Состояние процессов детоксикации и обезвреживания липидных гидропероксидов в сетчатке и зрительном нерве в условиях экспериментальной глаукомы
Робота була виконана на кролях з модельованою глаукомою.Визначали активнicть ферментiв глутатiонпероксидази та глутатiон-S-трансферази в тканинах сiткiвки i зорового нерва в динамiцi розвитку глаукомного процесу. Отриманi результати свiдчать про зниження активностi ферментiв глутатiонпероксидази та...
Збережено в:
| Дата: | 2010 |
|---|---|
| Автор: | |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України
2010
|
| Назва видання: | Таврический медико-биологический вестник |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/25637 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Состояние процессов детоксикации и обезвреживания липидных гидропероксидов в сетчатке и зрительном нерве в условиях экспериментальной глаукомы / В.Н. Сердюк // Таврический медико-биологический вестник. — 2010. — Т. 13, № 4 (52). — С. 172-175. — Бібліогр.: 22 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-25637 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-256372011-08-18T12:05:15Z Состояние процессов детоксикации и обезвреживания липидных гидропероксидов в сетчатке и зрительном нерве в условиях экспериментальной глаукомы Сердюк, В.Н. Оригинальные статьи Робота була виконана на кролях з модельованою глаукомою.Визначали активнicть ферментiв глутатiонпероксидази та глутатiон-S-трансферази в тканинах сiткiвки i зорового нерва в динамiцi розвитку глаукомного процесу. Отриманi результати свiдчать про зниження активностi ферментiв глутатiонпероксидази та глутатiон-S-трансферази в тканинах сiткiвки та зорового нерва ока. The work was on the rebits which one has been modelated glaukoma.We estimated the activity of ferments in the eye tissue and dynamics of glaukoma prosess The results turned out are indicatived of decline in activity of ferments glutationperoxydasa and glutation-S-transferasa in the retina and optic nerve tissue. 2010 Article Состояние процессов детоксикации и обезвреживания липидных гидропероксидов в сетчатке и зрительном нерве в условиях экспериментальной глаукомы / В.Н. Сердюк // Таврический медико-биологический вестник. — 2010. — Т. 13, № 4 (52). — С. 172-175. — Бібліогр.: 22 назв. — рос. 2070-8092 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/25637 617.7-007.681:577.19-07 ru Таврический медико-биологический вестник Кримський науковий центр НАН України і МОН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Оригинальные статьи Оригинальные статьи |
| spellingShingle |
Оригинальные статьи Оригинальные статьи Сердюк, В.Н. Состояние процессов детоксикации и обезвреживания липидных гидропероксидов в сетчатке и зрительном нерве в условиях экспериментальной глаукомы Таврический медико-биологический вестник |
| description |
Робота була виконана на кролях з модельованою глаукомою.Визначали активнicть ферментiв глутатiонпероксидази та глутатiон-S-трансферази в тканинах сiткiвки i зорового нерва в динамiцi розвитку глаукомного процесу. Отриманi результати свiдчать про зниження активностi ферментiв глутатiонпероксидази та глутатiон-S-трансферази в тканинах сiткiвки та зорового нерва ока. |
| format |
Article |
| author |
Сердюк, В.Н. |
| author_facet |
Сердюк, В.Н. |
| author_sort |
Сердюк, В.Н. |
| title |
Состояние процессов детоксикации и обезвреживания липидных гидропероксидов в сетчатке и зрительном нерве в условиях экспериментальной глаукомы |
| title_short |
Состояние процессов детоксикации и обезвреживания липидных гидропероксидов в сетчатке и зрительном нерве в условиях экспериментальной глаукомы |
