Клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения

Клонирован ген α₁- антитрипсина (α 1АТ) человека. При использовании в качестве зонда его первого кодирующего экзона изолирована молекула кДНК, содержащая почти полную кодирующую последовательность. Определена нуклеотидная последовательность регуляторной области гена α₁ АТ, ответственной за его экспр...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	1989
Hauptverfasser:	Незнанов, Н.С., Макарова, И.В., Крамерова, И.А., Газарян, К.Г.
Format:	Artikel
Sprache:	Russian
Veröffentlicht:	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1989
Schriftenreihe:	Биополимеры и клетка
Schlagworte:	Дискуссии
Online Zugang:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/154411
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения / Н.С. Незнанов, И.В. Макарова, И.А. Крамерова, К.Г. Газарян // Биополимеры и клетка. — 1989. — Т. 5, № 2. — С. 43-47. — Бібліогр.: 11 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-154411
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-1544112019-06-16T01:32:13Z Клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения Незнанов, Н.С. Макарова, И.В. Крамерова, И.А. Газарян, К.Г. Дискуссии Клонирован ген α₁- антитрипсина (α 1АТ) человека. При использовании в качестве зонда его первого кодирующего экзона изолирована молекула кДНК, содержащая почти полную кодирующую последовательность. Определена нуклеотидная последовательность регуляторной области гена α₁ АТ, ответственной за его экспрессию в печени. Обсуждается возможность использования изолированных молекул ДНК для получения продуцентов этого белка, а также для создания рекомбинантных вирусов, способннх переносить ген α1АТ в клетки костного мозга человека, что может служить подходом к генотерапии заболеваний, связанных с мутациями в данном гене. Клоновано ген α₁-антитрипсину (α₁АТ) людини. При використанні як зонда його першого кодуючого екзона ізольовано молекулу кДНК, що містить майже повну кодуючу послідовність. Визначено нуклеотидну послідовність регуляторної області гена α₁АТ, відповідальної за його експресію в печінці. Обговорюється можливість використання ізольованих молекул ДНК для отримання продуцентів цього білка, а також для створення рекомбінантних вірусів, здатних переносити ген α1АТ у клітини кісткового мозку людини, що може стати новим підходом до генотерапії захворювань, пов’язаних з мутаціями у даному гені. The human arantitrypsin gene has been cloned. A cDNA molecule, containing almost the whole coding sequence is isolated. Nucleotide sequence is determined for the regulatory region of α₁AT gene, responsible for its expression in the liver. The possibility to use cloned genes for the gene therapy of some diseases is discussed. 1989 Article Клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения / Н.С. Незнанов, И.В. Макарова, И.А. Крамерова, К.Г. Газарян // Биополимеры и клетка. — 1989. — Т. 5, № 2. — С. 43-47. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0000A4 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/154411 612.349.7.018 ru Биополимеры и клетка Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Дискуссии Дискуссии
spellingShingle	Дискуссии Дискуссии Незнанов, Н.С. Макарова, И.В. Крамерова, И.А. Газарян, К.Г. Клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения Биополимеры и клетка
description	Клонирован ген α₁- антитрипсина (α 1АТ) человека. При использовании в качестве зонда его первого кодирующего экзона изолирована молекула кДНК, содержащая почти полную кодирующую последовательность. Определена нуклеотидная последовательность регуляторной области гена α₁ АТ, ответственной за его экспрессию в печени. Обсуждается возможность использования изолированных молекул ДНК для получения продуцентов этого белка, а также для создания рекомбинантных вирусов, способннх переносить ген α1АТ в клетки костного мозга человека, что может служить подходом к генотерапии заболеваний, связанных с мутациями в данном гене.
format	Article
author	Незнанов, Н.С. Макарова, И.В. Крамерова, И.А. Газарян, К.Г.
author_facet	Незнанов, Н.С. Макарова, И.В. Крамерова, И.А. Газарян, К.Г.
author_sort	Незнанов, Н.С.
title	Клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения
title_short	Клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения
title_full	Клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения
title_fullStr	Клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения
title_full_unstemmed	Клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения
title_sort	клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения
publisher	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate	1989
topic_facet	Дискуссии
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/154411
citation_txt	Клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения / Н.С. Незнанов, И.В. Макарова, И.А. Крамерова, К.Г. Газарян // Биополимеры и клетка. — 1989. — Т. 5, № 2. — С. 43-47. — Бібліогр.: 11 назв. — рос.
