Експресія гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей під впливом низьких доз радіації
Представлено результати стосовно особливостей експресії гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей, що зазнали тривалого впливу низьких доз випромінювання. Показано, що рівень експресії гена Сур2е1 та відносний вміст цитохрому Р450 знижуються при тривалій дії радіації. Виявлена різниця в рівні експресії г...
Gespeichert in:
Datum: | 2002 |
---|---|
Hauptverfasser: | , , , |
Format: | Artikel |
Sprache: | Ukrainian |
Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2002
|
Schriftenreihe: | Біополімери і клітина |
Schlagworte: | |
Online Zugang: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156314 |
Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
Zitieren: | Експресія гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей під впливом низьких доз радіації / О.В. Максимчук, І.М. Данко, І.В. Росохацька, М.О. Чащин // Вiopolymers and Cell. — 2002. — Т. 18, № 6. — С. 518-521. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraineid |
irk-123456789-156314 |
---|---|
record_format |
dspace |
spelling |
irk-123456789-1563142019-06-19T01:28:11Z Експресія гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей під впливом низьких доз радіації Максимчук, О.В. Данко, І.М. Росохацька, І.В. Чащин, М.О. Геном та його регуляція Представлено результати стосовно особливостей експресії гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей, що зазнали тривалого впливу низьких доз випромінювання. Показано, що рівень експресії гена Сур2е1 та відносний вміст цитохрому Р450 знижуються при тривалій дії радіації. Виявлена різниця в рівні експресії гена Сур2е1 печінки у статевозрілих тварин обох статей дозволяє припустити, що регуляція експресії відбувається на транскрипційному або на посттрансляційному рівні Представлены результаты, касающиеся особенностей экспрессии гена Сур2е1 в клетках печени мышей, пребывавших длительное время под действием низких доз излучения. Показано, что уровень экспрессии гена Сур2е1 и относительное содержание цитохрома Р450 снижаются при долговременном действии радиации. Виявленные отличия в уровне экспрессии гена Сур2е1 печени у половозрелых животных позволяют предположить, что регуляция экспрессии происходит на транскрипци онном или посттрансляционном уровне. This study presents results on gene Cyp2e1 expression peculiarities in mouse liver cells under continued exposure to low-dose radiation. The gene Cyp2e1 expression and cytochrome P450 relative content were shown to decrease under this exposure. Furthermore, the gene Cyp2e1 expression level was found to depend on the gender and age of animals. The differential expression levels of hepatic gene Cyp2e1 in the mature mice, suggest that regulation occurs at a transcriptional or posttranslational level 2002 Article Експресія гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей під впливом низьких доз радіації / О.В. Максимчук, І.М. Данко, І.В. Росохацька, М.О. Чащин // Вiopolymers and Cell. — 2002. — Т. 18, № 6. — С. 518-521. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. 0233-7657 DOI:http://dx.doi.org/10.7124/bc.00062F http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156314 612..014.482:577.15.642 uk Біополімери і клітина Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
collection |
DSpace DC |
language |
Ukrainian |
topic |
Геном та його регуляція Геном та його регуляція |
spellingShingle |
Геном та його регуляція Геном та його регуляція Максимчук, О.В. Данко, І.М. Росохацька, І.В. Чащин, М.О. Експресія гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей під впливом низьких доз радіації Біополімери і клітина |
description |
Представлено результати стосовно особливостей експресії гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей, що зазнали тривалого впливу низьких доз випромінювання. Показано, що рівень експресії гена Сур2е1 та відносний вміст цитохрому Р450 знижуються при тривалій дії радіації. Виявлена різниця в рівні експресії гена Сур2е1 печінки у статевозрілих тварин обох статей дозволяє припустити, що регуляція експресії відбувається на транскрипційному або на посттрансляційному рівні |
format |
Article |
author |
Максимчук, О.В. Данко, І.М. Росохацька, І.В. Чащин, М.О. |
author_facet |
Максимчук, О.В. Данко, І.М. Росохацька, І.В. Чащин, М.О. |
author_sort |
Максимчук, О.В. |
title |
Експресія гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей під впливом низьких доз радіації |
title_short |
Експресія гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей під впливом низьких доз радіації |
title_full |
Експресія гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей під впливом низьких доз радіації |
title_fullStr |
Експресія гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей під впливом низьких доз радіації |
title_full_unstemmed |
Експресія гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей під впливом низьких доз радіації |
title_sort |
експресія гена сур2е1 у клітинах печінки мишей під впливом низьких доз радіації |
publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
publishDate |
2002 |
topic_facet |
Геном та його регуляція |
url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156314 |
citation_txt |
Експресія гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей
під впливом низьких доз радіації / О.В. Максимчук, І.М. Данко, І.В. Росохацька, М.О. Чащин // Вiopolymers and Cell. — 2002. — Т. 18, № 6. — С.