| title_full |
Состояние процессов детоксикации и обезвреживания липидных гидропероксидов в сетчатке и зрительном нерве в условиях экспериментальной глаукомы |
| title_fullStr |
Состояние процессов детоксикации и обезвреживания липидных гидропероксидов в сетчатке и зрительном нерве в условиях экспериментальной глаукомы |
| title_full_unstemmed |
Состояние процессов детоксикации и обезвреживания липидных гидропероксидов в сетчатке и зрительном нерве в условиях экспериментальной глаукомы |
| title_sort |
состояние процессов детоксикации и обезвреживания липидных гидропероксидов в сетчатке и зрительном нерве в условиях экспериментальной глаукомы |
| publisher |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України |
| publishDate |
2010 |
| topic_facet |
Оригинальные статьи |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/25637 |
| citation_txt |
Состояние процессов детоксикации и обезвреживания липидных гидропероксидов в сетчатке и зрительном нерве в условиях экспериментальной глаукомы / В.Н. Сердюк // Таврический медико-биологический вестник. — 2010. — Т. 13, № 4 (52). — С. 172-175. — Бібліогр.: 22 назв. — рос. |
| series |
Таврический медико-биологический вестник |
| work_keys_str_mv |
AT serdûkvn sostoânieprocessovdetoksikaciiiobezvreživaniâlipidnyhgidroperoksidovvsetčatkeizritelʹnomnervevusloviâhéksperimentalʹnojglaukomy |
| first_indexed |
2025-07-03T05:09:44Z |
| last_indexed |
2025-07-03T05:09:44Z |
| _version_ |
1836601190744326144 |
| fulltext |
172
ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2010, том 13, № 4 (52)
УДК 617.7-007.681:577.19-07
© В. Н. Сердюк, 2010.
СОСТОЯНИЕ ПРОЦЕССОВ ДЕТОКСИКАЦИИ И
ОБЕЗВРЕЖИВАНИЯ ЛИПИДНЫХ ГИДРОПЕРОКСИДОВ В
СЕТЧАТКЕ И ЗРИТЕЛЬНОМ НЕРВЕ В УСЛОВИЯХ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ГЛАУКОМЫ
В. Н. Сердюк
Областная клиническая офтальмологическая больница (директор – к.м.н. Сердюк В.Н.),
г. Днепропетровск.
CONDITION OF PROCESSES DETOXICATION AND NEUTRALIZATIONS OF LIPID HYDROPEROXIDES IN THE
RETINAAND THE OPTIC NERVE IN THE CONDITIONS OF THE EXPERIMENTAL GLAUCOMA
V. N. Serdyuk
SUMMARY
The work was on the rebits which one has been modelated glaukoma.We estimated the activity of
ferments in the eye tissue and dynamics of glaukoma prosess The results turned out are indicatived of decline
in activity of ferments glutationperoxydasa and glutation-S-transferasa in the retina and optic nerve tissue
СТАН ПРОЦЕСІВ ДЕТОКСИКАЦІЇ ТА ЗНЕШКОДЖЕННЯ ЛІПІДНИХ ГІДРОПЕРОКСИДІВ У СІТКІВКИ ТА
ЗОРОВОМУ НЕРВІ В УМОВАХ ЄКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЇ ГЛАУКОМИ
В. М. Сердюк
РЕЗЮМЕ
Робота була виконана на кролях з модельованою глаукомою.Визначали активнicть ферментiв
глутатiонпероксидази та глутатiон-S-трансферази в тканинах сiткiвки i зорового нерва в динамiцi
розвитку глаукомного процесу. Отриманi результати свiдчать про зниження активностi ферментiв
глутатiонпероксидази та глутатiон-S-трансферази в тканинах сiткiвки та зорового нерва ока.
Ключевые слова: процессы детоксикации, липидные гидропероксиды, экспериментальная глаукома.
Несмотря на прогресс современной медицины,
совершенствование методов диагностики и техники
оперативного вмешательства, внедрение новых тех-
нологий и высококачественных лекарственных пре-
паратов, глаукома по-прежнему является «непредс-
казуемой» патологией, которая всегда содержит риск
неблагоприятного исхода, отражающегося не только
на качестве жизни пациента, но и его состоянии,
вплоть до полной инвалидизации [1,9,17].
