Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd

Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволило получить маркеры к генам PpdDIa и PpdВIa. Маркерами являются нуль-аллель-продукт ISSR-ПЦР размером 350 п. н. и SSR-ампликон величиной 180 п. н. Использование маркеров позволяет с высокой степенью вероятности отбирать на ранних эта...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Дата:	2003
Автори:	Балашова, И.А., Файт, В.И, Сиволап, Ю.М.
Формат:	Стаття
Мова:	Russian
Опубліковано:	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2003
Назва видання:	Біополімери і клітина
Теми:	Геном та його регуляція
Онлайн доступ:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156512
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd / И.А. Балашова, В.И. Файт, Ю.М. Сиволап // Вiopolymers and Cell. — 2003. — Т. 19, № 3. — С. 257-261. — Бібліогр.: 10 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-156512
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-1565122019-06-19T01:25:44Z Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd Балашова, И.А. Файт, В.И Сиволап, Ю.М. Геном та його регуляція Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволило получить маркеры к генам PpdDIa и PpdВIa. Маркерами являются нуль-аллель-продукт ISSR-ПЦР размером 350 п. н. и SSR-ампликон величиной 180 п. н. Использование маркеров позволяет с высокой степенью вероятности отбирать на ранних этапах селекционного процесса PpdDIa и PpdBIa генотипы, идентифицировать сорта и линии пшеницы с различной чувствительностью к фотопериоду. Для маркування генів, які відповідають за чутливість до фотоперіоду, зокрема, генів PpdDIa та PpdBIa використовували ISSR- та SSR-полімеразну ланцюгову реакцію. Маркером гена PpdBIa є поліморфний SSR-амплікон розміром 180 п. н. Гомозиготні за PpdBIa генотипи ідентифікували по відсутності продукту реакції ампліфікації розміром 350 п. н. SSR- and ISSR-analyses were used for creating a marker to genes responsible for the sensitivity to photoperiod, in particular, the genes PpdDIa and PpdBIa. The gene marker to PpdBIa is a polymorphic SSR-apticon of size 180 b. p. The gene marker to PpdDIa is nulle-allelic 350(–). The genotypes homozygous on PpdDIa are identified by the absence of amplification product of size 350 b. p. 2003 Article Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd / И.А. Балашова, В.И. Файт, Ю.М. Сиволап // Вiopolymers and Cell. — 2003. — Т. 19, № 3. — С. 257-261. — Бібліогр.: 10 назв. — рос. 0233-7657 DOI:http://dx.doi.org/10.7124/bc.000659 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156512 575.116; 633.16: 557.1 ru Біополімери і клітина Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Геном та його регуляція Геном та його регуляція
spellingShingle	Геном та його регуляція Геном та його регуляція Балашова, И.А. Файт, В.И Сиволап, Ю.М. Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd Біополімери і клітина
description	Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволило получить маркеры к генам PpdDIa и PpdВIa. Маркерами являются нуль-аллель-продукт ISSR-ПЦР размером 350 п. н. и SSR-ампликон величиной 180 п. н. Использование маркеров позволяет с высокой степенью вероятности отбирать на ранних этапах селекционного процесса PpdDIa и PpdBIa генотипы, идентифицировать сорта и линии пшеницы с различной чувствительностью к фотопериоду.
format	Article
author	Балашова, И.А. Файт, В.И Сиволап, Ю.М.
author_facet	Балашова, И.А. Файт, В.И Сиволап, Ю.М.
author_sort	Балашова, И.А.
title	Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd
title_short	Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd
title_full	Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd
title_fullStr	Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd
title_full_unstemmed	Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd
title_sort	использование issr- и ssr-полимеразной цепной реакции для создания днк-маркеров к генам ppd
publisher	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate	2003
topic_facet	Геном та його регуляція
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156512
citation_txt	Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd / И.А. Балашова, В.И. Файт, Ю.М. Сиволап // Вiopolymers and Cell. — 2003. — Т. 19, № 3. — С. 257-261. — Бібліогр.: 10 назв. — рос.
