Розробка тест-системи для виявлення мутації V617F гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання

Мутація V617F гена jak2 є важливим діагностичним критерієм при хронічних мієлопроліферативних захворюваннях. Запропоновано тест-систему для виявлення мутації за допомогою методу зворотно-транскриптазної полімеразної ланцюгової реакції та прямого сиквенування отриманих ампліфікатів....

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	2009
Hauptverfasser:	Дибков, М.В., Гартовська, І.Р., Телегеєв, Г.Д., Малюта, С.С.
Format:	Artikel
Sprache:	Ukrainian
Veröffentlicht:	Видавничий дім "Академперіодика" НАН України 2009
Schriftenreihe:	Наука та інновації
Schlagworte:	Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України
Online Zugang:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/28068
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Розробка тест-системи для виявлення мутації V617F гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання / М.В. Дибков, І.Р. Гартовська, Г.Д. Телегеєв, С.С. Малюта // Наука та інновації. — 2009. — Т. 5, № 6. — С. 59-63. — Бібліогр.: 14 назв. — укр.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-28068
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-280682017-02-24T18:52:40Z Розробка тест-системи для виявлення мутації V617F гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання Дибков, М.В. Гартовська, І.Р. Телегеєв, Г.Д. Малюта, С.С. Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України Мутація V617F гена jak2 є важливим діагностичним критерієм при хронічних мієлопроліферативних захворюваннях. Запропоновано тест-систему для виявлення мутації за допомогою методу зворотно-транскриптазної полімеразної ланцюгової реакції та прямого сиквенування отриманих ампліфікатів. Мутация V617F гена jak2 является важным диагностическим критерием при хронических миелопролиферативных заболеваниях. Предложено тест-систему для выявления мутации с помощью метода обратно-транскриптазной полимеразной цепной реакции и прямого сиквенирования полученных амплификатов. V617F mutation of jak2 gene is an important diagnostic criterion for chronic myeloproliferative disorders. The test system for detection of the mutation by using the method of reverse transcription polymerase chain reaction and direct sequencing of PCR products was proposed. 2009 Article Розробка тест-системи для виявлення мутації V617F гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання / М.В. Дибков, І.Р. Гартовська, Г.Д. Телегеєв, С.С. Малюта // Наука та інновації. — 2009. — Т. 5, № 6. — С. 59-63. — Бібліогр.: 14 назв. — укр. 1815-2066 DOI: doi.org/10.15407/scin5.06.059 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/28068 uk Наука та інновації Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Ukrainian
topic	Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України
spellingShingle	Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України Дибков, М.В. Гартовська, І.Р. Телегеєв, Г.Д. Малюта, С.С. Розробка тест-системи для виявлення мутації V617F гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання Наука та інновації
description	Мутація V617F гена jak2 є важливим діагностичним критерієм при хронічних мієлопроліферативних захворюваннях. Запропоновано тест-систему для виявлення мутації за допомогою методу зворотно-транскриптазної полімеразної ланцюгової реакції та прямого сиквенування отриманих ампліфікатів.
format	Article
author	Дибков, М.В. Гартовська, І.Р. Телегеєв, Г.Д. Малюта, С.С.
author_facet	Дибков, М.В. Гартовська, І.Р. Телегеєв, Г.Д. Малюта, С.С.
author_sort	Дибков, М.В.
title	Розробка тест-системи для виявлення мутації V617F гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання
title_short	Розробка тест-системи для виявлення мутації V617F гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання
title_full	Розробка тест-системи для виявлення мутації V617F гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання
title_fullStr	Розробка тест-системи для виявлення мутації V617F гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання
title_full_unstemmed	Розробка тест-системи для виявлення мутації V617F гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання
title_sort	розробка тест-системи для виявлення мутації v617f гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання
publisher	Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
publishDate	2009
topic_facet	Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/28068
citation_txt	Розробка тест-системи для виявлення мутації V617F гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання / М.В. Дибков, І.Р. Гартовська, Г.Д. Телегеєв, С.С. Малюта // Наука та інновації. — 2009. — Т. 5, № 6. — С. 59-63. — Бібліогр.: 14 назв. — укр.