518-521. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
series |
Біополімери і клітина |
work_keys_str_mv |
AT maksimčukov ekspresíâgenasur2e1uklítinahpečínkimišejpídvplivomnizʹkihdozradíacíí AT dankoím ekspresíâgenasur2e1uklítinahpečínkimišejpídvplivomnizʹkihdozradíacíí AT rosohacʹkaív ekspresíâgenasur2e1uklítinahpečínkimišejpídvplivomnizʹkihdozradíacíí AT čaŝinmo ekspresíâgenasur2e1uklítinahpečínkimišejpídvplivomnizʹkihdozradíacíí |
first_indexed |
2025-07-14T08:45:16Z |
last_indexed |
2025-07-14T08:45:16Z |
_version_ |
1837611317059387392 |
fulltext |
I S S N 0233-7657* Біополімери і клітина. 2002. Т. 18. № 6
ГЕНОМ І ЙОГО РЕГУЛЯЦІЯ
Експресія гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей
під впливом низьких доз радіації
О. В. Максимчук, І. М. Данко, І. В. Росохацька, М. О. Чащин
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
Вул. Академіка Заболотного, 150. Київ, 03143 , Україна
Представлено результати стосовно особливостей експресії гена Сур2е1 у клітинах печінки мишей,
що зазнали тривалого впливу низьких доз випромінювання. Показано, що рівень експресії гена
Сур2е1 та відносний вміст цитохрому Р450 знижуються при тривалій дії радіації. Виявлена
різниця в рівні експресії гена Сур2е1 печінки у статевозрілих тварин обох статей дозволяє
припустити, що регуляція експресії відбувається на транскрипційному або на посттранс-
ляційному рівні
Вступ. Завдяки великій кількості ізоформ цито-
хром Р450 як основний елемент монооксигеназної
системи бере участь <у метаболізмі багатьох сполук
ендо- та екзогенного походження. Особливо важли
ву роль він відіграє у знешкодженні продуктів
вільнорадикального окислення, що утворюються
під впливом тривалої дії іонізуючого випроміню
вання низької інтенсивності.
Головним компонентом мікросомного цитохро
му Р450 є ізофермент Р450ІІЕІ (Сур2е1) з молеку
лярною масою ~ 57 кДа [З J. Ген Сур2е1 скла
дається з дев'яти екзонів та восьми інтронів, що
становить приблизно 11 тис. п. н. Структурна
ділянка гена Сур2еї мишей має довжину 1482 п. н.
[4, 5]. Рівень експресії гена Сур2е1 та активність
ферменту залежать від типу тканин, віку та статі
тварин [3, 6 — 8 ] . Максимальний рівень конститу
тивної експресії гена Сур2е1 та функціонально
активного цитохрому Р450 відмічено у клітинах
печінки [3] .
Встановлено, що у новонароджених тварин не
виявляються ні мРНК, ні ферментативна актив
ність гемопротеїду, але їхній рівень істотно зростає
протягом перших тижнів післянатального розвитку
і досягає максимуму у статевозрілому віці [6, 7 ]. Із
збільшенням віку тварин рівень експресії гена та
вміст ферменту знижуються [7, 8 ].
Внаслідок тривалого впливу низьких доз раді
ації виявлено дворазове підвищення рівня експресії
© О. В. МАКСИМЧУК, І. М. ДАНКО, ї. В. РОСОХАЦЬКА,
М. О. ЧАШИН, 2002
гена Сур2е1 у клітинах печінки дорослих щурів
[9 ]. Встановлено також зниження вмісту мікросом
ного цитохрому Р450 залежно від лінії та статі
мишей [10] .
