Дополнительное исследование триптических и химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой совки Agrotis segetum
Методом высоковольтного электрофореза и хроматографии на бумаге из фракций триптического и химотриптического гидролизатов гранулина полученных ранее гель-фильтрованием и ионообменной хроматографией, выделены дополнительно 81 химотриптический и 20 триптических пептидов. Установлено их частичное или п...
Збережено в:
Дата: | 1989 |
---|---|
Автори: | , , , , |
Формат: | Стаття |
Мова: | Russian |
Опубліковано: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1989
|
Назва видання: | Биополимеры и клетка |
Теми: | |
Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/155442 |
Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
Цитувати: | Дополнительное исследование триптических и химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой совки Agrotis segetum / Т.Л. Левитина, Н.В. Роднин, Η.М. Гусак, С.А. Атепалихина, Э.А. Козлов // Биополимеры и клетка. — 1989. — Т. 5, № 6. — С. 52-60. — Бібліогр.: 5 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraineid |
irk-123456789-155442 |
---|---|
record_format |
dspace |
spelling |
irk-123456789-1554422019-06-17T01:29:58Z Дополнительное исследование триптических и химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой совки Agrotis segetum Левитина, Т.Л. Роднин, Н.В. Гусак, Н.М. Атепалихина, С.А. Козлов, Э.А. Структура и функции биополимеров Методом высоковольтного электрофореза и хроматографии на бумаге из фракций триптического и химотриптического гидролизатов гранулина полученных ранее гель-фильтрованием и ионообменной хроматографией, выделены дополнительно 81 химотриптический и 20 триптических пептидов. Установлено их частичное или полное строение. Методом високовольтного електрофорезу і хроматографії на папері з фракцій триптичного і хімотріптіческого гідролізатів грануліна отриманих раніше гель-фільтруванням і ионообменной хроматографією, виділені додатково 81 хімотріптіческій і 20 триптичних пептидів. Встановлено їх часткове або повне будову. 20 tryptic and 81 chymotryptic peptides were isolated and their partial or complete amino acid sequence was determined. 1989 Article Дополнительное исследование триптических и химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой совки Agrotis segetum / Т.Л. Левитина, Н.В. Роднин, Η.М. Гусак, С.А. Атепалихина, Э.А. Козлов // Биополимеры и клетка. — 1989. — Т. 5, № 6. — С. 52-60. — Бібліогр.: 5 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0000F7 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/155442 577.112.5:578.841 ru Биополимеры и клетка Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
collection |
DSpace DC |
language |
Russian |
topic |
Структура и функции биополимеров Структура и функции биополимеров |
spellingShingle |
Структура и функции биополимеров Структура и функции биополимеров Левитина, Т.Л. Роднин, Н.В. Гусак, Н.М. Атепалихина, С.А. Козлов, Э.А. Дополнительное исследование триптических и химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой совки Agrotis segetum Биополимеры и клетка |
description |
Методом высоковольтного электрофореза и хроматографии на бумаге из фракций триптического и химотриптического гидролизатов гранулина полученных ранее гель-фильтрованием и ионообменной хроматографией, выделены дополнительно 81 химотриптический и 20 триптических пептидов. Установлено их частичное или полное строение. |
format |
Article |
author |
Левитина, Т.Л. Роднин, Н.В. Гусак, Н.М. Атепалихина, С.А. Козлов, Э.А. |
author_facet |
Левитина, Т.Л. Роднин, Н.В. Гусак, Н.М. Атепалихина, С.А. Козлов, Э.А. |
author_sort |
Левитина, Т.Л. |
title |
Дополнительное исследование триптических и химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой совки Agrotis segetum |
title_short |
Дополнительное исследование триптических и химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой совки Agrotis segetum |
title_full |
Дополнительное исследование триптических и химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой совки Agrotis segetum |
