Полиморфизм 1258G/A гена SPINK-5 при хронической красной волчанке
Структура славянского населения Харькова и Харьковской области по однонуклеотидному полиморфизму 1258A/G гена SPІNK-5 соответствует равновесному состоянию. Аллель А является фактором повышенного риска по хронической красной волчанке у мужчин....
Збережено в:
| Дата: | 2010 |
|---|---|
| Автори: | , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2010
|
| Назва видання: | Фактори експериментальної еволюції організмів |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/177986 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Полиморфизм 1258G/A гена SPINK-5 при хронической красной волчанке / М.И. Зуева, Л.А. Атраментова // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2010. — Т. 9. — С. 416-419. — Бібліогр.: 10 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-177986 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-1779862021-02-18T01:27:52Z Полиморфизм 1258G/A гена SPINK-5 при хронической красной волчанке Зуева, М.И. Атраментова, Л.А. Генетика людини та медична генетика Структура славянского населения Харькова и Харьковской области по однонуклеотидному полиморфизму 1258A/G гена SPІNK-5 соответствует равновесному состоянию. Аллель А является фактором повышенного риска по хронической красной волчанке у мужчин. Структура слов’янського населення Харкова і Харківської області за однонуклеотидним поліморфізмом 1258A/G гену SPІNK-5 відповідає стану рівноваги. Алель А є фактором підвищеного ризику по хронічному червоному вовчаку у чоловіків. Slavic population structure of Kharkov and region of single-nucleotide polymorphism 1258A/G gene SPІNK-5 corresponds to the equilibrium state. Allel A is high-risk factor of chronic lupus erythematosus in men. 2010 Article Полиморфизм 1258G/A гена SPINK-5 при хронической красной волчанке / М.И. Зуева, Л.А. Атраментова // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2010. — Т. 9. — С. 416-419. — Бібліогр.: 10 назв. — рос. 2219-3782 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/177986 ru Фактори експериментальної еволюції організмів Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Генетика людини та медична генетика Генетика людини та медична генетика |
| spellingShingle |
Генетика людини та медична генетика Генетика людини та медична генетика Зуева, М.И. Атраментова, Л.А. Полиморфизм 1258G/A гена SPINK-5 при хронической красной волчанке Фактори експериментальної еволюції організмів |
| description |
Структура славянского населения Харькова и Харьковской области по однонуклеотидному полиморфизму 1258A/G гена SPІNK-5 соответствует равновесному
состоянию. Аллель А является фактором повышенного риска по хронической красной волчанке у мужчин. |
| format |
Article |
| author |
Зуева, М.И. Атраментова, Л.А. |
| author_facet |
Зуева, М.И. Атраментова, Л.А. |
| author_sort |
Зуева, М.И. |
| title |
Полиморфизм 1258G/A гена SPINK-5 при хронической красной волчанке |
| title_short |
Полиморфизм 1258G/A гена SPINK-5 при хронической красной волчанке |
| title_full |
Полиморфизм 1258G/A гена SPINK-5 при хронической красной волчанке |
| title_fullStr |
Полиморфизм 1258G/A гена SPINK-5 при хронической красной волчанке |
| title_full_unstemmed |
Полиморфизм 1258G/A гена SPINK-5 при хронической красной волчанке |
| title_sort |
полиморфизм 1258g/a гена spink-5 при хронической красной волчанке |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| publishDate |
2010 |
| topic_facet |
Генетика людини та медична генетика |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/177986 |
| citation_txt |
Полиморфизм 1258G/A гена SPINK-5 при хронической
красной волчанке / М.И. Зуева, Л.А. Атраментова // Фактори експериментальної еволюції організмів: Зб. наук. пр. — 2010. — Т. 9. — С. 416-419. — Бібліогр.: 10 назв. — рос. |
| series |
Фактори експериментальної еволюції організмів |
| work_keys_str_mv |
AT zuevami polimorfizm1258gagenaspink5prihroničeskojkrasnojvolčanke AT atramentovala polimorfizm1258gagenaspink5prihroničeskojkrasnojvolčanke |
| first_indexed |
2025-07-15T16:17:31Z |
| last_indexed |
2025-07-15T16:17:31Z |
| _version_ |
1837730367347359744 |
| fulltext |
416
Продемонстрировано роботу полученных специфических поликлональных
антител в твердофазном иммуноферментном анализе, иммунопреципитации
и иммуноблот-анализе.