series	Биополимеры и клетка
work_keys_str_mv	AT neznanovns klonirovaniegenaa1antitripsinačelovekaivozmožnyeaspektyegoprimeneniâ AT makarovaiv klonirovaniegenaa1antitripsinačelovekaivozmožnyeaspektyegoprimeneniâ AT kramerovaia klonirovaniegenaa1antitripsinačelovekaivozmožnyeaspektyegoprimeneniâ AT gazarânkg klonirovaniegenaa1antitripsinačelovekaivozmožnyeaspektyegoprimeneniâ
first_indexed	2025-07-14T06:34:22Z
last_indexed	2025-07-14T06:34:22Z
_version_	1837603082833231872
fulltext	6 Subbanaidu P. Unintegra icd viral sequences in rat cells t r ans formed by simian vi- rus 40 and a tempera ture sensitive A gene m u t a n t / / C e l l Biol. Int . Repts.— 1983.— 7, N 9 . — P . 735—743. . 7 Sharon E., Wang J. Transcript ion of the human β-globin gene is s t imulated by an SV40 enhancer to which it is physically linked but t o p o l o g i c a l ^ u n c o u p l e d / / C e l l . — 1986 . -45 , N 4 . — P . 575—580. 8 Robbins P. DRio D. CBotchan M. R. Transact ivat ion of the simian vi rus 40 en- h a n c e r / / M o L and Cell. Biol.— 1986.—6, N 4 . — P . 1283—1295. Q Ariivation of gene expression is adversely affected at high multiplicities of linked simian virus 40 enhancer / R. Kumar, T. A. Firak, C. T. Schroll, K. N. Sub raman ian . / / . Proc. Nat. Acad. Sci. USA.— 1986.—83, N 10.—P. 3199—3203. 10 Lusky AL, Botchan M. Inhibition of SV40 replication of simian cells by specific pBR322 DNA s e q u e n c e s / / N a t u r e . — 1981.—293, N 3 . — P . 79—81. 11 Transfer of genes into hematopoietic cells us ing recombinant DNA viruses / S. Karl- cson, R. K. Humphries, J. Gluzman, A. W/. Wienhuis / / Proc. Nat. Acad. Sci. USA.— 1985 . -82 , N 1 .—P. 158—162. 12. Efficient introduction of plasmid DNA into human hematopoietic cells by encapsiaa- tion in simian virus 40 pseudovirions / A. Oppenheim, E. Peleg, E. Fibach, E. Rachmi- lewitz / / Ibid.— 1986.—83, N 18.—P. 6925—6929. 13. Введение бактериального гена дигидрофолатредуктазы в колониеобразующие клет- ки костного мозга мыши / А. В. Титомиров, А. Е. Переверзев, Л. И. Степаньян и д р . / / Ц и т о л о г и я . — 1985.—27, № 10.—С. 1183—1189. 14. Трансформация клеток костного мозга грызунов рекомбинантной плазмидой pBRSV/Т. Б. Казакова, В. А. Шатов, И. А. Вербина и д р . / / Т а м же.— 1986.—28, AfO 12.—С. 1345—1350. 15. Bing L., David Vvr7. A., Orkin S. Retrovirus-mediated gene t rans fe r of human adenosin- deaminase: expression of funct ional enzyme in murine hematopoietic stem cells in vivo / / Мої. and Cell. Biol.— 1987.—7, N 10.—P. 3459—3465. 16. Getie t r ans fe r and expression in nonhuman pr imates us ing retroviral vectors / W. F. Anderson, P. Kantoff , M. Egli t is et al. / / Cold Spr ing Harbor Symp. Quant . Biol.— 1986 . -41 , pt 2 . — P . 1073—1081. 17. Getning ЛІ. Y., Satnbrook J. Cell-surface expression of inf luenza haem-agglu t in in from a cloned DNA copy of the RNA g e n e / / N a t u r e . — 1981.—293, N 5834.—P. 620— 625. 18. Active inf luenza virus neuraminidase is expressed in monkey cells f rom cDNA clo- ned in simian virus 40 vectors / D. Alan, R. Bos, J. Timothy, D. Nayak / / Proc. Nat . Acad. Sci. USA.— 1983.—80, N 13.—P. 3976—3980. 19. Sequences involved in the regulated expression of the human mterferon-βι gene in recombinant SV40 DNA vectors repl icat ing in monkey cells / J . Marteaux, C. Kahana , J. Могу et al. / / EMBO J.— 1983.—2, N 3,— P. 325—332. 20. Expression of two human growth hormone genes in monkey cells infected by simian virus 40 recombinants / G. N. Pavlakis , N. Hizuka, P. Gorden et a l . / / P r o c . Nat . Acad. Sci. USA.— 1981.