title_fullStr |
Дополнительное исследование триптических и химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой совки Agrotis segetum |
title_full_unstemmed |
Дополнительное исследование триптических и химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой совки Agrotis segetum |
title_sort |
дополнительное исследование триптических и химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой совки agrotis segetum |
publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
publishDate |
1989 |
topic_facet |
Структура и функции биополимеров |
url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/155442 |
citation_txt |
Дополнительное исследование триптических и химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой совки Agrotis segetum / Т.Л. Левитина, Н.В. Роднин, Η.М. Гусак,
С.А. Атепалихина, Э.А. Козлов // Биополимеры и клетка. — 1989. — Т. 5, № 6. — С. 52-60. — Бібліогр.: 5 назв. — рос. |
series |
Биополимеры и клетка |
work_keys_str_mv |
AT levitinatl dopolnitelʹnoeissledovanietriptičeskihihimotriptičeskihpeptidovgranulinavirusagranulezaozimojsovkiagrotissegetum AT rodninnv dopolnitelʹnoeissledovanietriptičeskihihimotriptičeskihpeptidovgranulinavirusagranulezaozimojsovkiagrotissegetum AT gusaknm dopolnitelʹnoeissledovanietriptičeskihihimotriptičeskihpeptidovgranulinavirusagranulezaozimojsovkiagrotissegetum AT atepalihinasa dopolnitelʹnoeissledovanietriptičeskihihimotriptičeskihpeptidovgranulinavirusagranulezaozimojsovkiagrotissegetum AT kozlovéa dopolnitelʹnoeissledovanietriptičeskihihimotriptičeskihpeptidovgranulinavirusagranulezaozimojsovkiagrotissegetum |
first_indexed |
2025-07-14T07:40:13Z |
last_indexed |
2025-07-14T07:40:13Z |
_version_ |
1837607225381617664 |
fulltext |
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Лавлсс А. Генетические эффекты алкилирующих соединений.— М. : Наука, 1970.—
255 с.
2. Росс У. Биологические алкилирующие вещества — М . : Медицина, 1964.—260 с.
3. Гиллср С. А., Лидак М. Ю., Лукевиц Э. # . Химия противоопухолевых веществ / /
Химиотерапия злокачеств. опухолей.— М. : Медицина, 1977.— С. 10—60.
4. Противоопухолевый препарат БЕНЗОТЭФ / Под ред. П. В. Родионова.— Киев :
Высш. школа, 1973.—174 с.
5. Масс-спектроскопическое исследование взаимодействия тиофосфамида с основания-
ми нуклеиновых кислот / Л. Ф. Суходуб, В. С. Шелковский, М. В. Косевич и др. / /
Докл. АН СССР,— 19-8-5.—283, № 3.—С. 714—716.
6. Строение продуктов модификации нуклеотидов и Д Н К этиленимином и тиотэфом /
А. М. Серебряный, Г. В. Андриевский, А. Р. Беккер и др. / / Биоорг. химия.—
1987.—13, № 6.—С. 757—764.
7. Взаимодействие Д Н К с противоопухолевым препаратом тиофосфамидом / Т. JL Пя-
тигорская, О. Ю. Жилкова, Л. М. Муравьева, Л. Ф. Суходуб / / Там же.— 1986.—
20, А'? 2.— С. 2423—2429.
8. Степень алкилирования и физико-химические свойства модифицированных тиофос-
фамидом Д Н К / Ю. В. Пацковский, В. Т. Соловьян, А. И. Потопальский, 3. Ю. Тка-
чук / / Молекуляр. биология.— 1984.— Вып. 37.— С. 44—50.
9. Алкилирование ДНК: физико-химические свойства ДНК, модифицированных тио-
фосфамидом и моноэтиленимином диэтилового эфира фосфорной кислоты /
Ю. В. Пацковский, Т. П. Волощук, А. И. Потопальский, 3. Ю. Т к а ч у к / / М а к р о -
молекулы клеток и вирусов.— Киев : Наук, думка, 1986.— С. 40—47.
10. Структурно-функциональные особенности модифицированных нуклеиновых кислот /
А. Д. Швед, А. П. Соломко, А. И. Потопальский и д р . / / М о л е к у л я р . биология.—
1980,— Вып. 26.— С. 64—78.
11. Лидак М. Ю., Гиллер С. А., Медне Л. Я. К синтезу ТиоТЭФА/ /ТиоТЭФА.—Ри-
га: Изд-во АН ЛатвССР, 1961.—С. 5—8.
12. Гречкин II. П. Фосфорорганические производные этиленимина. Сообщ. 1. Взаи-
модействие этиленимина с хлораигидридами диалкилфосфорных кислот / / Изв.
АН СССР.— 1956.— № 5.—С. 538—543.
13. Пацковский Ю. В., Волощук Т. П., Потопальский А. И. Некоторые особенности
реакции полинуклеотидов с тиофосфамидом//Биополимеры и клетка.— 1989.—5,
Xo 5,— С. 64—70.