Литература
1. Dynamic alteration of human b-defensin 2 localization from cytoplasm to
intercellular space in psoriatic skin / Wook-Kang Huh, Takashi Oono, Yoshinori Shirafuji
[et al.] // J. Mol Med.— 2002.— Vol.80.— P. 678–684.
2. Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая
кросс-реактивность с Hsp60 / Л.Н. Кaпустян, Р.Г. Киямова, В.С. Гришкова [и др.] /
/ Биополимеры и клетка.— 2006.— Т.2, №22.— С. 117–120.
3. Bradford M. M. A rаpid and sensitive method for quantitation of microgram
quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / Marian M. Bradford
// Analytical Biochemistry.— 1976.— Vol.86.— P. 193–200.
4. Idiopathic dilated cardyomyopathy in the young: Clinical profile and natural
history / Taliercio C.P., Seward J.B., Driscoll D.J. [et al.] // JACC.— 1985.— Vol.6.—
P. 1120–1126.
5. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the
bacteriophage T4 / Ulrich K. Laemmli // Nature.— 1970.— 227, №52.— P. 680–685.
6. P.V. Pogrebnoy et al. Experemental Onkology, March 2003, 25, p. 36–39.
Резюме
В роботе продемонстрировано результаты получения специфических поликло-
нальных антител против человеческого β-дефенсина-2. Показано роботу полученных
анти-hBD-2 антител в твердофазном иммуноферментном анализе, иммунопреци-
питации и иммуноблот-анализе.
В роботі продемонстровано результати отримання специфічних поліклональ-
них антитіл проти людського β-дефенсину-2. Показано роботу отриманих анти-
hBD-2 антитіл в твердофазному імуноферментному аналізі, імунопреципітації та
імуноблот-аналізі.
The results of the purification of high affinity polyclonal antibodies against human
β-defensin-2 are represented in the work. Purified anti-hBD-2 antibodies were examined
in ELISA, immunoprecipitation as well as in western blot analisis.
1ЗУЕВА М.И., 2АТРАМЕНТОВА Л.А.
1ГУ “Институт дерматологии и венерологии АМН Украины” Украина, 61057,
Харьков, ул. Чернышевская, 7/9, e-mail: mahaqq@yandex.ru
2Харьковский национальный университет имени В.Н. Каразина,
Украина, 61077, Харьков, пл. Свободы, 4, e-mail: wshkoda23@rambler.ru
ПОЛИМОРФИЗМ 1258G/A ГЕНА SPІNK-5 ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ
КРАСНОЙ ВОЛЧАНКЕ
Хроническая красная волчанка — заболевание, связанное с аутоимун-
ными патологиями. Для него характерно поражение кожи и соединительной
ткани. О роли генетических факторов в развитии этого заболевания свиде-
417
тельствуют результаты семейных, близнецовых [2] и иммуногенетических
исследований [4, 7]. Понимание природы заболеваний связывают с анализом
кандидатных генов, среди которых большое внимание исследователей
привлекает ген SPINK-5 (serine protease inhibitor Kazal-type-5) — ингибитор
сериновых протеаз пятого Казал-типа, локализованный на хромосоме 5q.
