Вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу

Проводились биохимические, морфологические, морфометрические и иммунологические исследования на 144 крысах. Показано, что в результате стресса развивался эндотоксикоз, который приводил к дисбалансу окислительно-восстановительного статуса и возникновению патологии различной сложности на гистологическ...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	2012
Hauptverfasser:	Ігрунова, К.М., Ватліцов, Д.В., Павлюк, В.Д., Аніщук, М.Г.
Format:	Artikel
Sprache:	Ukrainian
Veröffentlicht:	Кримський науковий центр НАН України і МОН України 2012
Schriftenreihe:	Таврический медико-биологический вестник
Schlagworte:	Оригинальные статьи
Online Zugang:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/44795
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу / К.М. Ігрунова, Д.В. Ватліцов, В.Д. Павлюк, М.Г. Аніщук // Таврический медико-биологический вестник. — 2012. — Т. 15, № 1 (57). — С. 103-107. — Бібліогр.: 12 назв. — укр.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-44795
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-447952013-06-05T03:10:28Z Вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу Ігрунова, К.М. Ватліцов, Д.В. Павлюк, В.Д. Аніщук, М.Г. Оригинальные статьи Проводились биохимические, морфологические, морфометрические и иммунологические исследования на 144 крысах. Показано, что в результате стресса развивался эндотоксикоз, который приводил к дисбалансу окислительно-восстановительного статуса и возникновению патологии различной сложности на гистологическом уровне. Исследование индекса индукции апоптоза свидетельствует об активации адаптивных систем организма. Также было показано, что хронический стресс приводит к адаптации организма к стресу. Предложена методика, которая дает возможность выявить эндотоксикоз даже без внешних проявлений и определить степень его тяжести. Вышеуказанное дает возможность разрабатывать индивидуальные схемы коррекции. Endogenic intoxication is the most common clinical pathological conditions. Biochemical, morphological, morphometric and immunological methods were used. 144 rats were observed. Stress induced endotoxicosis development was shown, which leaded red-ox system, morphological structure and functional reserve of organism to disbalance. New method for revelation of endotoxicosis and selection of individual scheme of correction of disorders was proposed. 2012 Article Вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу / К.М. Ігрунова, Д.В. Ватліцов, В.Д. Павлюк, М.Г. Аніщук // Таврический медико-биологический вестник. — 2012. — Т. 15, № 1 (57). — С. 103-107. — Бібліогр.: 12 назв. — укр. 2070-8092 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/44795 616.127 uk Таврический медико-биологический вестник Кримський науковий центр НАН України і МОН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Ukrainian
topic	Оригинальные статьи Оригинальные статьи
spellingShingle	Оригинальные статьи Оригинальные статьи Ігрунова, К.М. Ватліцов, Д.В. Павлюк, В.Д. Аніщук, М.Г. Вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу Таврический медико-биологический вестник
description	Проводились биохимические, морфологические, морфометрические и иммунологические исследования на 144 крысах. Показано, что в результате стресса развивался эндотоксикоз, который приводил к дисбалансу окислительно-восстановительного статуса и возникновению патологии различной сложности на гистологическом уровне. Исследование индекса индукции апоптоза свидетельствует об активации адаптивных систем организма. Также было показано, что хронический стресс приводит к адаптации организма к стресу. Предложена методика, которая дает возможность выявить эндотоксикоз даже без внешних проявлений и определить степень его тяжести. Вышеуказанное дает возможность разрабатывать индивидуальные схемы коррекции.
format	Article
author	Ігрунова, К.М. Ватліцов, Д.В. Павлюк, В.Д. Аніщук, М.Г.
author_facet	Ігрунова, К.М. Ватліцов, Д.В. Павлюк, В.Д. Аніщук, М.Г.
author_sort	Ігрунова, К.М.
title	Вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу
title_short	Вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу
title_full	Вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу
title_fullStr	Вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу
title_full_unstemmed	Вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу
title_sort	вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу
publisher	Кримський науковий центр НАН України і МОН України
publishDate	2012
topic_facet	Оригинальные статьи
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/44795
citation_txt	Вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу / К.М. Ігрунова, Д.В. Ватліцов, В.Д. Павлюк, М.Г. Аніщук // Таврический медико-биологический вестник. — 2012. — Т. 15, № 1 (57). — С. 103-107. — Бібліогр.: 12 назв. — укр.
