Иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии

З метою виявлення імуногістохімічних особливостей стану дерми і епідермісу при системній склеродермії було проведено дослідження маркерів: CD3, CD8, CD20, CD79б, CD68, CD1б, CD34, CD105, aSMA, віментин, eNOS, Ki67, колаген IV, bcl2, каспаза 3. При системній склеродермії склад запальних інфільтратів...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	2010
1. Verfasser:	Романенко, К.В.
Format:	Artikel
Sprache:	Russian
Veröffentlicht:	Кримський науковий центр НАН України і МОН України 2010
Schriftenreihe:	Таврический медико-биологический вестник
Schlagworte:	Оригинальные статьи
Online Zugang:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/25485
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии / К.В. Романенко // Таврический медико-биологический вестник. — 2010. — Т. 13, № 1 (49). — С. 175-178. — Бібліогр.: 10 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-25485
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-254852013-03-18T03:08:55Z Иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии Романенко, К.В. Оригинальные статьи З метою виявлення імуногістохімічних особливостей стану дерми і епідермісу при системній склеродермії було проведено дослідження маркерів: CD3, CD8, CD20, CD79б, CD68, CD1б, CD34, CD105, aSMA, віментин, eNOS, Ki67, колаген IV, bcl2, каспаза 3. При системній склеродермії склад запальних інфільтратів та їх локалізація близькі до того, що спостерігаються на стадії склерозу при обмеженій склеродермії. Навкруги придатків шкіри переважають зрілі В-лімфоцити. По кількості та розподілу CD105+ клітин, CD34+, віментин-позитивних та aSMA+ клітин, колагену IV, Ki67+, bcl2+, а також клітин, позитивних на каспазу 3, стан шкіри при системній склеродермії схожий з тим,що спостерігається при склеротичній стадії обмеженої форми. При цьому кількість клітин Лангерганса в епідермісі зберігається підвищеною. The purpose of the current study was to reveal immunohistochemical features of derma and epidermis in the edema stage of localized scleroderma using markers: CD3, CD8, CD20, CD79б, CD68, CD1б, CD34, CD105, aSMA, vimentin, eNOS, Ki67, collagen IV, bcl2, caspase 3. In systemic scleroderma the composition of inflammatory infiltrates and their localization are similar to the ones that can be observed at the stage of sclerosis in a localized form of the disease. Mature B-lymphocytes prevail around the appendages of skin. As to the amount distribution of CD105+ cells, CD34+, vimentin-positive and aSMA+ cells, collagen IV, Ki67, bcl2 as well as the cells which positive to caspase 3 the state of skin in systemic scleroderma is similar to the one that can be seen at the sclerotic stage of a localized form. There at the amount of Langergans’ cells remains increased. 2010 Article Иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии / К.В. Романенко // Таврический медико-биологический вестник. — 2010. — Т. 13, № 1 (49). — С. 175-178. — Бібліогр.: 10 назв. — рос. 2070-8092 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/25485 616.5-004.1-018.2-078.73-018 ru Таврический медико-биологический вестник Кримський науковий центр НАН України і МОН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Оригинальные статьи Оригинальные статьи
spellingShingle	Оригинальные статьи Оригинальные статьи Романенко, К.В. Иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии Таврический медико-биологический вестник
description	З метою виявлення імуногістохімічних особливостей стану дерми і епідермісу при системній склеродермії було проведено дослідження маркерів: CD3, CD8, CD20, CD79б, CD68, CD1б, CD34, CD105, aSMA, віментин, eNOS, Ki67, колаген IV, bcl2, каспаза 3. При системній склеродермії склад запальних інфільтратів та їх локалізація близькі до того, що спостерігаються на стадії склерозу при обмеженій склеродермії. Навкруги придатків шкіри переважають зрілі В-лімфоцити. По кількості та розподілу CD105+ клітин, CD34+, віментин-позитивних та aSMA+ клітин, колагену IV, Ki67+, bcl2+, а також клітин, позитивних на каспазу 3, стан шкіри при системній склеродермії схожий з тим,що спостерігається при склеротичній стадії обмеженої форми. При цьому кількість клітин Лангерганса в епідермісі зберігається підвищеною.