Мета представленої роботи полягала в порів
няльних дослідженнях рівнів експресії гена Сур2е1
та активності мікросомного цитохрому Р450 у клі
тинах печінки мишей за дії низьких доз іоні
зуючого випромінювання Чорнобильського спектра.
Матеріали і методи. В роботі використано
мишей ліній BALB/c, CC 5 7 W та C 5 7 Bl/6j масою
20—25 г. У дослідну групу входили тварини різного
віку та статі, що народилися і певний час знаходи
лися в зоні відчуження під впливом постійного
випромінювання низької інтенсивності (м. Чорно
биль). Тварини аналогічних ліній, віку та статі
розведення віварію Інституту молекулярної біології
і генетики НАН України (м. Київ), складали конт
рольну групу. В кожному досліді використано не
менше шести тварин.
Вміст цитохрому Р450 визначали в мікросомах
печінки мишей за методом, що базується на здат
ності цитохрому Р450 у відновленій формі зв'язу
ватися з СО і утворювати комплекс з максимумом
поглинання при 450 нм [11J. Після декапітації
тварин печінку промивали холодним 1,15 %-м роз
чином КС1. Мікросомну фракцію виділяли методом
диференційного центрифугування. Постмітохондрі-
альну фракцію центрифугували при 105000 g про
тягом 60 хв на центрифузі L5-50 («Весктап»,
Німеччина).
518
ЕКСПРЕСІЯ ГЕНА Cyp2et У КЛІТИНАХ ПЕЧІНКИ МИШЕЙ
Вимірювання проводили в 100 мМ трис-НСІ-
буфері (рН 7,4) на спектрофотометрі Specord М-40
(«Сагі Zeiss», Німеччина) при концентрації мікро
сомного білка 2 мг/мл. Цитохром відновлювали за
допомогою дитіоніту ( N a 2 S 2 0 4 ) . Для розрахунку
кількості цитохрому Р450 використовували коефі
цієнт молярної екстинкції, що дорівнює 91 N T ' C M " 1 .
Вміст гемопротеїду виражали в наномолях на 1 мг
мікросомного білка* Концентрацію білка визначали
за методом Лоурі в модифікації Петерсона [12] .
Тотальну РНК виділяли з печінки мишей за
допомогою гуанідинізотіоціанатного методу [13] ,
кількість визначали спектрофотометрично. Елект
рофорез РНК (20 мкг) проводили у 0,8 %-му гелі
агарози, що містив 3 % формальдегіду («Fluka»,
Швейцарія). Перенос РНК із гелю на нітроце
люлозні мембрани Hybond-N («Amersham Phar
macia Biotech», Велика Британія) здійснювали у
розчині 20 х S S C
Для гібридизації використано молекулярні зон
ди: ПЛР-продукт гена Сур2е1 та ген /?-актину
(«Clontech», США), які мітили (a - 3 2 P]dCTP за
допомогою набору реагентів «Rediprime» для мітки
розсіяною затравкою («Amersham Pharmacia Bio
tech*). Питома активність ДНК-зондів складала
- 1 - Ю 8 імп/хв на Імкг ДНК.
Синтез кДНК проводили, використовуючи М-
MuLV-ревертазу (20 од/мкл) та oligo(dT) I 8-npa-
ймер (0,5 мкг/мкл) з набору реагентів «First Strand
cDNA Synthesis Kit» (MBI «Fermentas», Литва).
Реакційна суміш (20 мкл) містила 10 мг тотальної
РНК, oligo(dT)18-npaUMep — 0 , 0 2 5 мкг/мкл, 10 х
реакційний буфер, інгібітор РНКази — 1 од/мкл і
M-MuLV ревертазу — 2 од/мкл. Отримана кДНК
слугувала матрицею для полімеразної ланцюгової
реакції (ПЛР).