series	Таврический медико-биологический вестник
work_keys_str_mv	AT ígrunovakm vplivendotoksikozunamehanízmiadaptacíídostressu AT vatlícovdv vplivendotoksikozunamehanízmiadaptacíídostressu AT pavlûkvd vplivendotoksikozunamehanízmiadaptacíídostressu AT aníŝukmg vplivendotoksikozunamehanízmiadaptacíídostressu
first_indexed	2025-07-04T03:21:43Z
last_indexed	2025-07-04T03:21:43Z
_version_	1836684991719800832
fulltext	103 О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И УДК 616.127 © Коллектив авторов, 2012. ВПЛИВ ЕНДОТОКСИКОЗУ НА МЕХАНІЗМИ АДАПТАЦІЇ ДО СТРЕСУ К.М. Ігрунова, Д.В. Ватліцов, В.Д. Павлюк, М.Г. Аніщук Національна медична академія післядипломної освіти імені П.Л. Шупика; Центральна науково-дослідна лабораторія, м. Київ. AN INFLUENCE OF ENDOTOXICOSIS ON MECHANISMS OFADAPTATION TO STRESS K.N. Igrunova, D. V. Vatlitsov, V. D. Pavlyuk, M.G. Anischyuk SUMMARY Endogenic intoxication is the most common clinical pathological conditions. Biochemical, morphological, morphometric and immunological methods were used. 144 rats were observed. Stress induced endotoxicosis development was shown, which leaded red-ox system, morphological structure and functional reserve of organism to disbalance. New method for revelation of endotoxicosis and selection of individual scheme of correction of disorders was proposed. ВЛИЯНИЕ ЭНДОТОКСИКОЗА НА МЕХАНИЗМЫ АДАПТАЦИИ К СТРЕСУ К.Н. Игрунова, Д.В. Ватлицов, В.Д. Павлюк, М.Г. Анищук РЕЗЮМЕ Проводились биохимические, морфологические, морфометрические и иммунологические исследования на 144 крысах. Показано, что в результате стресса развивался эндотоксикоз, который приводил к дисбалансу окислительно-восстановительного статуса и возникновению патологии различной сложности на гистологическом уровне. Исследование индекса индукции апоптоза свидетельствует об активации адаптивных систем организма. Также было показано, что хронический стресс приводит к адаптации организма к стресу. Предложена методика, которая дает возможность выявить эндотоксикоз даже без внешних проявлений и определить степень его тяжести. Вышеуказанное дает возможность разрабатывать индивидуальные схемы коррекции. Ключові слова: стрес, ендотоксикоз, апоптоз, функціональний резерв клітин. Ендогенна інтоксикація (ЕІ) належить до найбільш поширених в клінічній практиці і спостері- гається при різноманітних етіологічно і патогенетич- но нетотожних станах [4, 6]. Ендотоксини, проникаючи в клітини через по- шкодження біологічних мембран, викликають пору- шення внутрішньоклітинного обміну, цитоліз, що веде до появи аутоантигенів, порушення розподілу і дисемінації цитолокалізованих речовин і появи пато- логічних метаболітів і їх гіперконцентрації [8]. При цьому патологічні процеси мають відобра- ження у морфологічній будові внутрішніх органів та зміні їх відносних морфологічних параметрів (дист- рофія, апоптоз та некроз та некробіоз). Якщо захисні системи організму в змозі знеш- коджувати ендогенні токсини, клінічної симптомати- ки може і не виникнути, хоча при будь-якому патоло- гічному стані може існувати прихований або транзи- торний ендотоксикоз. Окислювальний стрес є одним із універсальних індукторів апоптозу і пов’язаний з реактогенними метаболітами кисню, які накопичуються в клітинах при різноманітних впливах, особливо на фоні при- гнічення активності антиоксидантних систем [5]. По- казано, що різні захворювання супроводжуються дисбалансом метаболізму, з одного боку, і порушен- ням програми апоптозу, – з іншого [2]. Внаслідок дис- балансу про- і антиапоптогенних чинників спостері- гається порушення реалізації програми апоптозу, що призводить до патологічних змін органів і тканин [7]. Метою даного дослідження було вивчення зміни рівня деяких біохімічних, імунологічних показників крові щурів та змін у морфологічній будові органів «Тріади Сельє», які виникли під впливом ендотокси- козу, спричиненого різними типами стресу. МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ Стрес відтворювали на білих безпородних сам- цях щурів (n=144) вагою 200-250 гр. Тварини утриму- вались на стандартному