14. Singer В. The chemical effect of nucleic acid alkylation and their relation to mu-
tagenesis and carc inogenesis / /Prog-r . Niicl. Acid Res. and Мої. Biol.— 1975.—15.—
P. 219—280.
15. Изучение стабильности тиофосфамида в водных и водно-солевых растворах /
Т. Л. Пятигорская, О. Ю. Жилкова, Η. М. Архангелова и др . / /Хим. -фарм . журн.—
1984 — № 2,—С. 343—349.
16. Hemtninki К., Ludluni D. V. Covalent modification of DNA by neoplastic agents / /
J. N,at. Cancer Inst.— 1984,—73, N 5.— P. /1021 —1026.
17. Органическая химия нуклеиновых кислот / Η. К. Кочетков, Э. И. Будовский,
Е. Д. Свердлов и др.—М. : Химия, 1970,—720 с.
18. Relative reactivities for monofunctional nitrogen mustard alkylation of nucleic acid
c o m p o n e n t s / С . C. Price, G. M. Gaucher, P. Koneru et al. / / Biochim. et biophys.
acta.—1968.—166, N 2 ,—P. 327—3159.
Ин-т молекуляр. биологии и генетики Получено 02.02.87
АН УССР, Киев
УДК 577.112.5:578.841
Т. Л. Левитина, Н. В. Роднин, Η. М. Гусак,
С. А. Атепалихина, Э. А. Козлов
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ТРИПТИЧЕСКИХ
И ХИМОТРИПТИЧЕСКИХ ПЕПТИДОВ ГРАНУЛИНА
ВИРУСА ГРАНУЛЕЗА ОЗИМОЙ СОВКИ, AGROT IS SEGETUM
Методом высоковольтного электрофореза и хроматографии на бумаге из фракций
триптического и химотриптического гидролизатов гранулина} полученных ранее гель-
фильтрованием и ионообменной хроматографией, выделены дополнительно 81 химо-
триптический и 20 триптических пептидов. Установлено их частичное или полное
строение.
52 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1989, т. 5, Ns 6 57
Введение. Ранее были опубликованы работы, посвященные изучению
строения некоторых триптических [1] и химотриптических [2] пепти-
дов гранулина вируса гранулеза (ВГ) A. segetum. В частности, было
изучено строение 18 триптических и 30 химотриптических уникальных
пептидов, насчитывающих в сумме 113 и 198 остатков аминокислот
соответственно. Гранулин ВГ А. segetum содержит около 250 остатков
[3]. По совокупности этих данных можно было реконструировать толь-
ко несколько крупных фрагментов гранулина. При сравнении иссле-
дованных нами триптических и химотриптических пептидов с извест-
ной аминокислотой последовательностю гранулина ВГ Trichoplusia пі,
выделенной по нуклеотидной последовательности гена [4], было воз-
можно реконструировать несколько вариантов полипептидной цепи гра-
нулина ВГ A. segetum с различной степенью гомологии с гранулином
ВГ Т. пі. Один из таких вариантов с максимальной степенью гомоло-
гии был предложен нами ранее [5]. Для однозначной реконструкции
полипептидной цепи гранулина ВГ A. segetum необходимо было полу-
чить дополнительные данные по строению фрагментов белка. С этой
целью нами продолжено исследование триптических и химотриптиче-
ских пептидов, а также триптических фрагментов малеил-производного
гранулина ВГ A. segetum. В настоящем сообщении приведены резуль-
таты дополнительного изучения триптических и химотриптических
пептидов.
Материалы и методы. Методы разделения смесей пептидов гель-фильтрованием,
ионообменной хроматографией, высоковольтным электрофорезом и хроматографией на
бумаге в различных электролитах и системах растворителей, а также условные обо-
значения этапов разделения в формулах очистки индивидуальных пептидов описаны в
предыдущих работах [1, 2]. В некоторых случаях, кроме использованной ранее систе-
мы для бумажной хроматографии БХ1 [її], мы применили систему БХ2 — пиридин : бу-
танол : уксусная кислота : вода ( 1 0 : 1 5 : 3 : 1 2 ) . Методы установления аминокислотной
последовательности пептидов приведены в работах [(1, 2].
Результаты и обсуждение. Пептиды получали из некоторых фрак-
ций на разных этапах разделения, проведенного ранее [1, 2], и допол-
нительно очищали их электрофорезом и хроматографией на бумаге.