format	Article
author	Романенко, К.В.
author_facet	Романенко, К.В.
author_sort	Романенко, К.В.
title	Иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии
title_short	Иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии
title_full	Иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии
title_fullStr	Иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии
title_full_unstemmed	Иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии
title_sort	иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии
publisher	Кримський науковий центр НАН України і МОН України
publishDate	2010
topic_facet	Оригинальные статьи
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/25485
citation_txt	Иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии / К.В. Романенко // Таврический медико-биологический вестник. — 2010. — Т. 13, № 1 (49). — С. 175-178. — Бібліогр.: 10 назв. — рос.
series	Таврический медико-биологический вестник
work_keys_str_mv	AT romanenkokv immunogistohimičeskijprofilʹporažennojkožiprisistemnojsklerodermii
first_indexed	2025-07-03T05:00:51Z
last_indexed	2025-07-03T05:00:51Z
_version_	1836600631857512448
fulltext	175 О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И УДК 616.5-004.1-018.2-078.73-018 © К.В. Романенко, 2010. ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЙ ПРОФИЛЬ ПОРАЖЕННОЙ КОЖИ ПРИ СИСТЕМНОЙ СКЛЕРОДЕРМИИ К.В. Романенко Донецкий национальный медицинский университет им. М.Горького THE IMMUNOHISTOCHEMICAL PROFILE OF DEFECTIVE SKIN IN SYSTEMIC SCLERODERMA K.V. Romanenko SUMMARY The purpose of the current study was to reveal immunohistochemical features of derma and epidermis in the edema stage of localized scleroderma using markers: CD3, CD8, CD20, CD79б, CD68, CD1б, CD34, CD105, aSMA, vimentin, eNOS, Ki67, collagen IV, bcl2, caspase 3. In systemic scleroderma the composition of inflammatory infiltrates and their localization are similar to the ones that can be observed at the stage of sclerosis in a localized form of the disease. Mature B-lymphocytes prevail around the appendages of skin. As to the amount distribution of CD105+ cells, CD34+, vimentin-positive and aSMA+ cells, collagen IV, Ki67, bcl2 as well as the cells which positive to caspase 3 the state of skin in systemic scleroderma is similar to the one that can be seen at the sclerotic stage of a localized form. There at the amount of Langergans’ cells remains increased. ІМУНОГІСТОХІМІЧНИЙ ПРОФІЛЬ УРАЖЕНОЇ ШКІРИ ПРИ СИСТЕМНІЙ СКЛЕРОДЕРМІЇ К.В. Романенко РЕЗЮМЕ З метою виявлення імуногістохімічних особливостей стану дерми і епідермісу при системній склеродермії було проведено дослідження маркерів: CD3, CD8, CD20, CD79б, CD68, CD1б, CD34, CD105, aSMA, віментин, eNOS, Ki67, колаген IV, bcl2, каспаза 3. При системній склеродермії склад запальних інфільтратів та їх локалізація близькі до того, що спостерігаються на стадії склерозу при обмеженій склеродермії. Навкруги придатків шкіри переважають зрілі В-лімфоцити. По кількості та розподілу CD105+ клітин, CD34+, віментин-позитивних та aSMA+ клітин, колагену IV, Ki67+, bcl2+, а також клітин, позитивних на каспазу 3, стан шкіри при системній склеродермії схожий з тим,що спостерігається при склеротичній стадії обмеженої форми. При цьому кількість клітин Лангерганса в епідермісі зберігається підвищеною. Ключевые слова: системная склеродермия, иммуногистохимические маркеры, дермальные дендроциты, иммунные клетки. Системная склеродермия – аутоиммунное по- лиорганное диффузное заболевание соединительной ткани, поражающее кожу, сосуды и многие внутрен- ние органы, в том числе сердце, легкие, ЖКТ. Пора- жение кожи сводится к воспалению, склерозу и со- судистым нарушениям. Иммунологические наруше- ния сопровождаются глубокими изменениями внут- риклеточного