Его продукт — ингибитор сериновых протеаз, принимает участие в противо-
воспалительных и антимикробных процессах, контролирует дифферен-
цировку эпителия и организацию межклеточного матрикса, регулирует
ангиогенез и клеточную адгезию [6, 9]. Полиморфизм гена SPINK-5 связан
с аллергиями, астмой, синдромом Нетертона, целиакией и др. [8, 10]. Поли-
морфизм 1258G/A относится к экзону 14 и обусловливает аминокислотный
полиморфизм (Glu 420 Lys) белка SPINK-5. В данной статье представлены
результаты исследования SNP 1258G/A экзона 14 гена SPINK-5 при хро-
нической красной волчанке.
Материалы и методы
Исследована ДНК 76 больных хронической красной волчанкой и 96 че-
ловек без признаков этого заболевания. Все обследованные — жители Харько-
ва и Харьковской области, украинцы и русские. Выделение ДНК проведено
фенольным методом из лейкоцитов периферической крови по стандартной
методике [3]. Генотипирование выполнено методом ПДРФ (полиморфизм
длин рестрикционных фрагментов). Амплификация фрагмента 14 экзона
гена SPІNK-5 длиной 304 пары нуклеотидов проведена при помощи ПЦР
(полимеразной цепной реакции) с использованием праймеров — 5'-TGC AAT
TGT GAG GAT TTC ACA G-3'/ 5'-CCT GAA CAT GAT CTG TGG ATC-3' [9].
Температурный режим: 95 °С 30 секунд, 52 °С 30 секунд, 72 °С 40 секунд.
Объём рестрикционной смеси — 30 мкл. Амплифицированные фрагменты
подвергали действию рестриктазы HphI (Fermentas, Литва), которая, если в
положении 197 находится аденин, разрезает фрагмент в последовательности
GGTGA(N)8 на два участка, и на три, если в этом положении находится гуа-
нин. Рестриктазу добавляли из расчёта три единицы на 30 мкл смеси после
ПЦР. Образцы инкубировали в течение ночи при температуре 37 °С. Детек-
цию проводили с помощью электрофореза в 3% агарозном геле. Рестрикци-
онные фрагменты соответствовали трём генотипам (рис. 1). Проверку
гипотез о равенстве частот аллелей и генотипов в основной и контрольной
группах, а также распределении фактических и теоретически ожидаемых
частот генотипов проводили с помощью критерия χ2 на уровне значи-
мости 0,05 [1].
Результаты и обсуждение
Частоты SNP A/G различны у мужчин и женщин контрольной группы
(табл. 1). У мужчин более частым оказался аллель G (0,64), у женщин —
аллель А (0,59, р<0,01). Это сделало необходимым проводить дальнейшие
сравнения с учётом пола. Разница в частоте аллелей между основной и конт-
рольной группами выявлена только у мужчин. Частота SNP А у мужчин с ХКВ
составляет 0,69, что в 1,9 раза выше, чем у здоровых — 0,36 (р<0,001).
418
Распределение генотипов у мужчин и женщин основной и контрольной групп
соответствует равновесию Харди-Вайнберга (табл. 2). Половые различия в
частоте аллелей изученного аутосомного гена пока не находят генетического
объяснения. Прояснить ситуацию позволит расширение выборки в ходе
дальнейших исследований.