Поэтому изучение этой патологии, серьезно на-
рушающей зрительные функции, и, следовательно,
физическую и социальную адаптацию, внедрение
технологий, позволяющих проводить прогнозирова-
ние течения заболевания, развитие осложнений, па-
тогенетическую терапию и профилактику прогрес-
сирования процесса является одной из актуальных
проблем современной офтальмологии
[2,3,7,10,15,20,22].
Результаты многочисленных исследований при-
вели к значительному прогрессу в представлениях о
причинах развития первичной глаукомы, однако мно-
гие ключевые моменты в этиологии и патогенезе это-
го заболевания и сегодня еще изучены недостаточно
[11,12,13,18].
Целый ряд авторов указывает на роль старения,
как пускового фактора патологических процессов,
развивающихся в зрительном анализаторе. Исследо-
вания последних лет показали, что формирование
метаболического благополучия обуславливает пре-
валирование анаболических процессов над катабо-
лическими, характерными для инволютивных изме-
нений. То есть, в основе развития процессов старе-
ния, прежде всего, лежит метаболическая дисфунк-
ция, в любом из ее проявлений. Однако современная
клиническая концепция развития первичной глауко-
мы как проблемы метаболической дезадаптации
представляется сложной и малоизученной
[14,16,19,21].
В ряде исследований было установлено увели-
чение количества первичных, вторичных и конечных
продуктов перекисного окисления липидов в тканях
дренажной системы глаз больных глаукомой по мере
173
О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И
развития заболевания. Было высказано также пред-
положение об участии процесса ПОЛ в развитии ди-
строфических изменений в тканях дренажной систе-
мы глаз больных открытоугольной глаукомой. Тем
не менее, к настоящему моменту фактов, для того,
чтобы рассматривать перекисное окисление липи-
дов в качестве первичного пускового механизма раз-
вития глаукомы недостаточно.
Цель настоящей работы заключалась в изучении
состояния процессов детоксикации и обезврежива-
нии липидных гидропероксидов в условиях экспери-
ментальной глаукомы.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Экспериментальные исследования проводились
на 32 кроликах (массой 2,5 – 3,2 кг).
При проведении эксперимента соблюдались все
рекомендации относительно исследований на живот-
ных, принятые международным сообществом при
изучении зрения и офтальмологических изысканий.
Экспериментальные кролики были поделены на
4 группы: контроль, 1 срок (3 недели), 2 срок (6 не-
дель) и 3 срок (10 недель) исследования.
В контрольной группе находилось 9 животных,
над которыми не производились какие-либо экспе-
рименты. В трех экспериментальных группах было
по 8, 7 и 8 кроликов в каждой, соответственно.
Все животные исследовались посредством био-
микроскопии на щелевой лампе, как при отборе экс-
периментальных животных (исключающем анома-
лии), так и для наблюдений в процессе эксперимен-
та. Все животные перед экспериментом и в ходе экс-
перимента подвергались измерению внутриглазно-
го давления. Животные подвергались общей анесте-
зии путем введения кетамина 50 мг/кг, местно при-
меняли глазные капли 0,5 % раствор прокаина гидро-
хлорида, инстиллируемые в конъюнктивальный ме-
шок за 1 минуту до инъекции.
В переднюю камеру глаза все животные полу-
чали инъекции раствора гиалуроната, перед этим иг-
лой в районе лимба отбиралось 0,15 мл камерной
влаги, которая использовалась для биохимических
исследований. Инъекции производили в правый глаз,
а в левый глаз, служивший относительным контро-
лем, вводили эквивалентное количество растворите-
ля (сбалансированный солевой раствор), на котором
готовился раствор гиалуроната.
Немедленно после инъекции кролики проверя-
лись путем биомикроскопии для оценки травмы, воз-
можно вызываемой в процессе инъекции.
Тонометрия производилась через каждые несколь-
ко часов.
В конце эксперимента все кролики были забиты
с помощью летальной дозы пентобарбитола натрия
(100 мг на кг, вводимого в маргинальную ушную вену).