синтеза и метаболизма белков внекле- точного матрикса, клеточного состава соединитель- ной ткани, поражением сосудов и придатков кожи [7, 10, 9]. В последние годы возможности изучения пато- генеза этого заболевания расширились, благодаря иммуногистохимическим (ИГХ) методам. Так, [1] на склеротической стадии очаговой склеродермии (ОС) выявила увеличение количества СD4+ и СD8+ клеток, а также активацию СD16+ макрофагов. Учи- тывая, что указанные клетки являются продуцента- ми интерлейкинов 1 и 2, автор предположила путь нарушения синтеза коллагена через активацию интер- лейкинами синтеза эндотелина-1 в эндотелиальных клетках и, как следствие, нарушение их проницаемос- ти и отек. Также в патогенезе фибротических изменений ряд авторов предполагает участие эндотелина – дополни- тельного рецептора к трансформирующему росто- вому фактору (TGEв) [3], системы синтаза оксида азота [4]. Однако сохраняется множество вопросов о взаи- модействии иммунных клеток, эндотелия и дермаль- ных дендроцитов при прогрессировании склеродер- мии. Целью работы было выявление ИГХ изменений в составе клеток дермы и эпидермиса, участия иммун- ного звена, особенностей синтеза коллагена IV типа, эндотелиальной синтазы оксида азота, эндоглина при системной склеродермии. 176 ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2010, том 13, № 1 (49) МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Для морфологического и иммуногистохимичес- кого исследования использовали парафиновые бло- ки биопсийного материала пораженной кожи, взято- го у 6 больных системной склеродермией (СС). Пос- ле рутинного патогистологического исследования срезы толщиной 4-6 мкм наносили на адгезивные стекла SuperFrost Plus и депарафинировали по стан- дартной методике. Затем проводили нагревание в цитратном буфере с рН=6,0 в автоклаве (8 минут при температуре +1210С). С целью определения экспрес- сии ИГХ маркеров использовали спектр антител, ко- торые включали маркеры: CD3 (клон SP7, LabVision), CD8 (клон SP16, LabVision), CD20 (клон L26, LabVision), CD79б (клон SP18, LabVision), CD68 (клон KP1, LabVision), CD1б (клон MTB1, LabVision), CD34 (клон QBEnd/10, LabVision), CD105 (клон SN6h, LabVision), бSMA (клон 1A4, LabVision), виментин (клон SP20, LabVision), eNOS (клон LabVision), Ki67 (клон SP6, LabVision), коллаген IV (клон PHM-12, LabVision), bcl2 (клон 100/D5, LabVision), каспаза 3 (клон 3CSP01, LabVision). Инкубацию срезов с пер- вичными антителами проводили во влажных каме- рах при температуре 23-250С в течение 30 минут. Титр антител подбирался индивидуально. Следующий этап ИГХ исследования проводили с использованием си- стем визуализации UltraVision LP (LabVision), иден- тификация реакций проводилась с помощью хромо- гена DAB под контролем микроскопа от 20 секунд до 3 минут. Срезы докрашивали гематоксилином Май- ера. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ При системной склеродермии в поверхностных и глубоких слоях дермы наблюдались моноцитарные инфильтраты, содержащие все виды иммунокомпе- тентных клеток. Они были периваскулярными или ло- кализовались вокруг придатков кожи. CD3+ и CD8+ клетки находились, в основном, в составе скоплений вокруг сосудов. Там же обнаруживались CD20+, CD79б+, CD68+ клетки, которые вместе составляли до 60% от всех клеток инфильтрата. Часто инфильтраты локализовались в подкожной жировой клетчатке (рис. 1), при этом инфильтрат содержал большее количество CD3+ клеток, чем мо- нонуклеарные скопления в дерме. Вокруг придатков кожи находились в основном В-лимфоциты. Клетки Лангерганса (CD1б+), как правило, присутствовали в эпидермисе при СС в большем по сравнению с нор- мой количестве (рис. 2). Во всех изученных случаях СС CD105+ клетки обнаруживались в основном в эндотелии и иногда