Проверка пептидов с ранее установленным составом или строением
[1, 2] показала, что пептиды Tl, Т2, ТЮ, Т12, Т15, Ch4, Chl3, Ch20,
Ch23 и Ch25 оказались смесями двух или частично загрязненными пеп-
тидами. Их дополнительно очищали бумажной хроматографией. Таким
путем получены 81 химотриптический и 20 триптических пептидов, ами-
нокислотные составы которых приведены в табл. 1 и 2 соответственно,
а формулы очистки и строение — в табл. 3 и 4. Частичная аминокис-
лотная последовательность пептидов Tl, Т10, Т17, Ch3 — Ch9, Chl l ,
Ch21, Ch22, Ch25, СИЗО, Ch31, Ch34, Ch38, Ch39 выписана на основании
предположения о том, что эти и одноименные пептиды с индексом про-
исходят из одного и того же участка белка и их последовательности
перекрываются.
Исследуя химотриптические пептиды, образовавшиеся из одного
участка (Chi, а также Ch8), мы обнаружили наличие в гранулине мик-
рогетерогенности. Аминокислотный состав пептида Chl опубликован
ранее [2]. Сумма аминокислотных составов пептидов Chl1—Chl3 дает
состав Chl с той лишь разницей, что последний содержит два остатка
аланина и один серина, в то время как сумма содержит два серина
и один аланин. Мы полагаем, что Chl состоит из смеси двух аналогич-
ных пептидов с заменой Ser на Ala. Более четко подобная ситуация
доказана на участке Ch8. Пептиды ChSi и Ch84 при определении N-
конца обнаруживают остатки Ile и Met. Пептид Ch83, аналогичный
пептиду Ch84, содержит на N-конце только lie. Из аминокислотного
состава очевидно, что Ch83 содержит один остаток lie, a ChS'1 — по 0,5
остатка Met и lie. Мы считаем, что Ch84 включает смесь двух анало-
гичных пептидов с заменой Ile на Met. Исходя из этого, появление
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1989, т. 5, Ns 6 57
Т а б л и ц а 1
Аминокислотный состав химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза
Amino acid composition of chymotryptic peptides of the A. segetum granulosis virus
Амино-
кислота Chl 2 Chl 3 Chl4 Ch3* Ch32 Ch33 Ch3* Ch36
Lys
His
Arg
Asp
1 , 4 ( 2 ) 0 , 7 ( 1 ) 0 , 9 ( 1 ) 0 , 9 ( 1 )
Lys
His
Arg
Asp 1 , 0 ( 1 ) 0 , 9 (J ϊ 1 , 0 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 )
Thr
Ser 1 , 0 ( 1 )
Glu 1 , 0 ( 1 ) 1 , 1 ( 1 ) 1 , 1 ( 1 ) 1 , 1 ( 1 )
Pro
1 , 0 ( 1 )
1 , 0 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 )
Gly 1 , 0 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 )
AIa
1/2 Cvs
VaI 1 , 5 ( 2 ) L O ( I ) 1 , 0 ( 1 )