—78, N 12,—P. 7398—7402. 21. Crowley C. W., Liu C.-C, Levinson A. D. P lasmid directed synthesis of hepat i t is B surface ant igen in monkey cells / / М о ї . and Cell. Biol.— 1983.—3, N 1 — P . 44—55. 22. Laub O., Rutter W. / . Expression of the h u m a n insulin gene and cDNA in a hetero- logous mammal ian s y s t e m / / J . Biol. Chem.— 1983,—258, N 10,—P. 6043—6050. 23. Zettlmeissl G., Ragg MKarges H. E. Expression of biologically active human a n : t i thrombin III in Chinese hamste r ovary cells / / Biotechnology.— 1987.—5, N 7 . - P. 13—22. И η-τ молекуляр. биологии и генетики АН УССР, Киев Получено 16.09.88 У Д К 612.349.7.0!Я КЛОНИРОВАНИЕ ГЕНА α1-АНТИТРИПСИНА ЧЕЛОВЕКА И ВОЗМОЖНЫЕ АСПЕКТЫ ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ Н. С. Незнанов, И. В. Макарова, И. А. Крамерова, К. Г. Газарян Введение, αι-антитрипсин (αιΑΤ) — один из основных белков сыворотки крови. Этот белок входит в состав семейства белков — ингибиторов про- теаз — и подавляет активность эластазы. Анализ сывороток крови раз- личных Л Ю Д е Й ПОЗВОЛИЛ ВЫЯВИТЬ З н а ч и т е л ь н у ю ГетерОГеННОСТЬ CXiAT [1]. Наиболее распространенные его формы получили обозначения M (дикий тип), SиZ [2]. Люди, гомозиготные по S-форме, содержат в плазме крови около 60 % [2], а по Z-форме — л и ш ь 10—15 % от уров- ня этого белка у гомозиготных по М-форме [3]. В настоящее время из- Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА.— 1 9 8 9 . - Т . 5, № 2 43 вестно, что S-форма αιΑΤ содержит в 264-м положении Val вместо Glu аналогично М-форме, тогда как Z-форма содержит в 342-м положении Lys вместо Glu [2]. Указанные замены вызваны точечными мутациями в соответствующих участках гена αιΑΤ. Наибольшую опасность для здоровья представляет собой мутация, приводящая к образованию Z-формы белка. Эта мутация достаточно распространена. Так, среди европейского населения приблизительно 5 % содержат Z-ген, а 0 , 2 % — г о м о з и г о т н ы по этому гену [3]. У людей, гомозиготных по данной мутации, повышена опасность двух видов за- болеваний: цирроза печени, развивающегося преимущественно у детей [3], и эмфиземы легких, встречающейся чаще у взрослых [3]. Наиболее надежным способом профилактики этих заболеваний яв- ляется пренатальпый анализ гена αιΑΤ. Д л я выявления мутации, при- водящей к образованию Z-формы белка, можно провести гибридиза- циоипый анализ, причем в качестве зонда достаточно использовать олигонуклеотид, соответствующий исследуемой области гена [3]. Одна- ко возможны подходы к лечению указанных заболеваний, основанные на методах генной инженерии и терапии. В настоящей работе описано клонирование гена αιΑΤ человека, к Д Н К и обсуждаются возможности их использования в таких подходах. Материалы и методы. В работе использованы рестрикцнонные эпдонуклеазы и ДНК-лигаза фага Т4 производства НПО «Фермент», ВНИИ прикл. энзимологии (Вильнюс). Геномная библиотека человека на фаге Харон 4А любезно предоставлена Т. Ma- ниатисом (США). Библиотека молекул кДНК, синтезированных на поли(А)+мРНК из эмбриональной печени человека, получена от фирмы «Clontcch Laboratories» (США). Фрагмент кДНК αιΑΤ человека, использованный для скрининга геномной библиотеки, любезно предоставлен Н. Хасти (Англия). Олигонуклеотид, соответствующий Z-форме αϊ AT, предоставлен А. А. Ковальской (Ин-т генетики человека АН ПНР, Познань). Скрининг библиотеки проводили по методике, описанной Bv [4]; определение нуклеотидной последовательности Д Н К — по методу Сенгера [5]. Результаты и обсуждение. Д л я клонирования гена αιΑΤ человека использовали геномную библиотеку на фаге Xapon 4А, полученную