в клетках периваскулярных инфильтратов. В целом, их количество и распределение прибли- жалось к тому, что наблюдается на стадии склероза при очаговой склеродермии. На низком уровне на- ходилась активность eNOS в эндотелиальных клетках сосудов разной локализации, что было показано ра- нее другими авторами [2]. В образцах кожи, полу- ченных от больных СС, изменения количества и рас- пределения CD34+ клеток носили тот же характер, что и при ограниченной склеродермии в стадии склеро- за [1, 10]. Выраженное снижение CD34+ клеток было характерным как для сосочкового, так и для сетчато- го слоев дермы. При СС число aSMA+ клеток также снижалось. Активно эти клетки исчезали в интерсти- ции вокруг придатков кожи. Виментин-позитивные клетки обнаруживались в незначительном количестве вокруг придатков кожи и в сетчатом слое дермы (рис. 3). Локализация их часто совпадала с местами распо- ложения aSMA+ клеток. Таким образом, при СС изменяется соотноше- ние между дендроцитами 1 и 2 типа. Согласно [8], виментин+, бSMA+ и FXIIIa+ дендритические клет- ки пролиферируют и обусловливают развитие фиб- роза, а СD34+ дендроциты, по-видимому, малоактив- ны и не являются первостепенными участниками фибротических изменений. По данным [10], при про- грессировании СС не было особых популяционных и топографических различий в интерстиции вокруг придатков кожи и в участках без придатков. В наших исследованиях обнаружилось более существенное снижение CD34+ клеток вокруг базальной мембра- ны волосяных фолликулов и желез кожи. Снижение количества дендроцитов 2 типа и увеличение клеток 1 типа в наших исследованиях наблюдалось при атро- фических изменениях эпидермиса и придатков кожи. В целом, как отмечает [10], при СС общее количество дендроцитов не изменяется, а только их ИГХ про- филь. В базальной мембране эпидермиса количество коллагена IV типа было уменьшенным по сравнению с нормой, несколько возрастала толщина прослойки этого вида коллагена вокруг мелких сосудов. Сниже- ние прослойки коллагена под эпидермисом можно объяснить нарушениями в синтезе белка в дерме, а воспалительные изменения со стороны сосудов, на- против, вызывают накопление этого белка вокруг базальной мембраны капилляров и мелких сосудов [8]. Повышенная пролиферативная активность при СС была связана с мононуклеарными инфильтрата- ми и уменьшалась по мере ослабления воспаления. Закономерным было угнетение процессов клеточ- ного деления в эпидермисе и придатках кожи [5]. Ki67+ клетки при СС находились в составе базаль- ного слоя эпидермиса и в эпителии придатков в сни- женном количестве по сравнению с нормой. Изред- ка пролиферативная активность определялась в клет- ках инфильтратов вокруг придатков кожи и в пери- васкулярных скоплениях иммунных клеток. Позитив- ные на каспазу дендроциты наблюдались вокруг при- датков кожи, внутри инфильтратов и, как единичные, в разных слоях дермы. Иммунные клетки также де- монстрировали активацию каспазы 3, но доля этих 177 О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И клеток не превышала 5% от всех клеток инфильтрата. Снижение как позитивных на каспазу, так и bc12+ клеток происходило одновременно, это свидетель- ствовало об общности реакции кожи на факторы, обусловливающие прогрессирование заболевания, в разных клеточных популяциях. На низком уровне находилась как пролиферативная, так и антиапопто- тическая активность дермальных дендроцитов. Рис. 1. Инфильтрация Т-лимфоцитами подкожной жировой клетчатки при системной склеродермии. ИГХ реакция с CD3. х200. Таким образом, при системной склеродермии состав инфильтрата приближался к тому, что наблю- дается в стадии склероза при ОС, однако, сами ин- фильтраты часто были более выраженными и захва- тывали гиподерму. В большем количестве, чем при