раціоні віварію. Всі проце- дури проводились відповідно з міжнародними пра- вилами гуманного ставлення до тварин. Розподіл тварин по групах: І-а група Контроль ІІ-а група 14-денний хронічний стрес ІІІ-я група 14-денний хронічний стрес + го- стрий IV-а група 28-денний хронічний стрес V-а група 28-денний хронічний стрес + го- стрий VІ-а група Гострий стрес Виводили тварин з досліду шляхом декапітації, після чого проводили відбір крові на біохімічні та іму- 104 ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2012, том 15, № 1 (57) нологічні дослідження. Після цього проводилася аутопсія з послідуючим макроскопічним вивченням органокомплексу, забором матеріалу на мікроскопі- чне дослідження: шматочки органів фіксували у 10% розчині нейтрального формаліну протягом 24 годин, зрізи тканин фарбували за стандартними методика- ми гематоксилін-еозином. Результати заносили в ство- рену базу даних (файл М. Excel 2003)[1, 9]. Наявність ендотоксикозу була встановлена за кла- сичними біохімічними показниками рівня молекул середньої маси (МСМ) та кількості малонового диаль- дегіду (МДА), а також рівнем біохімічних метаболітів у крові. Рівень МСМ визначали скринінговим мето- дом, з урахуванням індексу розподілу (ІР), а розраху- нок кількості МДА за відповідною методикою [10]. Для визначення рівня апоптозу за анексиновим методом та вивченню мембранного потенціалу міто- хондрій виділяли мононуклеарні клітини крові (МНК) експериментальних тварин на градієнті щільності фікол-урографін (d=1,077). Для визначення індексу індукції апоптозу відбирали по 105 мононуклеарних клітин. У одну із пробірок додавали індуктор апопто- зу та інкубували на поживному середовищі при 37оС протягом 18 годин. Дослідження рівня апоптозу анексиновим мето- дом проводили на проточному цитометрі PAS (Partec, Німеччина), з використанням набору для визначен- ня апоптозу Annexin V-FITC Apoptosis detection Kit I (BD Bioscience Pharmingen, США); визначення мем- бранного потенціалу мітохондрій (ММП) проводили за загальноприйнятою методикою [12] з родаміном 123 («Fluka»). Дослідження рівня індексу індукції апоптозу (ІІА) мононуклеарних клітин (МНК) відбувалось в два ета- пи: перший - це дослідження рівня спонтанного апоп- тозу, другий – дослідження рівня індукованого апопто- зу. Дослідження спонтанного апоптозу дає змогу оці- нити вихідний стан організму тварин після імобілізацій- ного стресування. Таким чином, це дає змогу виявити внутрішні порушення, котрі не виявляються звичайни- ми методами, а саме визначити ступінь виснаження або функціонального резерву організму [3, 11]. Статистичну обробку результатів проводили за допомогою програми Statistica, використовували t- тест для незалежних варіацій та описову статистику. РЕЗУЛЬТАТИ ТА ЇХ ОБГОВОРЕННЯ Як біохімічний показник рівня ендотоксикозу визначали рівень МСМ у сироватці крові, також виз- начали рівень МДА та NO, як показники рівня ПОЛ. У даній роботі використовували вказаний вище по- казник для підтвердження наявності ендотоксикозу експериментальних тварин при моделюванні стресу. Моделювання хронічного, гострого та гострого на тлі хронічного стресу показало, що у тварин, яких піддавали тривалому хронічному імобілізаційному стресуванню протягом 28 днів, спостерігалося знач- не підвищення рівня МСМ, у той час як в групі яку піддавали стресуванню протягом 14 днів - спостері- галося зниження вказаних показників. Отримані дані свідчать про активації регуляторних систем організ- му в групі тварин, яких стресували протягом 14 днів. Вивчення впливу гострого стресу на формування ендогенної інтоксикації показало, що гострий стрес викликає різку активацію регуляторних систем, що призводить до зниження рівня ендотоксинів у крові. Але дослідження впливу гострого стресу на тлі хрон- ічного показало, що при короткотривалому 14-ден- ному хронічному стресі відбувалось виснаження організму і спостерігалось різке збільшення рівня МСМ. У той же час після тривалого, 28-денного хро- нічного стресування, спостерігалось зниження рівня МСМ нижче контрольних показників (Рис.1). Рис. 1. Вплив імобілізаційного стресу на рівень молекул середньої маси в сироватці крові експериментальних тварин у відсотках відносно контролю. 