не- полным переваром геномной Д Н К человека AluI и HaeIII-рестриктаза- ми [6]. Д л я скрининга использовали З'-конец к Д Н К cciAT человека. Скрининг 8 -Ю 5 клопов позволил выявить из них около 10, содержащих ген αιΑΤ. Рестрикциопный анализ Д Н К этих клонов показал, что все они идентичны друг другу и содержат полную копию гена αιΑΤ с при- легающими к нему последовательностями Д Н К . На рис. 1 представ- лена рестрикционпая карта Д Н К одного из изолированных клонов и экзоп-иитроппая структура гена αιΑΤ человека, как она приведена в работе [7]. Так как для получения дрожжевого продуцента ctiAT, а т а к ж е для решения задач, связанных с гемотерапией, более удобно использовать к Д Н К копию м Р Н К для этого белка, а не его большой и сложно устро- енный геи, нами была предпринята попытка клонирования полпокопий- ной молекулы к Д Н К αιΑΤ из библиотеки молекул к Д Н К эмбриональ- ной печени человека, сконструированной на векторе KgtII. Д л я скри- нинга этой библиотеки использовали BamHI/ХЬа-фрагыеит геномной Д Н К , содержащий большую часть первого кодирующего экзопа гена αιΑΤ. Н а и б о л ь ш а я из изолированных нами молекул к Д Н К αιΑΤ имела размер 1,2 т. п. н. Известно, что размер полной молекулы к Д Н К ос ι AT из печени человека 1390 п. н. [8]. Д л я детального картирования 5'-кои- да клонированной молекулы к Д Н К (клоп 5) мы переклонировали ее в векторе ml3mp8 и определили нуклеотидную последовательность ее б^конца по методу Сенгера [5]. Сравнение этой нуклеотидной после- довательности (рис. 2, а) с ранее опубликованной [8] показало, что изо- лированная нами молекула к Д Н К не содержит 345 п. н. с 5'-конца ко- дирующей области полнокопийной молекулы к Д Н К . Однако, так как 44 Б И О П О Л И М Е Р Ы И К Л E T K A . - 1 9 8 9 . - 'Г. 5, 2 вся недостающая кодирующая часть молекулы к Д Н К соответствует од- ному экзону гена, то она может быть легко присоединена к имеющейся у нас молекуле к Д Н К по уникальному сайту для рестриктазы CfrlO-L Эта работа в настоящее время проводится. Обнаружено также, что к Д Н К из клона 5 вместо кодона СТА в положении 103 содержит кодон СТС, однако эта замена не существенна, поскольку оба триплета коди- руют Leu. Чтобы убедиться в том, что клонированные нами к Д Н К и ген OciAT не кодируют Z-формы этого белка, была проведена гибридизация этих Рис. 1. Рестрикционная карта и структура гена αϊAT человека (а) и схема клониро- ванной молекулы кДНК (б): а — заштрихованы кодирующие области; темные прямо- угольники— экзоны, экспрессирующиеся только в макрофагах; на 5'-конце первого ко- дирующего экзона отмечен инициирующий кодон AUG; б — стрелками внизу обозна- чены участки кДНК, для которых определена нуклеотидная последовательность; рас- стояние от инициирующего кодона AUG до 5'-конца молекулы — 345 п. н.; область кДНК, гомологичная использованному при скрининге библиотеки генов зонду, пока- зана точками Fig. 1. The restriction map and structure of the human antitrypsin gene (a) and scheme of the cloned cDNA molecule (б): a — the boxes indicate the exons: coding exons — hatched boxes, exons expressed in liver — solid boxes. Initiating AUG codon is marked on 5' end of the first coding exon; б — the distance from its 5' end to initiating AUG codon is 345 b. p. Arrows show cDNA sites whose nucleotide sequence is determined. cDNA region, gomologous to probe in screening of gene library is marked with points молекул Д Н К с 19-члеппым олигонуклеотидным зондом, соответству- ющим Z-форме αιΑΤ. Анализ результатов гибридизации показал, что изолированные к Д Н К и ген atAT не кодируют его