Met 0 , 7 ( 1 ) 0 , 6 ( 1 )
lie 1 , 6 ( 2 )
Leu 0 , 9 ( 1 ) 1 , 1 ( 1 ) 1 , 1 ( 1 ) 1 , 1 ( 1 )
Tyr 0 , 9 ( 1 ) 0 , 9 ( 1 ) 0 , 8 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 )
Phe 0 , 8 ( 1 ) 0 , 8 ( 1 ) L l ( I ) 1 , 0 ( 1 )
Trp + ( і ) + (1 ) + (1 ) + (1 )
В с е г о 7 •1 3 9 8 4 6 3
N-конец lie Val Val Asp Asp Asp Leu Trp
Амино-
кислота Ch92 Ch93 C h l l C h i l i Chl Ρ Ch l2 Chl3 Chl 5
Lys 1 , 0 ( 1 ) 0 , 8 ( 1 ) 0 , 9 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 ) 1 , 9 ( 2 )
His 0 , 9 ( 1 ) 0 , 8 ( 1 ) 0 , 7 ( 1 )
1 , 9 ( 2 )
Arg 1 , 0 ( 1 ) 2 , 0 ( 2 ) 1 , 2 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 )
1 , 2 ( 1 )
2 , 0 ( 2 ) 1 , 0 ( 1 )
Asp 1 , 0 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 ) 1 , 2 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 )
1 , 0 ( 1 )
Thr 0 , 8 ( 1 ) 1 , 1 ( 1 ) 1 , 1 ( 1 ) 1 ,001)
Ser 0 , 8 ( 1 ) 0 , 9 ( 1 )
1 ,001)
GIu 1 , 1 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 ) Ι , Ι Π ) 1 , 0 ( 1 )
Pro
GIy
AIa 0 , 9 ( 1 )
1 , 0 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 ) l , 0 f l ) 1 , 0 ( 1 )
1 , 2 ( 1 )
1 , 0 ( 1 )
1/2 Cvs
Val 1 , 0 ( 1 ) 1 ,1 , (1 ) 1 , 0 ( 1 )
Met
lie M ( I ) 1 , 0 ( 1 ) 0 , 9 ( 1 )
Leu 1 , 0 ( 1 )
Tyr 1 , 0 ( 1 ) 0 , 7 ( 1 )
Phe 1 ,001 )
Trp
В с е г о 7 3 9 7 7 5 9 3
N-конец Arg Asp Arg Arg Val Lys Tyr Thr
Амино-
кислота Ch253 Ch254 Ch256 Ch26 Ch261 Ch262 Ch27 Ch27*
Lys
His
Arg
Asp 1 , 2 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 ) 1 , 0 ( П
Thr 1,8(2)
Ser 0,9(1)
2,2(2) GIu
0,9(1)
2,2(2) 1,9(2) 1 , 0 ( 1 ) 2 , 0 ( 2 ) 2 , 0 ( 2 )
Pro 1 , 1 ( 1 )
Gly
Ala
1/2 Cys
Val
Met 0 , 8 ( 1 ) 0 , 5 ( 1 )
lie 2 , 0 ( 2 ) 1 , 1 ( 1 ) 0 , 9 ( 1 )
Leu 2 , 0 ( 2 ) (2) 1 , 0 ( 1 ) 2 , 0 ( 2 ) 2 , 0 ( 2 )
Tyr
(2)
Phe 1 , 0 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 ) 1 , 0 ( 1 )
Trp
В с е г о 9 5 4 3 2 2 5 4
N-конец lie Asp Gln Leu Leu Asn Phe Glu
54 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1989, т. 5, № 6
A. segetum
granulin
Ch4 Ch4* Ch55 Ch6 Ch6* Ch8 Ch8* Ch83 Ch84 Ch9
1 ,9(2)
0,8(1) 1,0(1) 0,9(1)
1,0(1)
2,6(3)
1 , 0 ( 1 )
1,0(1)
1,0(1) 0,9(1) 1,0(1) 1,0(1) 1 , 1 ( 1 )
0,9(1) 0,8(1)
1 , 0 ( 1 )
0,9(1) 1,0(1) 0,9(1) 0,9(1)
0,9(1)
1,2(1) 1,6(2) 1,2(1) 1,1(1) 1,0(1) 1,2(1)
1 , 0 ( 1 ) 0,8(1) 1 . 0 ( 1 ) 1,1(1) 1,0(1)
1 , 0 ( 1 )
1,0(1) 0,5(1) 0,4(1)
0,8(1) 0,8(1)
1,0(1) 0,5(1) 0,4(1)
0,8(1) 0,8(1) 0,8(1) 0,8(1)