series	Наука та інновації
work_keys_str_mv	AT dibkovmv rozrobkatestsistemidlâviâvlennâmutacíív617fgenajak2uhvorihnahroníčnímíêloprolíferativnízahvorûvannâ AT gartovsʹkaír rozrobkatestsistemidlâviâvlennâmutacíív617fgenajak2uhvorihnahroníčnímíêloprolíferativnízahvorûvannâ AT telegeêvgd rozrobkatestsistemidlâviâvlennâmutacíív617fgenajak2uhvorihnahroníčnímíêloprolíferativnízahvorûvannâ AT malûtass rozrobkatestsistemidlâviâvlennâmutacíív617fgenajak2uhvorihnahroníčnímíêloprolíferativnízahvorûvannâ
first_indexed	2025-07-03T08:07:18Z
last_indexed	2025-07-03T08:07:18Z
_version_	1836612361872474112
fulltext	59 Наука та інновації. 2009. Т. 5. № 6. С. 59—63. © М.В. ДИБКОВ, І.Р. ГАРТОВСЬКА, Г.Д. ТЕЛЕГЕЄВ, С.С. МАЛЮТА, 2009 М.В. Дибков 1, І.Р. Гартовська 2, Г.Д. Телегеєв 1, С.С. Малюта 1 1 Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Київ 2 Гематологічне відділення Київського обласного онкодиспансеру МОЗ України, Київ РОЗРОБКА ТЕСТ-СИСТЕМИ ДЛЯ ВИЯВЛЕННЯ МУТАЦІЇ V617F ГЕНА JAK2 У ХВОРИХ НА ХРОНІЧНІ МІЄЛОПРОЛІФЕРАТИВНІ ЗАХВОРЮВАННЯ Мутація V617F гена jak2 є важливим діагностичним критерієм при хронічних мієлопроліферативних захворюван- нях. Запропоновано тест-систему для виявлення мутації за допомогою методу зворотно-транскриптазної поліме- разної ланцюгової реакції та прямого сиквенування отриманих ампліфікатів. К л ю ч о в і с л о в а: V617F, JAK2, мієлопроліферативні захворювання, діагностика, ПЛР. З кожним роком молекулярно-генетичні ме- тоди все ширше впроваджуються в клінічну практику як для вдосконалення діагностичних критеріїв, так і для контролю ефективності лі- кування. І хоча молекулярно-генетичні тести в більшості випадків не самодостатні, проте вони значно прискорюють установлення діа- гнозу та підвищують його достовірність. Хронічні мієлопроліферативні захворюван- ня (ХМПЗ) — гетерогенна група неопластич- них захворювань, які характеризуються мно- жинною гіперплазією гемопоетичних клітин кісткового мозку. До ХМПЗ у різний час від- носили різні захворювання. Так, у 1951 р. W. Da- meshek, який запропонував термін «мієлопролі- феративні захворювання» (МПЗ), відніс до них хронічну мієлоїдну лейкемію (ХМЛ), справжню поліцитемію (СП), есенціальну тром бо цитемію (ЕТ), ідіопатичний мієлофіброз (ІМФ) та ери- тролейкемію [1]. Згідно з чинною класифікацією Всесвітньої організації охорони здоров’я до хронічних міє- лопроліферативних захворювань відносяться хронічна мієлоїдна лейкемія (ХМЛ), хронічна нейтрофільна лейкемія, хронічна еозинофіль- на лейкемія, справжня поліцитемія, есенціаль- на тромбо цитемія, ідіопатичний мієлофіброз та некласифіковані хронічні мієлопроліфера- тивні захворювання. Донедавна лише для ХМЛ було описано чіт кий цитологічний маркер — Ph-хромосому [t (9; 22)(q34; q11)]. Описана транслокація на молекулярному рівні призводить до утворен- ня химерного гена bcr/abl, виявлення якого за допомогою ЗТ-ПЛР значно спростило діаг- нос тику цього захворювання. Оскільки для решти ХМПЗ донедавна мо- ле кулярно-генетичних маркерів не було опи- сано, то їх називали Ph-негативними хроніч- ними мієлопроліферативними захворювання- ми. Але в 2005 р. майже одночасно вийшли роботи [3—7], де було описано мутацію в чо- тирнадцятому екзоні гена jak2, який локалізо- вано на дев’ятій хромосомі, що