0 20 40 60 80 100 120 140 14 д іб 14 д іб+ ГС 28 д іб 28 д іб+ ГС ГС К онтр Гр упа % від ко нт ро лю Виходячи з того, що МСМ сприяють посилен- ню перекисного окислення ліпідів, доцільно було вивчити рівень МДА та нітритів у крові експери- ментальних тварин. Отримані результати свідчать 105 О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И про те, що ендогенна інтоксикація, яка розвинула- ся в результаті стресу, призводила до дисбалансу окисно-відновного статусу в групах, які піддавали- ся гострому стресу та гострому стресу на тлі хро- нічного, що свідчить про зменшення субстрату для окислювання і, відповідно, про виснаження пулу окислювання в організмі експериментальних тва- рин (Рис. 2). Рис. 2. Вплив імобілізаційного стресу на рівень малонового диальдегіду в сироватці крові експериментальних тварин у відсотках відносно контролю. 0 20 40 60 80 100 120 14 д іб 14 д іб+ГС 28 д іб 28 д іб+ ГС ГС К онтр Група % в ід ко нт ро лю Наступним етапом дослідження було вивчення морфологічних змін у будові органів «Тріади Сельє». Реакція тимусу проявляла себе розладами кровообі- гу. І чим інтенсивнішим був шкідливий вплив – тим виразнішими вони були: починаючи від підвищено- го кровонаповнення судин та застою, закінчуючи стазом крові чи сладж-феноменом. Дистрофічні зміни в тимусі спостерігались в групах після 28-ден- ного стресу та 28-денного з гострим стресом. Морфологічні дослідження селезінки виявили, що при 14-денному стресі синусоїди були дещо більші, в іншому структура органу не відрізняється від струк- тури контрольної групи. Додавання гострого стресу тільки посилило явища застою крові, а при 28-денно- му - зумовило зменшення співвідношення площі фол- ікулів відносно синусоїдів. В останніх спостерігався застій крові, еритроцити були склеєні в «монетні сто- впчики», з’явився пігмент коричневого кольору. Па- тологічні прояви в наднирниках, як і в селезінці, також відмічалися на рівні мікроциркуляторного русла (МЦР) Рис. 3. Вплив стресіндукованого ендотоксикозу на індекс індукції апоптозу мононуклеарних клітин крові експериментальних тварин. M edian 25% -75% Non-Outlier Range14 д іб 14 діб+ГС 28 діб 28 діб+ГС 18 ГС Котроль 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 та відповідали рівню стресу. І тільки при 28-денному стресі з додаванням гострого спостерігалися поодинокі крововиливи, а в клітинах коркової та мозкової зони над- нирників – зерниста дистрофія. При гострому стресі 106 ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2012, том 15, № 1 (57) було виражене повнокров’я судин, а в окремих зонах клітин паренхіми, віддалених від судин – зерниста дист- рофія. По всій стромі - інтерстиційний набряк. Дослідження рівня індексу індукції апоптозу ви- явило, що імобілізаційний стрес викликає накопичен- ня ендотоксинів, що відображається у зниженні фун- кціонального резерву. Так стресування протягом 14 діб призводило до збільшення рівня ІІА до 0,738 (p<0,05), а протягом 28 діб до 0,686, тобто спостеріга- лось накопичення ендотоксинів та активація віднов- них систем організму. Дослідження впливу гострого стресу на функціональний резерв організму тварин показало, що 18-годинний гострий стрес призводить до зростання ІІА і відповідало значенню 0,913 (p<0,05), а на фоні хронічного 14-денного та 28-денного до 0,897 (p<0,05) та 0,650 відповідно (рис. 3). Апоптоз є природним типом загибелі клітин, який не впливає на оточуючі клітини, тому доцільним було вивчення рівня некрозу МНК. Було показано, що стре- сіндукований ендотоксикоз зумовлює збільшення рівня некрозу в групах, які піддавались стресуванню протя- гом 14 діб з додаванням гострого 18-годинного та у групі 28 діб, 1,04 % та 1,29 % відповідно. В інших групах зрос- тання рівня некрозу не спостерігалось (рис. 4). Рис. 4. Вплив стресіндукованого ендотоксикозу на рівень некрозу мононуклеарних клітин крові експериментальних тварин. M edian 25% -75% Non-Outlier Range14 д іб 14 діб+ГС 28 діб 28 діб+ГС 18 