0,4 0,4 0,4
1,0(1) 1 , 0 . 1 ) 1,0(1) 0,5 0,5 0,8(1) 0,4 1,0(1)
1 , 1 ( 1 ) 1,2(1) 1,0(1)
0,6(1) 1,0(1)
1 , 1 ( 1 ) 1,2(1) 1,0(1)
1,0(1) 1 , 0 ( 1 ) 0,6(1)
0,8(1)
1,0(1)
1,0(1)
1,0(1) 1 , 0 ( 1 )
1,0(1) 1,0(1) 0,9(1) 0,8(1)
4 3 2 6 3 9 8 7 7 11
lie l ie Ala Gln Arg Gln lie, lie lie, Arg Arg
Met Met
СЫ81 Chl 82 Ch20 Ch21 Ch22 Ch22* Ch23 Ch25 Ch251 Ch25*
0,8(1) 0,9(1) 0,9(1)
0,8(1) 1,0(1) 1,8(2)
2 2 4 4 4 3 5 15 14 12
Ser Arg Val His Gly Gly Gly Ile lie Phe
I Ch273 Ch28 СІ1281 Ch 29 Ch30 СИЗО1 СЗО2 Ch31 Ch31* Ch32
2,0(2)
1,0(1)
0,8(1)
1,0(1)
OiI1(I)
2,1(2) 1,0(1)
1,0(1)
1,0(1)
1,1(1) 1,0(1)
2,0(2)
1,0(1)
0,9(1) 0,9(1)
1,0(1)
1,0(1)
1,1(1)
0,9(1)
1,1(1)
2,0(2)
0,9(1)
1,2(1) 1,1(1)
1,2(1)
1,0(1)
1,0(1)
1,1(1) M ( I ) 1,0(1) 1,0(1) 1 . 0 ( 1 ) 0,8(1)
1,0(1)
0,9(1) 0,9(1)
1,1(1)
1,0.(1)
2,0(2)
0,9(1) 0,8(1)
0 ,8(1)
1,4(2)
2 4 3 3 9 4 6 5 3 10
Gln Ser Ser Asp Tyr Val Gln Ser Lys Asp
ISSN 0233-7657, . БИОПОЛИМЕРЫ [ И КЛЕТКА. 1989, т. 5, № 6 5 5
Амино-
кислота Ch32i Ch33 Ch34 Ch 35 СІІ351 Ch36 СІ1391 Ch40
Lys 0,8(1) 1,0(1)
HlS 0,8(1) 0,9(1)
Arg 0,8(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,2(1)
Asp 1,1(1) M ( I ) 0,9(1) 2,0(2) 1,8(2)
Thr
Ser 1,0(1) 0,8(1)
Glu 1,1(1) 2,0(2) 1,0(1) 1,1(1)
Pro
1,1(1)
1,7(2) 1,0(1) 1,0(1)
Gly
Ala 1,5(2)
1 /2 Cys
Val 0,6(1)
Met
0,6(1)
0,6(1) 0,5(1)
lie 0,6(1) 1,2(1)
Leu 1,0(1) 1,0(1) 1,2(1) 2,2(2)
Tyr
1,0(1)
0,9(1)
Phe 1,0(1)
Trp
В с е г о 5 4 2 8 5 4 3 10
N-конец Asp Asn Arg Gln Gln lie Ser Ala
Т а б л и ц а 2
Аминокислотный состав триптических пептидов гранулина вируса гранулеза A. segetum
Amino acid composition of tryptic peptides of the A. segetum granulosis virus granulin
Амино-
кислота Tl Tl1 Tl2 T2 T5 T7 TlO TIO1 T12
Lys 0,7(1) 1,0(1) M(I) 1,0(1)
Hrs 1,0(1)
1,0(1)
Arg 2,0(2)
2,0(2)
1,0(1) 2,0(2) 0,9(1)
Asp 3,0(3) 2,2(2) 2,0(2) 1,0(1) 1,7(2)
Thr 1,8(2) 2,0(2) 1,8(2) 0,9(1)
Ser LO(I) 0,8(1) 0,8(1) 0,8(1) 0,8(1)
Glu 6,8(7) 6,2(6) 4,2(4) 1,1(1) 1,3(1) 1,2(1) 1,3(1) 1,1(1)
Pro 2,6(3) 1,1(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1)
Gly
0,9(1)
1,1(1)
Ala 1,0(1) 0,9(1) 1,1(1) 1,2(1)
1/2 Cys
Val 0,9(1)
Met 1,3(2) 0,8(1) 1,0(1)
lie 2,6(3) 3,0(3) 2,8(3) 0,9(1) 1,1(1) 1,0(1)
Leu 3,7(4) 3,8(4) 1,7(2) 1,0(1) 1,0(1)
Tyr 1,8(2)
Phe 3,0(3) 3,0(3) 2,0(2) 0,9(1)
Trp
Bc e г о 30 23 18 8 7 4 6 5 6
N-конец Phe Phe Phe Arg Lys Glu Arg lie Gly
пептида Ch82 можно объяснить расщеплением связи Met-Val в гра-
нулине.