призводила до заміни G → T і, відповідно, на рівні білка — ва- ліну на фенілаланін у позиції 617. Мутація 60 Наука та інновації. № 6, 2009 Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України V617F виявляється у 80—95 % хворих на справ- жню поліцитемію, приблизно у 50 % хворих на ессенціальну тромбоцитемію, ідіопатичний міє- лофіброз та у 20 % хворих на хронічну нейтро- фільну лейкемію. Окрім мутації V617F опи- сано ряд змін в 12-й екзоні гена jak2 (K539L, H538QK539L, F537–K539delinsL тощо) [8]. Ці зміни виявляють у 5 % хворих на справжню поліцитемію. Вважається, що на функціональному рівні мутації в псевдокіназному домені призводять до втрати регуляції та конститутивної актива- ції JAK2 тирозинкінази (подібно до активації кінази ABL в складі химерного білка BCR/ ABL). Внаслідок цього відбувається втрата ре- гуляції JAK-STAT сигнального шляху, що при- зводить до збільшення кількості еритроцитів, тромбоцитів та гранулоцитів. Локалізацію описаних мутацій наведено на рис. 1. Виходячи з отриманих даних у 2008 р. було за- пропоновано ревізію класифікації та діаг нос тич- них критеріїв для мієлопроліферативних захво- рювань [9—10]. І хоча мутація V617F не є специ- фічною для якогось одного захворювання, її було включено як важливий діаг ностичний критерій. Так у разі її виявлення виключають вторинну по- ліцитемію, реактивний тромбоцитоз чи вторин- ний фіброз кісткового мозку (secondary bone mar- row fibrosis) то що. На сьогодні в Україні такі тест- системи не розробляються. Дана робота присвячена питанню створен- ня розробки тест-систем для виявлення мута- ції V617F за допомогою ПЛР та прямого сик- венування. МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ Для виявлення мутації нами використову- валися зразки крові хворих (за їх згодою), що проходили лікування в гематологічних кліні- ках м. Києва. РНК виділяли за методом [11] або за допомогою комерційних наборів для ви- ділення РНК фірм Qіagen та MO BIO La bo ra- to ries Inc. Для проведення зворотної транск- рипції використовували 1x буфер для зворот- ної транскиптази, 1 мМ dNTP, 0,1 мкг прайме- ра Random Hexamer Primer, 300 од зворотної транскиптази RevertAid™ M-MuLV Reverse Tran- scriptase (Fermentas), 20 од РНАзіну та 1—3 мкг РНК. Реакцію проводили при температурі 42 °С протягом 1 год і зупиняли протягом 10 хв про- гріванням при 70 °С. Для проведення ПЛР відбирали 2 мкл реакційної суміші. Полімераз- ну ланцюгову реакцію проводили в об’ємі 30 мкл продовж 30 циклів (94 °С — 35 с, 55 °С — 35 с, 72 °С — 45 с.) з використанням 10 pmol прай- мерів J1F (5'–CACCAACATTACAGAGGCCT AC—3') та J1R (5'–GCCAGGATCACTAAGT TTGATG—3'). Для проведення другого етапу ПЛР (в разі недостатньої кількості ампліфі- кату для проведення сиквенування) відбирали по 0,5 мкл реакційної суміші і проводили син- тез із використанням праймерів J2F (5'—CGG TCAACTGCATGAAACAG—3') та J2R 5'–TTG GCACATACATTCCCATG—3'). Для позитив- ного контролю використовували праймери для виявлення β-актину (5'–GCTCGTCGTCGA CAACGGCTC–3' та 5'–CAAACATGATCTGG GTCATCTTCTC—3') (Invitrogen, США) та/ або 18s rRNA (5'–CGGCTACCACATCCA AG GAA—3' та 5'–GCTGGAATTACCGCGGCT— 3'). Продукти ампліфікації аналізували в 2%- му агарозному гелі. Отримані продукти ПЛР були очищені та сик- веновані