series	Біополімери і клітина
work_keys_str_mv	AT balašovaia ispolʹzovanieissrissrpolimeraznojcepnojreakciidlâsozdaniâdnkmarkerovkgenamppd AT fajtvi ispolʹzovanieissrissrpolimeraznojcepnojreakciidlâsozdaniâdnkmarkerovkgenamppd AT sivolapûm ispolʹzovanieissrissrpolimeraznojcepnojreakciidlâsozdaniâdnkmarkerovkgenamppd
first_indexed	2025-07-14T08:51:28Z
last_indexed	2025-07-14T08:51:28Z
_version_	1837611707132805120
fulltext	ISSN 0233-7657. Біогюлімери і клітина. 2003. Т. 19. № З ГЕНОМ І ЙОГО РЕГУЛЯЦІЯ Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd И. А. Балашова, В. И. Файт \ Ю. М. Сиволап Южный биотехнологический центр в растениеводстве УААН и МОН Украины Овидиопольская дор., 3, Одесса, 65036, Украина Селекционно-генетический институт Овидиопольская дор., 3, Одесса, 65036, Украина Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволило получить маркеры к генам PpdDIa и Ppd В 1а. Маркерами являются нуль-аллель-продукт ISSR-ПЦР размером 350 п. н. и SSR-ампликон величиной 180 п. н. Использование маркеров позволяет с высокой степенью вероятности отбирать на ранних этапах селекционного процесса PpdDIa и PpdBIa генотипы, идентифицировать сорта и линии пшеницы с различной чувствительностью к фотопериоду. Введение. Реализация потенциала продуктивности мягкой пшеницы в значительной мере определяет ся особенностями ее индивидуального развития. Скорость развития мягкой пшеницы зависит от уровня экспрессии генов нескольких генетических систем, в том числе генов, отвечающих за контроль чувствительности к фотопериоду (Ppd-тты). Сис тема генов Ppd обусловливает до 20 % вариабель ности по времени колошения [1 ]. Вовлечение дан ных генов в селекционные программы направлено на создание генотипов с заданной скоростью разви тия в конкретных климатических условиях. Ис пользование ДНК-маркеров к генам Ppd представ ляет особый интерес в связи с необходимостью установления Ppd-генотипов значительного коли чества сортов пшеницы различного эколого-геогра- фического происхождения и устранения имеющих ся противоречий в обозначении генов, контролиру ющих фотопериодическую реакцию [2] . Развитие методов молекулярно-генетического анализа пока зало широкие возможности для создания ДНК-мар керов к индивидуальным генам, в том числе к генам, отвечающим за чувствительность к фотопе риоду [3] . © И. А. БАЛАШОВА, В. И. Ф А Й Т , Ю. М. С И В О Л А П , 2 0 0 3 Использование ДНК-маркеров в селекционных программах может способствовать интенсификации процесса отбора новых скороспелых сортов и линий мягкой пшеницы. В настоящей работе рассматрива ется возможность получения ДНК-маркеров к ге нам PpdDIa и PpdBIa с помощью ISSR- и SSR-по лимеразной цепной реакции (ПЦР). Материалы и методы. Исходным материалом для маркирования генов ppd служили чувствитель ные к фотопериоду сорта (рецессивы по ppdAIb, ppdBIb, ppdDIb): Mercia, Avalon, Norman, Brim- stoun, Brigand, Rendezvous; слабочувствительный к фотопериоду сорт Ciano-67 (носитель доминантного аллеля гена PpdDIa); замещенные по хромосоме второй гомологичной группы линии , созданные в генофоне сорта Mercia: Mercia/2D RCM-71, Mer- c i a / 2 D Ciano-67 (PpdDIa); Mercia/2B Chinese Spring (PpdBIa), Mercia/2A С59/(PpdAIa); заме щенные по хромосоме 2D (PpdDIa) линии, создан ные в генофоне пяти сортов озимой пшеницы: Avalon/2D Ciano-67, Avalon/2D RCM-71, Nor- m a n / 2 D RCM-71, Brimstoun/2D RCM-71, Bri- gand/2D RCM-71, Rendezvous/2D RCM-71; 12 ли ний, характеризующихся разной чувствительно стью к фотопериоду, полученных от скрещивания фоточувствительного сорта Mercia со слабочувстви тельной замещенной линией Mercia/2D Ciano-67; 257 10 линий, имеющих высокую (пять линий) и