В тканях изолированной сетчатки и зрительного нерва
производили определение активности ферментов глу-
татион – S – трансферазы и глутатионпероксидазы.
Определение активности глутатион – S –
трансферазы.
Принцип метода определения активности глута-
тион – S – трансферазы основан на регистрации оп-
тической плотности раствора, зависящей от количе-
ства образуемого конъюгированного глутатиона в
результате взаимодействия его с 1- хлор- 2, 4-динит-
робензолом (ХДНБ). Увеличение концентрации конъ-
югированного глутатиона в инкубационном раство-
ре вызывает повышение оптической плотности ра-
створа в ультрафиолетовой области спектра [8].
Ход определения. Активность глутатион – S –
трансферазы определяли следующим образом: сме-
шивали непосредственно в опытной микрокювете 0,2
мл субстратно-буферной смеси, содержащей 1 мМ
восстановленного глутатиона, 1 мМ 1-хлор-4-динит-
робензола, 100 мМ К-фосфатный буфер, pH 6,5 и 0,2
мл исследуемой ткани. В одной из контрольных про-
бирок смешивали только 0,2 мл 100 мМ К- фосфат-
ного буфера и 0,2 мл исследуемой ткани, а в другой
0,2 мл 10 мМ К- фосфатного буфера. При необходи-
мости экстракт исследуемой ткани разводили 10 мМ
К- фосфатным буфером. Тотчас перемешивали и
измеряли оптическую плотность полученных раство-
ров, используя 1-см термостатируемые кюветы (37
°С) на приборе “ Спекол – 210 ” при длине волны 360
нм, каждые 60 сек. в течение 10-15 мин. Коэффици-
ент вариаций 5%. Активность фермента выражали в
нкат/г ткани.
Определение глутатионпероксидазы.
Принцип определения. Активность глутатионпе-
роксидазы определяли спектрофотометрически по
скорости образования окисленного глутатиона с помо-
щью сопряженной реакции с НАДФН-зависимым фер-
ментом глутатионредуктазой, регистрируя изменение
оптической плотности при окислении НАДФН [4].
Ход определения.
Для определения в пробирку вносили 0,1 мл ра-
створа, содержащего в 0,1 М К-фосфатного буфера
(рН 7,5) 2 мМ ЭДТА и 10 мМ восстановленного глу-
татиона и 0,1 мл материала для исследования. Через 3
мин инкубации при 25?С вносили 0,01 мл 40 мМ гид-
роперекиси трет-бутила. Спустя 5 мин в реакцион-
ную смесь добавляли 3,84 мл 0,5 М трис-НС1 буфера
(рН 7,7) с 1 мМ ЭДТА. 2 мл полученного раствора
сразу после этого вносили в кювету и добавляли 0,05
мл 3,5 мМ НАДФН и 0,02 мл глутатионредуктазы (0,06
ед.). Быстро перемешивали и определяли изменение
оптической плотности при 340 нм в течение 1 мин на
спектрофотометре «Спекол-210». Коэффициент ва-
риации 1,8%. Активность фермента выражали в
мккат/г ткани. Данные обрабатывались с помощью
соответствующих методов статистического анализа
[5,6].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Данные, относительно активности ферментов
тиолового обмена и детоксикации в сетчатке глаз
174
ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2010, том 13, № 4 (52)
кроликов при развитии экспериментальной глауко- мы представлены в таблице 1 и на диаграмме (рис.1).
Таблица 1.
Активность глутатионпероксидазы и глутатион-S-трансферазы в сетчатке и зрительном нерве при
развитии экспериментальной глаукомы
Условия экспериментаИсследуемый показатель Статистич.