з використанням праймерів J2F, J2R. Отримані послідовності були проана лізовані за допомогою програм BioEdit та BLAST. Рис. 1. Схема доменної організації білка JAK2 та локаціза- ція основних мутацій, що виявляються у пацієнтів з хро- нічними мієлопроліферативними захворюваннями. До- мени: FERM — FERM гомологічний (F — з білком 4.1, E — з езріном, R — з радіксином, M — з моезином); SH2 — SRC 2 гомологічний. Стрілками позначено локалізацію мутацій 61Наука та інновації. № 6, 2009 Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України РЕЗУЛЬТАТИ ТА ОБГОВОРЕННЯ В результаті проведених досліджень для вияв- лення мутації V617F ми запропонували викорис- товувати зворотно-транскриптазну полі меразну ланцюгову реакцію (ЗТ-ПЛР) з пода ль шим пря- мим сиквенуванням отриманих ам пліфікатів. Хоча виявлення мутації можливе і без проведен- ня зворотної транскрипції з використанням ПЛР ДНК, вважаємо за доцільне використання саме ЗТ-ПЛР, оскільки отриману на першому етапі аналізу кДНК можна також використовувати для виявлення інших можливих генетичних змін (на- приклад, злитого гена bcr/abl [12]), тобто даний підхід уніфікує початкові процедури досліджен- ня зразків крові. РНК виділяли переважно за до- помогою методу [11], однак використання комер- ційних наборів для виділення РНК не призводи- ло до будь-яких проблем при проведенні аналізів. Комплементарну ДНК синтезували з викорис- танням затравки розсіяного праймеру d(NTP)6, що дає можливість виявляти не тільки мутації в гені jak2, а й інші генетичні аномалії, насамперед генетичні зміни гена bcr/abl. Перший етап ПЛР, який проводили з вико- ристанням праймерів J1F та J1R зазвичай не дає кількості продукту, необхідної для електрофоре- тичного аналізу та подальшого сиквенування ампліфікатів. Тому проводили дру гий етап ПЛР використовуючи аліквоту ПЛР-про дукту з пер- шого етапу та внутрішні праймери J2F та J2R. Окрім збільшення кількості продукту викорис- тання внутрішніх праймерів забезпечує додат- кову специфічність діагностики. Оскільки прай- мери підібрано на різні екзони гена jak2 і ген має протяжні інтрони, то домішки ДНК не можуть впливати на проведення ЗТ-ПЛР. Сиквенування ампліфікатів проводили на ав- томатичному сиквенаторі з використанням прай- мерів (роздільно) J2F та J2R. Сиквенування обох ланцюгів ампліфікату слугує для високої надій- ності виявлення мутації та виключення випадко- вих артефактів при встановленні послідовності. Мутація V617F, яка, як згадувалося вище, призводить до заміни валін та фенілаланін, є наслідком точкової мутації G→T, тобто зміни кодону GTC на TTC. Оскільки кількість моле- кул із мутацією та без неї може змінюватися, то Рис. 2. Електрофореграма (а) та фрагмент денситограми сиквенсу послідовності (б — прямого ланцюга, в — зворотного ланцюга) продукту ПЛР, що був отриманий при дослідженні крові хворого М. а: 1 — продукт ПЛР, який отримано з викорис- танням праймерів J1F та J1R; 2 — продукт ПЛР, який отримано з використанням праймерів J2F та J2R; 3 — маркер молекулярних мас pUC19/HinfI. б, в: здвоєні нуклеотиди G/T та C/A вказують на наявність мутації V617F б в А T G T G T C T А G A C A C A T A 62 Наука та інновації. № 6, 2009 Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України при аналізі послідовності