низ кую (пять линий) чувствительность к фотопериоду, полученных от скрещивания сорта Mercia * Мег- cia/2B Chinese Spring (данный материал тестиро ван по чувствительности к фотопериоду в течение двух лет в климатических условиях Англии и Франции, предоставлен John Innes Centre, Great Britain). Использовали F 2 популяцию (І04 растения), полученную от скрещивания слабочувствительной к фотопериоду замещенной линии Avalon/2D Cia no-67 (носитель доминантного аллеля PpdDIa) с высокочувствительным к фотопериоду сортом Одесская 16 (рецессив по всем трем генам ppd); 18 сортов яровой и озимой мягкой пшеницы разного голого-географического происхождения. Гибридо логический анализ по системе генов Ppd проводили согласно методике [4 ]. Соответствие полученного расщепления теоре тически ожидаемому оценивали по критерию х' \|5 ]. ДНК выделяли из пятидневных проростков (сорта, замещенные линии) и молодых листьев (растения F 2) по методике, разработанной в работе [6 1. Реакцию амплификации проводили на приборе Термоциклер СМ2 при следующих режимах: дена турация ДНК при температуре 93 °С — 1 мин, элонгация при 72 °С — 40 с (конечная элонгация в течение 3 мин), отжиг с ISSR-праймерами при 58 °С — 30 с, отжиг с SSR-праймерами проводили при 60 °С. Реакционная смесь объемом 20 мкл содержала буфер, в состав которого входили 50 мМ КС1, 20 мМ трис-HCl, рН 8,4, 1,5 мМ MgCl 2 , 0,01 % твин, 20 нг Д Н К , N T P в концентрации 5 мкМ каждый, 1 ед. Tag-полимеразы, 5 мкМ праймер. Анализ продуктов реакции осуществляли в 2 %-м агарозном геле с окрашиванием броми стым этидием и в 6 %-м ПААГ с окрашиванием нитратом серебра. Результаты и обсуждение. Объектами анализа для создания ДНК-маркеров к генам Ppd служили замещенные по 2D, 2В, 2А хромосомам линии (носители генов PpdDIa, PpdBIa, Ppd Ala соответ ственно) и их рекуррентный родитель, озимый сорт Mercia (носитель рецессивных аллелей генов ppd). ISSR-ПЦР с праймером (AG) 6 C выявляет полимор физм ДНК замещенных по второй гомологичной группе хромосом линий в генофоне сорта Mercia. Отличительной чертой полиморфизма является от сутствие одного из продуктов реакции величиной 350 п. н. у Д Н К линий Mercia /2D Ciano-67 и Mercia/2D RCM-71 (носители доминантного аллеля гена PpdDIa) в сравнении с Д Н К линий Mercia/2B Chinese Spring, Mercia/2А C591 и исходного рекур рентного родителя сорта Mercia. В дальнейшем "/" " з 4 5 6 ~ " 7v""v~" Рис. І. Электрофореграммы ISSR-полимеразной цепний реак ции Д Н К замещенных линий и их рекуррентных родителей: / — Brigant /2D RCM-71 (PpdDIa); 2 — Brigant (рецессив по ppd); З — маркеры молекулярной массы, 4 — Mercia (рецессив по ppd генам); 5 — Mercia /2D Ciano-67 (PpdDIa); 6 — Mer- c ia /2D RCM-71 (PpdDIa); 7 — Avalon (рецессив no ppd); 8 — Avalon/2D Ciano-6 (PpdDIa); 9 — Avalon/2D RCM-71 (PpdDIa). Ц и ф р ы слева — величины фрагментов маркера молекулярной массы, представленного на дорожке 3 (pUC/mix); стрелками указано наличие (дорожках 4) и отсутствие (дорожках 5) продукта реакции размером 350 п. н. отсутствие ампликона обозначали как нулевой ал лель 350( - ) . Подобные результаты получены также при проведении амплификации с праймером (AG) 6 C на ДНК замещенных по хромосоме 2D линий, создан ных в генофонах пяти разных фоточувствительных сортов пшеницы (рис. 1), и ДНК шести линий (слабая чувствительность к фотопериоду), пол у ч е н н ы х от с к р е щ и в а н и я Mercia * M e r c i a / 2 D Ciano-67. На рис. 1 представлены различия в спек трах продуктов амплификации в области 350 п. н. У носителей рецессивных аллелей генов ppd (до рожки 2, 4, 7) детектируется ампликон величиной 350 п. н., в то время как нулевой аллель 350(-) наблюдался