Таким образом, вместе с ранее выделенными пептидами получены
37 триптических и 107 химотриптических пептидов, из них уникальных
триптических 24, химотриптических 42. Уникальные триптические пеп-
тиды насчитывают в сумме 160, химотриптические — 257 остатков ами-
нокислот. Только 17 химотриптических пептидов содержат остатки Lys
или Arg в середине («мостиковые» пептиды). Поскольку уникальные
триптические пептиды насчитывают 67 % всех аминокислотных остат-
56 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1989, т. 5, Ns 6 57
Продолжение табл. 1
ков полипептидной цепи гранулина, а «мостиковые» пептиды включа-
ют 70 % основных остатков белка, то только по этим данным нельзя
реконструировать полипептидную цепь, хотя уникальные пептиды пе-
рекрывают полностью полипептидную цепь гранулина. Чтобы одно-
значно локализовать триптические и химотриптические пептиды при
реконструкции гранулина ВГ A. segetum путем сравнения с известной
аминокислотной последовательностью гранулина ВГ Т. пі, мы пред-
приняли исследование крупных триптических фрагментов малеил-про-
изводного гранулина.
.58 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1989, т. 5, Ns 6 5 7
Т а б л и ц а З
Строение химот риптических пептидов грану лина вируса грану леза A. segetum
Amino acid sequence of chymotryptic peptides of the A. segetum granulosis virus
granulin
Пеп-
тид Формула очистки Строение
Chl Th, ЭФ1
Chl 1
Chl 2
C h l 3
Chl 4
Ch3 l
Ch32
Ch З3
Ch34
Ch35
Ch4
Ch4!
Οιδ 1
Ch55
Ch6
Ch6!
Ch62
Ch7
Ch7i
Ch8
Οιδ 1
Ch82
Ch83
Ch84
Ch9
Ch92
Ch93
ChlO
ChlOi
Ch l l
C h i l i
C h l l 2
C i U 3
Chl2
Ch 13
Ch 15
Ch 18
'СЫ81
Ch 182
Ch20
Ch21
Ch21i
Ch22
TH, ЭФ1
AG5, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
AG3, ЭФ1, ЭФ2
AG7, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
AG 16, ЭФ1
AG 15, ЭФ1
AG12, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
IV, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
IV, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
AGl 1, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
AG7, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
AG 15, ЭФ1, ЭФ2
AG4, ЭФ1,
AGl 1, ЭФ1
AG5, ЭФ1,
AG 17, ЭФ1
AG7, ЭФ1,
AG2, ЭФ1,
AGl 1, ЭФ1
AGl 1, ЭФ1
AG9, ЭФ1,
AG5, ЭФ1,
AG6, ЭФ1,
AG24, ЭФ1
AG 13, ЭФ1
AG24, ЭФ1
AG24, ЭФ1
AG24, ЭФ1
AG6, ЭФ1,
AG6, ЭФ1,
AG5, ЭФ1,
AG2, ЭФ1,
AG24, ЭФ1
AG24, ЭФ1
БХ2
AG25, ЭФ1
AG24, ЭФ1
AGl 1, ЭФ1
AG24, ЭФ1,
AGl 1, ЭФ1,
AG24, ЭФ1,
AG24, ЭФ1,
AG4, ЭФ1
ЭФ2, БХ1
, ЭФ2, БХ1
ЭФ2, БХ1
, ЭФ2, БХ1
ЭФ2, БХ1
ЭФ2
, ЭФ2, БХ1
, ЭФ2, БХ1
ЭФ2
ЭФ2, БХ1
ЭФ2, БХ1
, ЭФ2
, ЭФ2
, ЭФ2, БХ1
, ЭФ2, БХ1
, ЭФ2, БХ1
ЭФ2, БХ1
ЭФ2, БХ1
ЭФ2, БХ1
ЭФ2
, ЭФ2, БХ1
, ЭФ2, БХ1,
, ЭФ2, БХ1
, ЭФ2, БХ1
, ЭФ2, БХ1
, ЭФ2, БХ1
, ЭФ2
, ЭФ2, БХ1
ЭФ2, БХ1
ЭФ2, БХ1
.58 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1989, т. 5, Ns 6 57
Окончание табл. 3
Пеп-
тид Формула очистки Строение
Q1221 AG7, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch23 AGIO, ЭФ1, ЭФ2, БХ1,
БХ2
Ch25 AGl 1, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
0 2 5 і AG2, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch252 AG5, ЭФ1, ЭФ2
Ch253 AG3, ЭФ1, ЭФ2, БХ1,
БХ2
Ch254 AG4, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch255 AG2, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch26 AG5, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
ΟΊ26 1 AG7, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch262 AGIO, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch27 AG8, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
СІ1271 AGl , ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch273 AG7, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch28 AG 12, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