Z-формы. Однако мы не можем точно указать, какие из других возможных форм этого белка они кодируют. Не исключено, что ген кодирует S-форму, так как из использованной нами библиотеки генов ранее изолирован ген αιΑΤ, ко- дирующий именно эту форму белка [2]. αιΑΤ относится к категории генов, экспрессия которых носит сильно выраженный тканеспецифический характер. Этот ген экспрессируется преимущественно в печени как в эмбриональном, так и взрослом состо- яниях. Ранее было показано [8], что цис-действующие факторы, опре- деляющие тканеспецифический характер экспрессии гена, расположены на его 5'-конце в непосредственной близости от точки инициации транс- крипции. Так как в дальнейшем планируется изучение механизма регу- ляции экспрессии этого гена, мы определили нуклеотидную последова- тельность участка, примыкающего к его 5'-концу. Известно, что BgllI/BamHI-фрагмеит (300 п. н.), расположенный перед первым транс- крибирующимся в печени экзоном, содержит регуляторные последова- тельности, ответственные за экспрессию гена αιΑΤ в печени [8]. На рис. 2 ,6 , приведена фотография участка автографа геля, полученного при определении указанной нуклеотидной последовательности, которая полностью идентична описанной ранее этой части гена [2]. Кроме печени, ген αιΑΤ т акже экспрессируется в макрофагах, где уровень его экспрессии на порядок ниже, чем в гепатоцитах. Тем не ме- нее ряд авторов считает, что важную роль в поддержании уровня CtiAT в легких играет его синтез в макрофагах [9]. Недавно было показано, 45 Б И О П О Л И М Е Р Ы И К Л Е Т К А — 1989.— Т. 5, № 2 что экспрессия этого гена в макрофагах и печени происходит под конт- ролем различных промоторов [7]. Выделенный нами клоп содержит обе промоторные последовательности. Экспрессия гена GciAT в макро- фагах открывает реальный путь для применения методов генотерапии при обнаружении мутаций в данном гене, в частности в случае Z -формы αιΑΤ. Это определяется тем, что костный мозг, где находятся кле іки — предшественники моноцитов, доступен для воздействия рекомбинаптных Рис. 2. Фотография авторадиограммы структурного геля: анализ нуклеотидных после- довательностей б'-конца кДНК αιΑΤ из клона 5 {а) и BcunHI/BglІІ-фрагмептл Д Н К (300 п. н.), прилегающего к 5'-концу той части гена αϊAT человека, которая экспрес- сируется в печени (б) Fig. 2. The autoradiogram of sequencing gel: analysis of DNA sequence of the 5' end of αϊ antitrypsin cDNA from clone N5 (a) and DNA sequence of the 300 b. p. BamHI/BglII DNA fragment, f lanking the 5' end of the region of αϊ antitrypsin gene, expressing in the liver (6) ретровирусов, которые могут служить векторами для переноса гена, кодирующего функционально активную форму αιΑΤ. Мы предполагаем сконструировать такой рекомбинантпый ретровирус, который бы содер- ж а л к Д Н К α ιΑΤ под регуляцией макрофагоспецифичного промотора этого ж е гена. На наш взгляд, в настоящее время это одна из немногих реальных возможностей использования метода генотерапии для лечения широко распространенного заболевания, связанного с конкретной мута- цией в гене. Так как специфичность ингибиторов протеаз легко менять, внося in vitro замены в область гена, кодирующую активный центр молекулы [10], то указанный подход может быть распространен и на случаи му- таций в генах других ингибиторов протеаз, таких как антитромбин, ан- тихимотрипсин и т. д. Кроме того, как у ж е указывалось , можно полу- чать более стабильные формы ингибиторов протеаз [ I I ] , что в случаях более низкого уровня экспрессии экзогенных генов, чем эндогенных, может оказаться существенным. 46 Б И О П О Л И М Е Р Ы И К Л Е Т К А — 1989.