ОС, вокруг придатков кожи обнаруживались В-лим- фоциты, что возможно указывает на различные им- мунные механизмы, приводящие к потере придатков при системной и ограниченной форме заболевания. Как и при ОС, при системной склеродермии су- щественную роль в развитии фиброза играют CD105+ клетки и снижение уровня эндотелиальной синтазы оксида азота. В целом, при системной склеродермии ИГХ картина приближалась к тому, что мы наблюдали в стадии склероза при ОС, что указывает на общность патогенетических изменений при обеих формах бо- лезни. Рис. 2. Клетки Лангерганса в эпидермисе при системной склеродермии. ИГХ реакция с CD1б. х400. 178 ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2010, том 13, № 1 (49) Рис. 3. Виментин-позитивная реакция в дерме и вокруг придатков кожи при системной склеродермии. ИГХ реакция с виментином. х400. Это было справедливо для состава воспалитель- ных инфильтратов, за исключением инфильтратов вокруг придатков кожи, где было относительно боль- ше зрелых В-лимфоцитов, и для клеток Лангерганса, хотя, в целом, количество этих клеток могло быть боль- шим. Аналогичные изменения были характерными для количества и распределения CD105+ клеток, CD34+, виментин-позитивных и aSMA+ клеток, кол- лагена IV, Ki67+, bcl2+, а также клеток, позитивных на каспазу 3. ВЫВОДЫ При системной склеродермии состав воспали- тельных инфильтратов и их локализация близки к тому, что наблюдаются на стадии склероза при ограничен- ной склеродермии. Вокруг придатков кожи преобла- дают зрелые В-лимфоциты. По количеству и распре- делению CD105+ клеток, CD34+, виментин-позитив- ных и aSMA+ клеток, коллагена IV, Ki67+, bcl2+, а так- же клеток, позитивных на каспазу 3, состояние кожи при системной склеродермии сходно с тем, что на- блюдается при склеротической стадии ограниченной склеродермии. При этом количество клеток Лангер- ганса в эпидермисе сохраняется повышенным. ЛИТЕРАТУРА 1. Савенкова В.В. Морфогенез кожи больных очаговой склеродермией в склеротической стадии // Укр. журнал дерматології, венерології, косметології. – 2008. – №4. – С.14-17. 2. Cotton S.A., Herric A.L., Jayson M.I., Freemont A.J. Endothelial expression of nitric oxide synthases and nitrotyrosine in systemic sclerosis skin // J. Pathol. – 1999. – Vol.189, №2. – P.273-278. 3. Dharmapatni A.A., Smith M.D., Ahern M.J. et al. The TGF beta receptor endoglin in systemic sclerosis / / Asian Pac. J. Allergy Immunol. – 2001. – Vol.19, №4. – P.275-282. 4. Dooley A., Low S.Y., Holmes A. et al. Nitric oxide synthase expression and activity in the tight-skin mouse model of fibrosis // Rheumatology (Oxford). – 2008. – Vol.47, №3. – P.272-280. 5. Kwong O.S., Chung J.H., Kim J.A. et al. Apoptosis in scleroderma: differences with regard to clinical subsets and duration // Korean. J. Invest. Dermatol. – 1997. – Vol.4, №2. – P.166-173. 6. Rowell N.R. The skin in Systemic Sclerosin. In “Systemic Sclerosis: Scleroderma”. Ed. by M.I.V. Jason and C.M. Black. – 1988: John Wiley and Sons Ltd. – P.133-150. 7. Tu J.H., Eisen A.Z. Scleroderma. Fitzpatrick“s Dermatology in General Medicine // 5th Ed. Editors J.M. Freedberg et al. – NY: McGraw-Hill, 1999. – Vol.2. – P.2023-2033. 8. Walters R., Pulitzer M., Kamino H. Elastic fiber pattern in scleroderma/morphea // J. Cutaneous Pathology. – 2009. – Vol.36, №9. – P.952-957. 9. Xie Y., Zhang X., Inoue Y. et al. Expression of CD1a and CD86 on scleroderma Langerhans cells // Eur. J. Dermatol. – 2008. – Vol.18, №1. – P.50-54. 10.Yokoyama E. Immunohistochemical evaluation of dermal mesenchymal cells in relation to the development of scleroderma // Bull. Yamaguchi Med. – 2005. – Vol.52, №3-4. – Р.43-53.

Иммуногистохимический профиль пораженной кожи при системной склеродермии

Institution

Ähnliche Einträge