у замещенных линий носителей доми нантного гена PpdDIa (дорожки 7, 5, 6, 8, 9). Следует отметить, что нуль-аллель детектируется независимо от происхождения донора хромосомы 2D. Так , ISSR-аллель 350 (-) выявлен у замещен ных линий Mercia/2D Ciano-67, Avalon/2D Ciano- 67, Mercia /2D RCM-71 и Avalon/2D RCM-71 . Ли ния RCM-71 представляет собой замещенную ли нию, где донором гена является сорт Мага. ISSR-анализ ДНК индивидуальных растений попу ляции F 2 , полученной от комбинации скрещивания 258 И С П О Л Ь З О В А Н И Е ISSR- И SSR П Ц Р Д Л Я С О З Д А Н И Я Д Н К - М А Р К Е Р О В Таблица 1 Соотношение расщепления в комбинации скрещивания Avalon/2D Ciano-67 (слабочувствительная к фотопериоду; ранняя) х Одесская 16 (рецессив; поздняя) на «ранние:поздние» растения и соотношение расщепления но аллельному состоянию ISSR-локуса 350(-)/350(+) ' XZ3:\ < 3,84 при df = 1. Avalon/2D Ciano-67 (носитель доминантного гена PpdDIa; ранняя) х Одесская 16 (носитель рецессив ных генов ppdDIb, ppdBIb, ppdAIb; поздняя), по зволил разделить популяцию по аллельному состо янию ISSR-локуса 350( - ) /350(+) на два класса. Нулевой аллель 350 (-) выявлен у слабочувстви тельной к фотопериоду родительской формы — за мещенной линии Avalon/2D Ciano-67 и 22 анали зируемых растений F 2 , как правило, наиболее рано колосящихся. Факт более ранних сроков колоше ния доминантных гомозигот по генам Ppd по срав нению с гетерозиготами [7 ] позволяет предполо жить, что такие растения из анализируемой попу ляции являются носителями доминантного гена PpdDIa в гомозиготном состоянии (теоретически в указанной комбинации скрещивания доминантных гомозигот должно быть 26). Электрофореграммы ДНК остальных 82 растений и их фоточувствитель ного родителя показали наличие ISSR-аллеля 350(+). Соотношение расщепления по ISSR-алле лям 350(- ) /350(+) с высокой достоверностью соот ветствует 1:3, что свидетельствует о моногенном контроле фотопериодической чувствительности (табл. 1). Гибридологический анализ подтвердил моно генные различия по системе генов Ppd между замещенной линией и сортом Одесская 16, но в соотношении 3:1. При гибридологическом анализе гетерозиготы из-за их более раннего колошения по сравнению с рецессивами относят к классу носите лей доминантных аллелей гена PpdDIa, тем самым увеличивая их долю в общей популяции до 3 /4 , ISSR-анализ ДНК 18 сортов озимой и яровой пшеницы различного эколого-географического про исхождения (Ррс/-генотипы не установлены) позво лил по наличию нулевого аллеля 350 (-) идентифи цировать семь сортов как носителей гена PpdDIa: Таблица 2 Результаты ISSR-анализа сортов озимой и яровой пшеницы различного эколого-географического происхождения Yerek 79, Erin, Seri, Danica, Beacon, Frontana, Kentana 48 (табл. 2). В результате проведения SSR-ПЦР с направ ленными к микросателлитному локусу HVM36 праймерами показано наличие полиморфного амп- ликона величиной 180 п. н. у замещенной линии Mercia/2B Chinese Spring (рис. 2) , а также у пяти слабочувствительных к фотопериоду линий, явля ющихся носителями гена PpdBIa. Электрофореграммы продуктов амплификации ДНК исходного рекуррентного родителя, пяти фо точувствительных линий, полученных от комбина ции скрещивания Mercia Merc ia /2B Chinese Spring, и замещенных по 2D и 2А хромосомам линий (носителей генов PpdDIa и PpdAIa) свиде тельствуют об отсутствии ампликона величиной 180 п. н. Для создания ДНК-маркеров к генам Ppd, контролирующих чувствительность к фотопериоду у мягкой пшеницы, применяли SSR- и ISSR-ПЦР [8 ]. Сравнение электрофореграмм продуктов амп лификации «рекуррентный родитель»—замещенная линия—«родитель—донор» позволяет выявлять по- 259 