAs present in a male sterile line of maize, possess terminally attached pro te ins / /Nuc l . Acids Res.— 1982,— 10, N 24.—P. 8181—8190. 17. Electron microscopy study of the plasmid-like DNAs of maize mitochondria / R. H. Meints, W. Hu, A. Schuster et a l . / /Maydica .— 1989.—34, N 3 .—P. 197—205. 18. Pillard MSederoff R. R., Levings C. S. Nucleotide sequence of the Sl mitochondrial DNA from the S cytoplasm of m a i z e / / T h e EMBO J.— 1985.—4, N 5 ,—P. 1125—1128. 19. Palzhill T. G., Oliver S. G., Newlon C. S. DNA sequence analysis of ARS elements from chromosome III of Saccharomyces cerevisiae identification of a new conserved sequence/ /Nucl . Acids Res.— 1986.— 14, N 15.—P. 6247—6264. 20. Синтез Д Н К в интактных митохондриях кукурузы, обработанных бактериальными векторными плазмидами серии pBR / Ю. М. Константинов, Н. В. Подсосонный, Г. Н. Луценко, М. И. Ривкин//Биополимеры и клетка.— 1989.— 5, JVb 4.— С. 98—102. Ин-т молекуляр. биологии и генетики АН УССР, Киев Получено 10.05.90 105 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1990. Т. 0. Л<> б