Ампліфікацію кДНК проводили за допомогою
рекомбінантної термостабільної Taq-полімерази з
кінцевою концентрацією 0,025 од/мкл. Оптимальні
умови проведення ПЛР: 30 циклів, температура
синтезу 72 °С, денатурації — 92—94 °С, відпалю
вання — 66 °С. Як позитивний контроль при про
веденні ПЛР використовували р М Р 2 0 2 (кДНК Сур-
2е1 миші, клоновану в сайті NotIpBluescript IISK),
одержану від д-ра Коліна Хендерсона з Шпиталю
Данді Найнвелс (Велика Британія). Сенсовим пра-
ймером для ПЛР була олігонуклеотидна послі
довність: З'-GAATTC ATGGCGGTTCTTGGCATC-
ACCGTTGC-5', антисенсовим — 5'-GGATCCTCA-
TGAACGAGGAATGACACAGAG- 3 \
Електрофорез продуктів ПЛР проводили у
1 %-му агарозному гелі. Необхідний фрагмент
ДНК виділяли з гелю за допомогою набору реа
гентів («Geneclean III Kit* Bio 101, inc., США).
Передгібридизацію, гібридизацію та авторадіо-
графію проводили згідно з протоколами Маніатіса
[14] . Інтенсивність смуг на блотах оцінювали за
допомогою спеціальної комп'ютерної програми
«Scion image 1.6.».
Результати і обговорення. Тривала дія низь
ких доз радіації призводить до розладу клітинного
метаболізму і поступового виснаження антиокси
дантної системи [15] . Зокрема, іонізуюче вип
ромінювання є одним з факторів оточуючого сере
довища, що впливають на вміст та активність
цитохрому Р450 [10] . Оскільки максимальний рі
вень конститутивної експресії гена Сур2е1 спо
стерігається у печінці статевозрілих тварин [6, 7 ] ,
то для досліджень використано 3—4- та 6—8-
місячних мишей обох статей.
Із рис 1, на якому представлено дані щодо
зміни вмісту цитохрому Р450 під впливом низьких
доз випромінювання, видно значне зниження кіль
кості активного ферменту залежно від лінії мишей
519
МАКСИМЧУК О. В. ТА IH.
(на 15—42 % ) . Найчутливішою до дії низьких доз
радіації виявилася антиоксидантна система мишей
ліній CC 5 7 W та BALB/c, для яких встановлено
зменшення вмісту ферменту на 42 та 36 % від
повідно. Слід відзначити незначні індивідуальні
коливання вмісту гемопротеїду у контрольних тва
рин різних ліній.
В подальшому досліджували вплив низьких доз
іонізуючого випромінювання на вміст цитохрому
Р450 у мишей різного віку та статі лінії BALB/c
(рис. 2). Відносний вміст гемопротеїду у контроль
них тварин становить - 0 , 7 2 нмоль/мг мікросом-
ного білка. У мишей, що народилися і протягом
З—4 місяців знаходилися в зоні відчуження, спо
стерігалося зниження кількості мікросомного ци
тохрому Р450 в середньому на 25 %. Зміна цього
показника для самок складала ЗО % порівняно з
21 % для самців, що свідчить про нижчу радіо
резистентність самок.
Збільшення радіаційних навантажень за раху
нок подовження часу перебування тварин на за
брудненій радіонуклідами теріторії призводить до
істотнішого зменшення вмісту мікросомного цитох
рому Р450. Зокрема, у 6—8-місячних мишей-сам-
ців кількість ферменту знижується на 43 і 24 %
порівняно з аналогічним показником для контроль
них тварин та 3—4-місячних дослідних мишей
відповідно. Суттєвіше зниження вмісту цитохрому
Р450 (приблизно на 46 %) зареєстровано у 6—8-
місячних дослідних самок. Аналіз отриманих даних
дозволяє зробити висновок, що антиоксидантна
система самок є більш чутливою до дії низьких доз
радіації.
Істотніше зниження вмісту цитохрому Р450 у
тварин, що зазнали тривалішого впливу іонізую
чого випромінювання, можливо, пов'язане з інтен
сифікацією процесу вільнорадикального окислення,
гіперпродукцією та накопиченням токсичних про
дуктів і певним виснаженням антиоксидантної сис
теми. Отже, при збільшенні часу перебування на
забрудненій радіонуклідами території знижуються
як радіорезистентність тварин, так і вміст активних
ферментів, що беруть участь у детоксикації клітин.