БАЛАШОВА И. А., Ф А Й Т В И., С И В О Л А П Ю. М. / 2 3 4 5 6 7 Н 9 Рис. 2. Электрофореграммы продуктов SSR-полимеразной цеп ной реакции замещенных линий и их рекуррентного родителя: У— Mercia (рецессив по ppd); 2—Mercia/2D Ciano-67 (PpdDIa); 3, 4 — Mercia/2B Chinese Spring (PpdBIa); 5 — Mercia/2A C591 (PpdAIa); 6 — Avalon (рецессив no ppd); 7 — маркеры молекулярной массы; 8— сорт Рось (ячмень); 9— сорт Паллидум-107 (ячмень). Стрелками на дорожках 3 и 4 отмечены полиморфные фрагменты Д Н К размером 180 и. н. Этот фрагмент является ДНК-маркером к гену PpdBIa диморфизм ДНК. В связи с тем, что ISSR-ПЦР проводили на контрастных по фоточувствительно сти генотипах, ISSR-аллель 350(-) рассматривается как маркер гена PpdDIa Отсутствие одного из продуктов реакции амплификации, вероятно, свя зано с мутацией в сайте праймирования. Идентич ный характер полиморфизма ДНК замещенных по хромосоме 2D линий в генофонах сортов Avalon, Mercia, Norman, Brigant, Brimstoun, Rendezvous позволяет с большой долей уверенности считать данный аллель 350 (-) маркером гена PpdDIa, Ре зультаты анализа ДНК 12 линий, полученных от комбинации скрещивания Mercia * Merc ia /2D Ciano-67 и тестированных по чувствительности к фотопериоду, также дают основание использовать ISSR-аллель 350(-) для детекции слабочувстви тельных к фотопериоду растений пшеницы. Отсут ствие полиморфизма ДНК у носителей одного и того же доминантного гена PpdDIa, ведущего свое начало от разных доноров, свидетельствует в поль зу сделанного вывода. В результате ISSR-анализа индивидуальных растений F 2 популяции Avalon/2D Ciano-67 х Одесская 16 показана возможность мар кирования доминантно гомозиготных по PpdDIa локусу генотипов. До настоящего времени значи тельное количество культивируемых сортов ози мой, а также яровой пшеницы гибридологическим анализом не идентифицировано по системе генов Ppd в отличие от яровых сортов, тестированных по системе Vrn генов. Электрофореграммы продуктов ISSR-ПЦР показали наличие нулевого аллеля 350(-) у ряда сортов, что дает возможность рас сматривать данные сорта в качестве носителей гена PpdDIa, В связи с тем, что у PpdBIa и PpdAIa генотипов присутствует ампликон величиной 350 п. н. (замещенные линии Mercia/2B Chinese Spring, Mercia/2А C591), данный вариант ISSR-анализа пригоден для идентификации сортов и линий, на ходящихся под моногенно доминантным PpdDIa контролем. Поиск ДНК-маркеров к генам Ppd проводили и с помощью SSR-ПЦР. Поскольку известна хро мосомная локализация Ppd генов, для SSR-анализа использовали несколько пар праймеров, синтезиро ванных к микросателлитным локусам 2-й гомоло гичной группы хромосом пшеницы [9] . Примене ние микросателлитных пар праймеров, синтезиро ванных к ячменным хромосомам, обусловлено высокой степенью гомологии хромосом злаков и локализацией гена, ответственного за фоточувстви тельность ячменя на 2Н хромосоме [10] . SSR-анализ с парой праймеров к микросател- литному локусу HVM36 (2Н), проведенный на ДНК замещенных по 2D, 2В, 2А хромосомам лини ях в генофоне сорта Mercia и их рекуррентном родителе, показал наличие полиморфизма ДНК линии Mercia/2B Chinese Spring — носителя гена PpdBIa, Полиморфизм проявляется в наличии пол иморфного ампликона величиной 180 п. н. у дан ной линии и в отсутствии его у ДНК сорта Mercia, а также линий, являющихся носителями генов PpdDIa и PpdAIa, SSR-анализ проводили на 10 линиях, полученных от скрещивания сорта Mercia (рецессив по ppd) х Mercia/2B Chinese Spring (PpdBIa), Спектры продуктов амплификации ДНК данных линий свидетельствуют о наличии пол иморфного ампликона величиной 180 п. н. у фото нейтральных (пять линий) и об отсутствии его у ДНК