показатель
Норма
1 срок 2 срок 3 срок
Глутатионпероксидаза
(мккат/г ткани)
n
M
m
p
%
9
521,11
6,61
-
100
8
490,00
6,27
>0,05
94,0
7
465,71
6,18
<0,01
89,4
8
423,75
3,55
<0,00001
81,3
Глутатион-S-трансфераза
(нкат/г ткани)
n
M
m
p
%
9
524,44
7,75
-
100
8
485,00
6,88
<0,05
92,5
7
427,14
5,85
<0,0001
81,4
8
400,00
7,68
<0,00001
76,3
Примечание: р- уровень значимости различий данных по отношению к норме,
рассчитанный с помощью t – теста для независимых выборок.
Рис. 1. Относительные изменения активности глутатионпероксидазы и глутатион-S-трансферазы в
сетчатке и зрительном нерве при развитии экспериментальной глаукомы
(в % по отношению к норме)
0
2 0
4 0
6 0
8 0
1 0 0
1 2 0
Г л у т а т и о н п е р ок с и д а за Г л у т а т и о н -S -т р а н с ф е р а за
%
н о р м а 1 с р о к 2 с р о к 3 с р ок
Исследуя активность аниоксидантного фермен-
та тиолового обмена – глутатионпероксидазы, мож-
но отметить ее существенное понижение при разви-
тии глаукоматозного процесса. В 1 срок активность
фермента снизилась до 490,00±6,27 (94%), по сравне-
нию с нормой – 521,11±6,61. Однако в этот период
развития глаукоматозного процесса различия в ак-
тивности изучаемого фермента по отношению к нор-
ме статистически не достоверны. По мере развития
экспериментальной глаукомы, отмечается дальней-
шее понижение активности глутатионпероксидазы:
во 2 срок показатели активности снизились до
465,71±6,18, что составило 89,4% В последний срок
развития экспериментальной глаукомы (3 срок) ак-
тивность изучаемого фермента уменьшилась до
423,75±3,55 (81,3%).
Активность глутатион-S-трансферазы в сетчатке
и зрительном нерве при развитии эксперименталь-
175
О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И
ной глаукомы также снижалась во все сроки наблю-
дения. Так в 1 срок развития экспериментальной гла-
укомы показатели активности фермента снизились
до 485,00±6,88, что составило 92,5% по отношению к
норме (524,44±7,75), при этом при этом степень дос-
товерности различий составляет р<0,05, во 2 срок
наблюдения активность глутатион-S-трансферазы
падает до 427,14±5,85 (81,4%), в 3 срок развития экс-
периментальной глаукомы отмечается дальнейшее
снижение активности изучаемого фермента и состав-
ляет - 400,00±7,68 (76,3%).
ВЫВОДЫ
В целом анализ результатов проведенных экспе-
риментальных исследований с использованием мо-
дели ПОУГ свидетельствует о заметном снижении
скорости процессов обезвреживания липидных гид-
ропероксидов, осуществляемых ферментом глктати-
онпероксидазой и еще более выраженным ингиби-
рованием глутатион-S-трансферазной реакции. В
последнем случае нарушается обезвреживание раз-
личных экзогенных токсических веществ посредством
связывания их молекул с глутатионом и образовани-
ем нетоксичных конъюгатов. Все это приводит к на-
коплению в сетчатке и зрительном нерве липидных
перекисей и токсических ингридиентов, которые
могут оказывать негативное влияние на структурно-
функциональные параметры нервных клеток при
развитии ПОУГ.
ЛИТЕРАТУРА
1. Волков В. В. Трехкомпонентная классификация
открыто-угольной глаукомы на основе представлений
о ее патогенезе // Глаукома. – 2004. - №1. – С. 57-67.
2. Егорова Т. Е. Простагландины в лечении глаукомы
// Клин. офтальмология. – 2004. – Т. 5. - №3. – С. 127-132.
3. Луценко Н. С. Гормонально-метаболические
нарушения при первичной открыто-угольной глау-
коме и патогенетическое обоснование их коррекции
в комплексном лечении: автореф. дис. Докт. мед.на-
ук : 14.01.18. – Одесса. – 2007. – 18 с.
4. Модель М. А. К определению активности глу-
татионпероксидазы // Вопр. мед. химии. – 1989, № 4.