— Т. 5, № 2 Авторы чрезвычайно благодарны А. А. Ковальской за предостав- ленный ею олигопуклеотидпый зонд. CLONING OF HUMAN a 1 ANTITRYPSIN GENE AND POSSIBLE ASPECTS OF ITS UTILIZATION N. S. Neznanov, I. V. Makarova, I. A. Kramerova, K. G. Gazaryan Institute of Molecular Genetics, Academy of Sciences of the USSR, Moscow Institute of Medical Biotechnology, Ministry of Public Health, Moscow S u m m a r y The human a1-antitrypsin gene has been cloned. A cDNA molecule, containing almost the whole coding sequence is isolated. Nucleotide sequence is determined for the regu- latory region of a1AT gene, responsible for its expression in the liver. The possibility to use cloned genes for the gene therapy of some diseases is discussed. 1. Fagerhol Μ. KCox D. W. The Pi polymorphism: genetic, biochemical and clinical aspects of human αϊ an t i t ryps in / /Adv . Hum. Genet.—1981.—11, N 1 — P . 1—62. 2. Complete sequence of the cDNA for human αϊ antitrypsin and the gene for the S v a r i a n t / G . L. Long. T. Chandra, S. L. C. Woo et al. / / Biochemistry.— 1984,—23, N 21.—P. 4828—4837. 3. αϊ antitrypsin deficiency detection by direct analysis of the mutation in the g e n e / V. J. Kidd, R. B. Wallace, K. Itakura, S. L. C. W o o / / N a t u r e . — 1983,—304, N 5923.— P. 230—234. 4. Woo S. L. C. A sensitive and rapid method for recombinant phage sc reen ing / /Meth . Enzymol.— 1979.—68.— P. 389—405. 5. Sanger F.f Nicklen S.f Coulson A. R. DNA sequencing with chain-terminating inhi- bitors / / Proc. Nat. Acad. Sci. USA.— 1977.—74, N 12.—P. 5463—5467. 6. The isolation and characterization of a linked δ- and β-globin gene from a cloned library of human DNA / R. W, Lawn, E. F. Fritsch, R. C. Parker et al. / / Cell.— 1978.—15, N 4.—P. 1157—1174. 7. Perlino E., Cortese R.f Ciliberto G. The human αϊ antitrypsin gene is transcribed from the two different promoters in macrophages and hepatocvtes / / The EMBO J.— 1987.—6, N 9.—P. 2767—2771. 8. Ciliberto G., Dente L., Cortese R. Cell-specific expression of a transfected human OSi antitrypsin gene / /Ce l l .— 1985.—41, N 2.—P. 531—540. 9. Expression of the approteinase inhibitor gene in human monocytes and macropha- ges / D. H. Perlmutter, F. Cole, P. Kilbridge et al. / / Proc. Nat. Acad. Sci. USA.— 1985.—82, N 3.—P. 795—799. 10. Carrell R. Therapy by instant e v o l u t i o n / / N a t u r e — 1984.—312, N 5989 — P . 14. 11. Synthesis in yeast of a functional oxidation-resistant mutant of human a\ antitryp- s i n / S . Rosenberg, P. J. Barr, R. C. Najarian et a l . / / I b i d . — N 5989.—P. 77—80. Ин-т молекуляр. генетики АН СССР, Москва Получено 10.12.87 Ин-т биомед. технологии МЗ СССР, Москва У Д К 612.349.7.018 ВОЗМОЖНОСТЬ ЭКСПРЕССИИ КЛОНИРОВАННОГО ГЕНА ЭРИТРОПОЭТИНА ЧЕЛОВЕКА В КЛЕТКАХ ЛИНИИ CHO И. А. Крамерова, М. Г. Зеленин, Μ. М. Воронцова, С. Л. Колобков, Т. Е. Монакова Введение. В настоящее время идентифицировано множество белковых факторов, принимающих участие в контроле пролиферации и диффе- ренцировки кроветворных клеток — интерлейкины (IL-1, 2, 3 и др. ) , факторы, стимулирующие колониеобразование гранулоцитов (G-CSF) , гранулоцитов и макрофагов (GM-CSF) , эритроидных клеток (ЕРА) и др. Факторы, стимулирующие образование колоний (IL-3, G-CSF, GM-CSF, EPA и др. ) , как правило, не специфичны по отношению к ранним предшественникам различных ростков кроветворения. В част- Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА.— 1 9 8 9 . - Т . 5, № 2 4 7

Клонирование гена α₁-антитрипсина человека и возможные аспекты его применения

Institution

Ähnliche Einträge