Слід відзначити неоднакову індивідуальну чут
ливість тварин до дії низьких доз іонізуючого
випромінювання, про що свідчать коливання до
сліджуваного показника в межах окремих груп
тварин. Виявлено, що для 3—4-місячних самок ці
відміни істотніші порівняно з контрольними твари
нами, 3—4-місячними самцями та 6—8-місячними
мишами обох статей.
Оскільки цитохром Р450 є основним фермен
том, що бере участь у детоксикації продуктів окис
лення ненасичених жирних кислот, то зниження
його вмісту свідчить про певну втрату здатності
антиоксидантної системи метаболізувати гідропе-
роксиди та активні форми кисню, що утворюються
при тривалій дії випромінювання низької інтенсив
ності. Зниження вмісту цитохрому Р450 може бути
наслідком як зменшення експресії гена Сур2е1, так
і результатом мутаційних змін у важливих (регу
ляторних чи структурних) ділянках гена.
Для пошуку механізмів, які контролюють зни
ження вмісту цитохрому Р450, досліджено рівень
експресії мРНК гена Сур2е1. Для цього проведено
гібридизацію тотальної РНК печінки з ПЛР-про
дуктом гена Сур2е1 (рис. 3) . Аналіз отриманих
даних показав, що рівень експресії гена Сур2е1
неоднаковий у тварин різного віку та статі. Макси
мальний рівень експресії зареєстровано у контроль
них тварин. Лише у 6—8-місячних самців рівень
експресії збільшений на 16 %, хоча ці дані стати
стично недостовірні. В той же час у самок ана
логічного віку рівень експресії гена Сур2е1 дещо
знижений (на 17 % ) . Значне зниження вмісту
активного мікросомного цитохрому Р450 у 6—8-
520
ЕКСПРЕСІЯ ГЕНА Cyp2el У КЛІТИНАХ ПЕЧІНКИ МИШЕЙ
місячних тварин (на 43 % у самців та на 46 % у
самок) при практично незмінному рівні експресії
мРНК гена Сур2е1> вірогідно, обумовлене не пору
шеннями на транскрипційному рівні, а, скоріше, є
результатом посттрансляційних змін гемопротеїду
та виснаження антиоксидантної системи при знеш
кодженні продуктів пероксидації ліпідів. Що сто
сується 3—4-місячних тварин, то для них за
реєстровано зниження рівня експресії гена Сур2е1
приблизно на 32 %. Цей показник у самок в
середньому вищий порівняно з самцями (36 та
28 % відповідно).
Слід зауважити, що зниження відносного вмі
сту цитохрому Р450 у 3—4-місячних тварин прак
тично відповідає рівню зменшення експресії мРНК
гена Сур2е1. Це може бути доказом того, що зміни
вмісту активного ферменту у 3—4-місячних тварин
обумовлені порушеннями в роботі механізмів, які
контролюють синтез мРНК гена Cyp2eL
Необхідно також відмітити значні індивідуаль
ні відмінності в експресії гена Сур2е1 у клітинах
печінки 3—4-місячних самок порівняно з контроль
ними та 6—8-місячними тваринами. Стабільніший
рівень експресії мРНК гена Сур2еї виявлено в
межах групи дослідних самців аналогічного віку.
Отримані результати дозволяють припустити,
що існують різні механізми, які контролюють вміст
та активність цитохрому Р450 на транскрипцій
ному та посттрансляційному етапах, у тварин, що
зазнали тривалого впливу низьких доз іонізуючого
випромінювання.
О. V. Maksymchuk, 1. М. Dattko, I. V. Rosohac'ka, M. О. Chaschyn
Gene Cyp2el expression in mouse liver cells exposed to low-dose
radiation
Summary
This study presents results on gene Cyp2el expression peculiarities
in mouse liver cells under continued exposure to low-dose radiation.