ампліфікатів необ- хідно обов’язково проводити візуальний ана ліз вихідних даних сиквенатора (за допомогою пе- редвстановленого програмного забезпечення чи безкоштовних програм на кшталт BioEdit) або знижувати в програмному забезпеченні поріг виявлення нуклеотидів до 5—10 %. На рис. 2 представлено електрофореграму про- дуктів ПЛР та результати сиквенування амплі- фікатів хворого M., 1942 року народження, який хворіє на справжню поліцитемію від 1999 р. Хворий отримував симптоматичну та специфіч- ну терапію. Як видно з рисунка, на денситограмі спостерігаються два піки, що відповідають ну- клеотидам G і T в позиції 2343 (нумерація згідно з послідовністю мРНК jak2 NM_004972.2 Homo sapiens Janus kinase 2), тобто виявляється як нор- мальний GTC-кодон, так і мутантний TTC. Ана- логічна картина спостерігається в послідовнос- ті нуклеотидів у зворотних ланцюгах амп лі- фіка ту (виявлено за міну C→A в позиції 2343), тоб то було виявлено мутацію V617F, що є мо- леку лярним підтвердженням поставленого ді- агнозу «справ ж ня поліцитемія». Хоча, як було зазначено вище, мутація V617F виявляється переважно у хворих на Ph-нега- тив ні хронічні мієлопроліферативні захворю- вання, траплялися випадки одночасного вияв- лення мутації V617F та злитого гена bcr/abl. Так, при аналізі крові хворої на ХМЛ пацієнт- ки Г., 1938 року народження, було виявлено як мутацію в гені jak2, так і підтверджено наяв- ність злитого гена bcr/abl за допомогою зво- рот но-транскриптазної полімеразної ланцю- гової реакції (згідно з [12]). Природа таких випадків не з’ясована. Мож- ливими вважаються дві теорії. За першою при- чиною одночасного виявлення описаних змін є присутність двох різних клонів, кожен з яких несе одну мутацію [13]. Друга теорія припус- кає, що обидві мутації мають місце в одному клоні, причому мутація в гені jak2 передує утворенню химерного гена bcr/abl [14]. Однак обидва припущення вимагають подальших до- сліджень. Наведені результати свідчать про ефектив- ність наведеного протоколу виявлення мута- ції V617F за допомогою ЗТ-ПЛР та прямого сиквенування для використання в мо ле ку ляр- но-генетичній диференційній діагностиці хро- нічних мієлопроліферативних захворювань. Да ну систему можна рекомендувати до впро- вадження в профільних закладах системи охо- рони здоров’я, насамперед в гематологічних відділеннях обласних клінічних лікарень та ме дико-генетичних лабораторіях. ЛІТЕРАТУРА 1. Dameshek W. Some speculations on the myeloproliferative syndromes // Blood. — 1951.–V. 6.– P. 372—375. 2. Vardiman J.W., Harris N.L., Brunning R.D. The World He- alth Organization (WHO) classification of the mye loid neo plasms // Blood. — 2002. — V. 100. — P. 2292—2302. 3. Baxter E.J., Scott L.M., Campbell P.J. et al. Acquired mu- tation of the tyrosine kinase JAK2 in human myelopro- liferative disorders // Lancet 2005. — V. 365, N 9464. — P. 1054—1061. 4. Kralovics R., Passamonti F., Buser A.S. et al. A gain-of-func- tion mutation of JAK2 in myeloproliferative disorders // N Engl J Med 2005. — V. 352, N 17. — P. 1779—1790. 5. Levine R.L., Wadleigh M., Cools J. et al. Activating muta- tion in the tyrosine kinase JAK2 in polycythemia vera, essential thrombocythemia, and myeloid metaplasia with myelofibrosis // Cancer Cell 2005. — V. 7, N 4. — P. 387— 397. 