СІ1281 IV, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch29 AGl 1, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch30 AG12, ЭФ1, ЭФ2
СИЗО1 AG4, ЭФ1, ЭФ2
Ch302 AG13, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch31 AG24, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
'СИЗІ1 AG24, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch32 A G l l , ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch32! AG7, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch33 AG5, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch34 AG25, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch35 AG3, ЭФ1; ЭФ2
СИ351 AG7, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch36 AG6, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
СІ1391 AG24, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch40 AG7, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch40* AG7, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
<Ch403 AG7, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch404 AG6, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Ch405 AG4, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
СИ411 AG9, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
Gh41 2 AG23, ЭФ1
Ch41 3 IV, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
ADDITIONAL INVESTIGATION O F TRYPTIC AND CHYMOTRYPTIC P E P T I D E S
O F THE AGROTIS S E G E T U M GRANULOSIS VIRUS GRlANULIN
T. L. Levitina, Ν. V. Rodnin, N. M. Gusak, S. A. Atepalikhinai E. A. Kozlov
Ins t i tu te of Molecular Biology and Genetics,
Academy of Sciences of the Ukrainian SSR, Kiev
.58 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1989, т. 5, Ns 6 57
Т а б л и ц а 4
Строение триптических пептидов гранулина вируса гранулеза A. segetum
Amino acid sequence of tryptic peptides of the A. segetum granulosis virus granulin
Пеп-
тид Формула очистки Строение
Tl ThI11, ЭФ1, ЭФ2
T l 1 THI 11, ЭФ1
T i 2 THI 11, ЭФ1, ЭФ2
T2 ι, AGl, ЭФ1, ЭФ2
T5 ц і , AG4, ЭФ1, ЭФ2
T7 π , ЭФ1, ЭФ2, БХ1
TlO II, ЭФ1, ЭФ2, БХ1
TlO1 I, ЭФ1, ЭФ2
T 12 I V , ЭФ1, ЭФ2, БХ1
T15 iv , ЭФ1
T16 I , ЭФ1, ЭФ2, БХ1
T17 ThI, ЭФ1, ЭФ2
T171 i v , ЭФ1, ЭФ2
T175 у , ЭФ1, ЭФ2, БХ1
T19 III, AG25, ЭФ1, ЭФ2,
БХ1
T20 H I , AGl 1, ЭФ1, ЭФ2,
БХ1
T21 HI, AG25, ЭФ1, ЭФ2,
БХ1
T22 IV, ЭФ1, ЭФ2
T23 HI, AGl, ЭФ1, БХ1
T24 III, AGl', ЭФ1, БХ1
S u m m а т у
20 tryptic and 81 chymotryptic peptides were isolated and their partial or complete
amino acid sequence was determined.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Строение некоторых триптических пептидов гранулина вируса гранулеза озимой сов-
ки, Agrotis segetum / Т. JI. Левитина, С. Б. Серебряный, Н. В. Роднин, Э. А. Коз-
лов / /Биополимеры и клетка.— 1986.—2, № 1.— С. 30—36.
2. Строение некоторых химотриптических пептидов гранулина вируса гранулеза ози-
мой совки, Agrotis segetum / Т . Л. Левитина, Н. В. Роднин, С. Б. Серебряный,
Э. А. К о з л о в / / Т а м ж е . — № 2.—С. 73—81.
3. Некоторые физико-химические свойства белка тел включений вируса ядерного поли-
эдроза и вируса гранулеза озимой совки, Agrotis segetum / Э. А. Козлов, Т. Л. Ле-
витина, Η. М. Гусак, С. Б. Серебряный/ /Там же.— 1985.—1, № 3,—С. 121 — 124. ̂
4. Cloning and sequencing of t'he granulin gene from the Trichoplusia ni granulosis vi-
rus / D. Akiyoshi, R. Chakerian, G. F. Roihrmiann et al. / / Virology.— 19>8б—141, \N 2.—
P. 328—332.
5. Kozlov Ε. A., Levitina T. L., Gusak N. M. The primary structure of Baculovirus inclu-
sion body proteins. Evolution and structure-function a s p e c t s / / C u r r . Top.Microbiol,
and Immunol.—Il986,—131,—P. ,1311 —164.
Ин-т молекуляр. биологии и генетики Получено 27.03 89
АН УССР, Киев
.58 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1989, т. 5, Ns 6 57
|