The gene Cyp2el expression and cytochrome P450 relative content
were shown to decrease under this exposure. Furthermore, the gene
Cyp2el expression level was found to depend on the gender and age
of animals. The differential expression levels of hepatic gene Cyp2el
in the mature mice, suggest that regulation occurs at a trans
criptional or posttranslational level
О. В. Максимчук, И. M. Данко, И. В. Росохацкая, И. А Чаищн
Экспрессия гена Сур2е1 в клетках печени мышей под
действием низких доз радиации
Резюме
Представлены результаты, касающиеся особенностей экспрес
сии гена Сур2е1 в клетках печени мышей, пребывавших дли
тельное время под действием низких доз излучения. Показано,
что уровень экспрессии гена Сур2е1 и относительное содержа
ние цитохрома Р450 снижаются при долговременном дейст
вии радиации. Виявленные отличия в уровне экспрессии гена
Сур2е1 печени у половозрелых животных позволяют предполо
жить, что регуляция экспрессии происходит на транскрипци
онном или посттрансляционном уровне.
ПЕРЕЛІК ЛІТЕРАТУРИ
1. Parke D. К , Joannides С, Lewis F.V. The role cytochromes
P450 in the detoxication and activation of drags and other
chemicals / / Can. J. Physiol, and Pharmacol.—1991.—
N 69 .—P. 537—549 .
2. Nebert D. W., Nelson D. R., Coon M. J. The P450 super
family: updateon new sequences, gene mappin, and recom
mended nomenclature / / DNA Cell Bio l .—1991.—10.—P. 1—
14.
3. Emoto C , Yamazaki H., Yamazaki S. Characterization of
cytochrome P450 enzymes involved in drag oxidation in mouse
intestinal microsomes / / Xenobiotica.—2000.—30, N 10.—
P. 943—953 .
4. Freeman J. E.t Stirling D.t Russell A. L., Wolf R. cDNA
deduced amino acid sequence, predicted gene structure and
chemical regulation of mouse CYP2E1 / / Biochemistry.—
1992.—281.—P. 689—695 .
5. Gonzalez F. J. Molecular genetics of the P 4 5 0 superfamily / /
Pharmacol. T h e n — 1 9 9 0 . — 4 5 . — P . 1—38.
6. Парамонова Г. И. Возрастные особенности изменения
ферментов микросомального окисления печени крыс под
влиянием барбитуратов / / Фармакология и токсиколо
гия.— 1981.—№ 1.—С. 9 8 — 1 0 1 .
7. Arioshi T.t Tsuboi К., Hamasaki К. Effects of age and sex on
microsomal heme oxygenase and cytochrome P450 content in
liver of rats / / J. Pharmacobiodyn.—1981.—4, N. 9.—
P. 664—669.
8. Porter T. D., Coon M. J. Cytochrome P450 . Multiplicifity of
isoforms, substrates and catalytic and regulatory mechanisms.
Minireview / / J. Biol. Chem.—1991.—N 21 .—P. 13469—
13472.
9. Prima V. J., Glushakova L. G. Radiation-induced peculiarities
of Cytochrome P450IIE1 and oncogenes mRNA accumulation
in different rat tissues / / Biopolimery і kletka.—1998.—14,
N 6.—P. 540—544 .
10. Глушакова Л. Г., Максимчук О. В., Данко И. М. Влияние
факторов Чернобыльской зоны отчуждения на содержание
цитохрома Р450 в микросомах печени мышей / / Укр.
біохім. журн.—2000 .—72, № 6. С. 63—66 .
11. Отига Т., Sato R. The carbon monoxide-binding pigment of
liver microsomes / / J. Biol. Chem.—1964.—239, N 7.—
P. 2370—2385.
12. Peterson G. L. Determination of total protein / / Meth.
Enzymol .—1983.—91.—P. 95—119 .
13. Chomczynski P., Sacchi N. A simple and fast method to
extract RNA from tissues, culture cells II Biochemistry.—
1990.—9, N 6 .—P. 5091—5094 .
14. Maniatis Т., Fritsch E. F., Sambrook J. Molecular cloning. A
laboratory manual.—New York: Cold Spring Harbour Lab.
press, 1982.—452 p.
15. Барабой В. А., Олійник С. А., Хмелевський Ю. В. Стан
антиоксидантної системи за дії іонізуючої радіації у низь
ких дозах та низької інтенсивності / / Укр. биохим.
журн.—1994 .—66, № 4 .—С. 3—18.
УДК 612. .014.482:577.15.642
Надійшла до редакції 28.12.2000
521
|