– С. 132 – 133.
5. Наследов А. SPSS компьютерный анализ дан-
ных в психологии и социальных науках. // Спб.: Пи-
тер, 2005. – 416 с.
6. Новые методы биохимического анализа. // Изд.
Ленинградского универ. – 1991. – 395 с.
7. Agar A., Li S. Retinal ganglion cell line apoptosis
induced by hydrostatic pressure / Brain Res. – 2006. –
V. 1086. – P. 191-200.
8. Awashi Y. C., Dao D. D., Saneto R. P.
Interrelationship between anionic and cationic forms of
glutatione-S-transferases of human liver // Biochem. J.
1980.- 191. – p. 1 –10.
9. Boland M. V., Quigley H. A. Risk factors and open-
angle glaucoma: classifications and application / J
Glaucoma. – 2007. – V. 16. - № 4. – P. 406-418.
10.Cherghel D., Griffiths H. R., Hilton E. J. Systemic
reduction in glutathione levels occurs in patients with
primary open angle glaucoma / Invest. Ophthalmol. Vis.
Sci. – 2005. – V. 46. – P. 877-883.
11.Chidlow G., Wood J. P. M., Casson R. J.
Pharmacological neuroprotection for glaucoma / Drugs.
– 2007. – V. 67. - № 5. – P. 725-759.
12.Govindarajan B., B. Govindarrajan, J. Laird, R.
Sherman. Neuroprotection in glaucoma using calpain-1
inhibitors: regional differences in calpain-1 activity in
the trabecular meshwork, optic nerve and implications
for therapeutics / Neurol Disord Drug Target. – 2008. –
V. 7. - № w3. – P. 295-304.
13.Guo L., Salt T. E., Maass A. Assessment of
neuroprotective effects of glutamate modulation on
glaucoma related retinal ganglion cell apoptosis in vivo
/ Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. – 2006. – V. 47. – P. 626-
633.
14.Johnson T. V., Bull N. D., Hunt D. P. Local
mesenchymal stem cell transplantation confers
neuroprotection in experimental glaucoma / Invest
Ophthalmol. Vis. Sci. – 2009. – V. 20. – P. 356-359.
15.Kumar D. M., Agarwal N. Oxidative stress in
glaucoma: a burden of evidence / J Glaucoma. – 2007. – V.
16. – P. 334-343.
16.Moraczewski A. L., Lee R. K., Palmberg P. F. et al.
Outcomes of treatment of neovascular glaucoma with
intravitreal bevacizumab / Br J Ophthalmol. – 2009. – V.
93. – P. 589-593.
17.Moreno M. C., Sande P., Marcos H. A. Effect of
glaucoma on the retinal glutamate/glutamine cycle
activity / FASEB J. – 2005. – V. 19. - № 9. - P. 1161-2.
18.Neufeld A. H. Pharmacologic neuroprotection
with an inhibitor of nitric oxide synthase for the treatment
of glaucoma / Brain res. Bull. – 2004. – V. 62. – P. 455-459.
19.Pache M., Flammer J. A sick eye in a sick body?
Systemic findings in patients with primary open-angle
glaucoma / Surv. Ophthalmol. – 2006. – V. 51. - № w3. –
P. 179-212.
20.Roh Y., Moon C., Kim S. Glutathione depletion
induces differential apoptosis in cells of mouse retina, in
vivo. // Neuroscience Let. – 2007. – Vol. 417 (3). – P. 266 – 270.
21.Schober M. S., G. C. Childlow et al. Bioenergetic-
based neuroprotection and glaucoma / Clin. & Exp.
Ophthalmol. – 2008. – V. 36. - № 4. – P. 377-385.
22.Weber A. J., C. D. Harman, S. Viswanathan. Effects
of optic nerve injury, glaucoma, and neuroprotection
on the survival, structure, and function of ganglion cells
in the mammalian retina / J Physiol. – 2008. – V. 18. – P.
4393-4400.
|