Различия в частоте генотипов у больных и здоровых выявлены только
в мужской группе (табл. 2). Больные мужчины в 2,8 раза чаще, чем здоровые
являются обладателями генотипа АА, в пять раз реже имеют генотип GG
(р<0,01). Продукт гена SPІNK-5 белок SPІNK-5 является негативным регуля-
тором иммунного ответа, поэтому уменьшение его активности может иниции-
ровать аутоиммунные процессы, которые приводят к развитию хронической
Таблица 2
Частоты генотипов (%)
Фактические Теоретические
Группа Пол
AA AG GG AA AG GG
Контроль Мужской
Женский
16,22
33,90
40,54
50,85
43,24
15,25
13,32
35,19
46,35
48,27
40,33
16,54
Волчанка Мужской
Женский
45,71
31,70
45,71
51,22
8,58
17,08
47,02
32,86
43,10
48,93
9,88
18,21
Таблица 1
Распределение аллелей и генотипов SNP SPINK-5
Генотипы SPINK-5 Частоты SNP
Группа Пол n
AA AG GG А G
Контроль Мужской
Женский
37
59
6
20
15
30
16
9
0,36
0,59
0,64
0,41
Больные ХКВ Мужской
Женский
35
41
16
13
16
21
3
7
0,69
0,57
0,31
0,43
Рис. 1. Электрофореграмма ПЦР-продуктов ДНК шести человек, генотипирован-
ных по полиморфизму 1258G/A гена SPІNK-5: (1 — маркёр молекулярной массы;
2, 3 — генотип АА; 4, 5 — генотип АG; 6, 7 — генотип GG)
Примечание. n — число обследованных, ХКВ — хроническая красная волчанка.
419
красной волчанки [2]. Эти нарушения также могут быть связаны с измене-
нием на уровне дифференцировки клеток иммунного ответа, который также
контролируется продуктом гена SPІNK-5. Известна также роль SPІNK-5 в фор-
мировании барьерной функции кожи и, в частности, защиты от ультрафио-
летового излучения, инфекционных агентов, химически активных веществ
и других неблагоприятных факторов внешней среды [5]. Перечисленные
свойства этого белка убеждают в необходимости дальнейшего исследования
гена SPINK-5, что позволит полнее понять природу исследованного заболе-
вания и найти молекулярные маркёры наследственной предрасположенности.
Литература
1. Гланц С. Медико-биологическая статистика.— М.: Практика.— 1998.—
459 с.
2.Дядык А.И., Багрий А.Э., Ракитская И.В., Щукина Е.В. Системная красная
волчанка: некоторые вопросы этиологии и патофизиологии // Український ревма-
тологічний журнал.— 2009.— №2.— С. 61–66.
3.Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук. Дж. Методы генной инженерии. Молеку-
лярное клонирование: Пер. с англ.— М.: Мир, 1984.— 480 с.
4. Ardoin S.P., Pisetsky D.S. Developments of the scientific understanding of lupus
// Athr. Res. Ther.— 2008.— №10.— P. 218–226.
5. Deraison C., Bonnart C., Lopez F., Besson C. et. al. LEKTI fragments specifically
inhibit KLK5, KLK7, and KLK14 and control desquamation through a pH-dependent
interaction // Mol. Biol. Cell.— 2007.— Vol.18, №9.— P. 3607–3619.
6. Godic A, Dragos V. Successful treatment of Netherton’s syndrome with topical
calcipotriol // Europ. J. Dermatol.— 2004.— Vol.14, №1.— P. 115–117.
7. Horvitz D.A. Regulatory T cells in systemic lupus erythematosus: past, present
and future // Athr. Res. Ther.— 2008.— №10.— P. 226–235.
8. Hubiche T., Ged C., Benard A., Leaute-Labreze C. et. al. Analysis of SPINK 5,
KLK 7 and FLG genotypes in a French atopic dermatitis cohort // Acta Derm Venereol.—
2007.— Vol.87, №6.— P. 499–505.
9. Kabesch М., Carr D., Weiland S.K., von Mutius E. Association between poly-
morphisms in serine protease inhibitor, kazal type 5 and asthma phenotypes in a large
German population sample // Clin. Exp. Allergy.— 2004.— Vol.34, №2.— P. 340–345.
10. Wapenaar М., Monsuur А., Poell J., van‘t Slot R. et. al. The SPINK gene family
and celiac disease susceptibility // Immunogenetics.— 2007.— Vol.59, №5.— P. 349–357.
Резюме
Структура славянского населения Харькова и Харьковской области по одно-
нуклеотидному полиморфизму 1258A/G гена SPІNK-5 соответствует равновесному
состоянию. Аллель А является фактором повышенного риска по хронической крас-
ной волчанке у мужчин.