фоточувствительных линий (пять линий). Полученные результаты дают возможность рас сматривать полиморфный SSR-ампликон в качест ве потенциального ДНК-маркера гена PpdBIa, Ген PpdBIa локализуется на коротком плече 2В хромо сомы пшеницы, а микросателлитный локус HVM36 картирован на коротком плече хромосомы 2Н яч меня. В связи с тем, что в данном случае для маркирования PpdBIa гена пшеницы использовали праймеры к микросателлитному участку ДНК яч меня, локализованному на коротком плече 2Н хромосомы, не исключена вероятность создания ДНК-маркера к гену, отвечающему за чувстви- 260 И С П О Л Ь З О В А Н И Е 1SSR- И S S R - П Ц Р ДЛЯ С О З Д А Н И Я Д Н К - М А Р К Е Р О В тельность к фотопериоду у ячменя и установления его гомоаллельности с геном PpdBIa пшеницы. Авторы выражают благодарность С. В. Чебо тарь за оказанную помощь в выполнении данной работы. /. A. Balashova, V. I. Feit, Yu. М. Sivolap Usage of ISSR and SSR-PCR DNA-marker to Ppd genes Summary SSR- and ISSR-analyses were used for creating a marker to genes responsible for the sensitivity to photoperiod, in particular, the genes PpdDIa and PpdBIa. The gene marker to PpdBIa is a polymorphic SSR-aplicon of size 180 b. p. The gene marker to PpdDIa is nulle-allelic 350(~). The genotypes homozygous on PpdDIa are identified by the absence of amplification product of size 350 b. p. I. А. Балашов, В. I. Файт, Ю. M. Сиволап Використання ISSR- і SSR-полімеразної ланцюгової реакції для створення ДНК маркерів до генів Ppd Резюме Для маркування генів, які відповідають за чутливість до фотоперіоду, зокрема, генів PpdDIa та PpdBIa використову вали ISSR- та SSR-полімеразну ланцюгову реакцію. Маркером гена PpdBIa є поліморфний SSR-амплікон розміром 180 п. н. Гомозиготні за PpdBIa генотипи ідентифікували по відсут ності продукту реакції ампліфікації розміром 350 п. н. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Стельмах А. Ф. Роль генетических систем в онтогене тической адаптации мягкой пшеницы / / Экологическая генетика и эволюция.—Кишинев: Штиинца, 1987.— С. 146—161. 2. Гончаров Н. П. Генетический контроль фотопериодичес кой реакции у мягкой пшеницы / / С.-х. биология.— 1986.—№ П . — С . 84—90. 3. Worland A. S., Вогпег A , Korzun У., Ganal М. W. The influence of photoperiod genes on the adaptability of Europen winter wheat / / Euphytica.—1998.—100.—P. 385—394. 4. Файт В. І., Стельмах А. Ф. Ідентифікація Ppd генотипів деяких сортів озимої м'якої пшениці / / Агроекологія і біотехнологія.—1998.—№ 2 — С. 189—194. 5. Рокщкий П. Ф. Биологическая статистика.—Минск: Вы- шэйш. шк., 1973.—319 с. 6. Сиволап Ю. М., Календарь Р. #., Нецветаев В. П. Использование продуктов полимеразной цепной реакции для картирования генома ячменя (Hordeum vulgare L.) II Генетика.—1997.—33, № 1.—С. 56—30. 7. Гончаров Н. П. Генетический контроль фотопериодичес кой реакции мягкой яровой пшеницы в связи с селекцией на скороспелость: Автореф. дис. ... канд. биол. наук.— Ленинград, 1986.—18 с. 8. Малышев С. В., Картель Н. А. Молекулярные маркеры в генетическом картировании растений / / Молекуляр. био логия.—1997.—31, № 2.—С. 197—208. 9. Roder M.S., Korzun У, Gill В. S., Li W. M., Petrovic S., Sayers E. I. The physical mapping of microsatellite markers in wheet / / Genome.—1998.—41.—P. 278—283 . 10. Liu Z., Biashev R., Saghai Maroof M. A. Development of simple sequence repeat DNA markers and their internation into a barley linkage map / / Theor. and Appl. Genet.—1996.— 93 .—P. 869—876. УДК 575.116; 633.16: 557.1 Надійшла до редакції 17.12.01 261

Использование ISSR- и SSR-полимеразной цепной реакции для создания ДНК-маркеров к генам Ppd

Репозитарії

Схожі ресурси