6. Zhao R., Xing S., Li Z. et al. Identification of an acquired JAK2 mutation in polycythemia vera // J Biol Chem. 2005. — V. 280, N 24. — P. 22788—22792. 7. James C., Ugo V., Le Couedic J.P. et al. A unique clonal JAK2 mutation leading to constitutive signalling causes polycythaemia vera // Nature 2005. — V. 434. — P. 1144— 1148. 8. Scott L.M., Tong W., Levine R.L. JAK2 exon 12 mutations in polycythemia vera and idiopathic erythrocytosis // N Engl J Med. 2007. — V. 356, N 5. — P. 459—468. 9. Tefferi A., Vardiman J.W. Classification and diagnosis of myeloproliferative neoplasms: The 2008 World Health Organization criteria and point-of-care diagnostic algo- rithms // Leukemia 2008. — V. 22. — P. 14—22. 10. Spivak J.L., Silver R.T. The revised World Health Organi- zation diagnostic criteria for polycythemia vera, essential thrombocytosis, and primary myelofibrosis: an alternative proposal // Blood 2008. — V. 112, N 2. — P. 231—239. 11. Chomczynski P., Sacchi N. Single-step method of RNA iso lation by acid guanidinum thiocyanate-phenol-chlo- roform extraction // Analyt. Biochem. 1987. — V. 162. — P. 156—159. 63Наука та інновації. № 6, 2009 Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України 12. Телегеєв Г.Д., Дибков М.В., Божко М.В. та ін. Моніто- ринг хронічного мієлолейкозу за допомогою моле ку- лярно-біологічних методів (методичні рекомендації) // Республіканський центр науково-медичної інформа- ції. — Київ, 1997. — 20 с. 13. Hussein K., Bock O., Seegers A., Flasshove M. et al. Mye- lofibrosis evolving during imatinib treatment of a chron- ic myeloproliferative disease with coexisting BCR-ABL translocation and JAK2V617F mutation // Blood 2007. — V. 109, N 9. — P. 4106—4107. 14. Bocchia M., Vannucchi A.M., Gozzetti A. et al. Insights into JAK2–V617F mutation in CML // Lancet Oncol 2007. — V. 8. — P. 864—866. М.В. Дыбков, И.Р. Гартовская, Г.Д. Телегеев, С.С. Малюта РАЗРАБОТКА ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ МУТАЦИИ V617F ГЕНА JAK2 У БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКИМИ МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ Мутация V617F гена jak2 является важным диагности- ческим критерием при хронических миелопролифератив- ных заболеваниях. Предложено тест-систему для выявле- ния мутации с помощью метода обратно-транскриптазной полимеразной цепной реакции и прямого сик венирования полученых амплификатов. К л ю ч е в ы е с л о в а: V617F, JAK2, миелопролифера- тивные заболевания, диагностика, ПЛР. M.V. Dybkov, I.R. Gartovska, G.D. Telegeev, S.S. Maliuta DEVELOPMENT OF TEST SYSTEM FOR DETECTION OF V617F MUTATION OF JAK2 GENE IN PATIENTS WITH CHRONIC MYELOPROLIFERATIVE DISORDERS V617F mutation of jak2 gene is an important diagnostic criterion for chronic myeloproliferative disorders. The test- system for detection of the mutation by using the method of reverse transcription polymerase chain reaction and direct sequencing of PCR products was proposed. K e y w o r d s: V617F, JAK2, myeloproliferative disorders, diagnostics, PCR. Надійшла до редакції 17.04.09.

Розробка тест-системи для виявлення мутації V617F гена jak2 у хворих на хронічні мієлопроліферативні захворювання

Institution

Ähnliche Einträge