Структура слов’янського населення Харкова і Харківської області за однонук-
леотидним поліморфізмом 1258A/G гену SPІNK-5 відповідає стану рівноваги.
Алель А є фактором підвищеного ризику по хронічному червоному вовчаку у чо-
ловіків.
Slavic population structure of Kharkov and region of single-nucleotide polymo-
rphism 1258A/G gene SPІNK-5 corresponds to the equilibrium state. Allel A is high-risk
factor of chronic lupus erythematosus in men.
420
ЛИЛО В.В., КОЦАРЕНКО К.В., МАНЬКО В.Г., МАЦЕВИЧ Л.Л.,
РУБАН Т.А., ЛУКАШ Л.Л.
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України,
Україна, 03143, вул. Заболотного, 150, e-mail: lukash@imbg.org.ua
ЦИТОКІНИ ЯК ПОТЕНЦІЙНІ МОДУЛЯТОРИ РЕПАРАЦІЇ
ПЕРВИННИХ УШКОДЖЕНЬ, ІНДУКОВАНИХ
АЛКІЛУВАЛЬНИМИ СПОЛУКАМИ
Забруднення довкілля є одним з основних факторів, що впливають на
стабільність геному. Серед розмаїття антропогенних чинників, що здатні
спричиняти генотоксичну дію, можна виділити групу алкілувальних речовин.
Вони є досить поширеними пошкоджуючими чинниками хімічної приро-
ди — в тому числі, як фактори промислового забруднення та професійного
ризику.
Одним з генопротекторних механізмів, що протидіють мутагенному
впливові алкілувальних сполук на клітинну ДНК, є репарація первинних
пошкоджень, індукованих цими сполуками, що здійснюється, зокрема,
репаративним ензимом О6-алкілгуанін-ДНК алкілтрансферазою (MGMT).
Цей ензим реалізує пряму репарацію найбільш мутагенно- та канцероген-
нонебезпечного пошкодження — О6-алкілгуаніну в клітинній ДНК [1, 2].
Таким чином, знижений рівень експресії та/або активності цього ензиму є
важливим фактором ризику для людей, чия професійна діяльність передбачає
контакт з алкіляторами. Тому важливо якомога краще зрозуміти механізми,
що регулюють експресію цього ензиму.
Ці регуляторні механізми є складними і на сьогоднішній день недо-
статньо вивченими. Так, відомо, [3] що цей ензим є індуцибельним; його
експресія може зростати у відповідь на ряд чинників (гіперметилювання
ДНК, розриви ДНК, тощо). Експресія MGMT може також регулюватися
опосередкованим шляхом — через вплив регуляторних механізмів клітини
(р53-опосередковані, протеїнкіназа С-опосередковані, фосфорилювання,
убіквітинування, тощо). Існують дані, що на експресію MGMT можуть
впливати також цитокіни та фактори росту (інтерферон β, IL-3 — окремо
чи в сполученні з SCF, а також GM-CSF) [4] — проте саме цей аспект пробле-
ми вивчений недостатньо, і в літературі наявні лише поодинокі відомості,
що стосуються цього питання. Наприклад, IFN-β знижує транскрипцію гену
MGMT через індукцію експресії білка р53. Тому IFN-β може знижувати рівні
MGMT в клітинах гліоми через інгібування транскрипції гену MGMT [5].
Цитокіни є групою поліпептидних медіаторів, що беруть участь у фор-
муванні і регуляції захисних реакцій організму. До цитокінів відносяться
інтерферони, колонієстимулюючі фактори, інтерлейкіни, хемокіни, транс-
формуючі ростові фактори, група факторів некрозу пухлин і деякі інші. Біоло-
гічні ефекти цитокінів реалізуються через специфічні клітинні рецепторні
комплекси. Гіперпродукція цитокінів веде до розвитку системної запальної
реакції і може слугувати причиною розвитку ряду патологічних станів. На рівні
|