ГС Котроль 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 Отримані результати дослідження функціональ- ного резерву та клітинної інактивації свідчать про наявність стресіндукованої ендогенної інтоксикації, що в свою чергу впливає на функціональний резерв організму. Дослідження індексу індукції апоптозу вказують на накопичення ендотоксинів під час стре- сування, що відображається у активації адаптивних систем організму та у зростанні індексу індукції апоп- тозу. Менш виражена реакція на гострий стрес після стресування протягом 14 діб та зниженням індексу індукції апоптозу після стресування протягом 28 діб хронічний стрес вказує на наявність адаптації. ВИСНОВКИ Отримані дані в результаті експериментального дослідження впливу імобілізаційного стресу свідчать про те, що в результаті розвивається ендотоксикоз, свідченням чого є нагромадження ендотоксинів в організмі тварин. Базуючись на проведених дослідженнях, можна вважати, що всі типи стресу призводять до виникнен- ня патологічних змін, і вони є різними. У всіх випад- ках було виявлено, що ендотоксикоз призводить до виникнення патології різної складності на гістологіч- ному рівні. Зауважимо, що один і той же тип стресу часто викликав різні за проявами патологічні зміни у щурів однієї групи, що свідчить про індивідуальний рівень чутливості організму щурів у кожному конк- ретному випадку. Так дослідження індексу індукції апоптозу свідчать про активацію адаптивних систем організму, хроніч- ний стрес призводить до адаптації, що відображається у менш вираженій реакції на гострий стрес після стре- сування протягом 14 діб та зниженням індексу індукції апоптозу після стресування протягом 28 діб. Запропоновано методику, що дає змогу виявити ендотоксикоз навіть без зовнішніх проявів та визначи- ти ступінь його важкості, що, виходячи з природи стре- су, є дуже важливим у сучасній медичній практиці, оскільки стрес є одним з найбільш значущих чинників розвитку патологій різного ґенезу. Вищенаведене дає змогу розробляти індивідуальні схеми корекції. ЛІТЕРАТУРА 1. Волкова О. В., Елецкий Ю. К. Основы гистоло- гии с гистологической техникой. — М., 1982., 342 стр. 2. Зенков Н. К., Ланкин В. З., Меньшикова Е. Б. Окислительный стресс: биохимический и патофизи- ологический аспекты. - М.: МАИК Наука/ Интерпе- риодика, 2001. – 343 с 107 О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И 3. Ігрунова К.М. Апоптоз мононуклеарних клітин крові у хворих з патологією серцево-судинної систем / Ігрунова К.М., Моторна М.М., Степанова Т.І. // Лабо- раторна діагностика. – 2004. - № 1. – с.16-18. 4. Корякина Е.В., Белова С.В. Особенности па- тогенетических механизмов эндогенной интоксика- ции у больных ревматоидным артритом/ Научно- практическая ревматология. - №1, 2001. 5. Кравчун П.Г., Бабаджан В.Д., Ибрагим Муса Маник и др. Влияние оксидативного стресса на фун- кцию эндотелия и апоптоз при гипертонической бо- лезни, возможности терапии АТ1-блокатором кан- десартаном/ Харьковский национальный медицинс- кий университет, г. Харьков, Украина, 2005г. 6. Любарский М. С., Овсянникова Т. В., Пекарев О. Г. И и др. Cиндром эндогенной интоксикации хро- нических воспалительных заболеваний органов ма- лого таза и возможность его коррекции с использо- ванием сорбционно-лимфогенных технологий/ Бюл- летень СО РАМН. - №1, 2004. - С. 27-32. 7. Рязанцева Н. В., Новицкий В. В., Часовских Н. Ю. и др. Роль редокс-зависимых сигнальных систем в регуляции апоптоза при окислительном стрессе/ // Цитология. – Т.51, №4. - 2009. – С. 329-334. 8.Савченкова Л.В., Болгов Д.М., Коробков О.А. Обоснование путей фармакокоррекции шахтной трав- мы / Проблемы военного здравоохранения. – К.: Янтар, 2002. - С. 441-443. 9.Саркисов Д.С., Перов Ю.Л. Микроскопическая техника. - 1996, 548 стр. 10. Тупикова З.А. Влияние молекул средней мас- сы, выделенных из крови обожженных пациентов на состояние перекисного окисления липидов в тканях животных. //Вопр. мед. химии.- 1990.- №36. –С.24-26. 11. Apoptosis: Applied Reagents and Technologies // Instruction Manual. – BD Bioscience. – 1998. - 2nd ed. – 99 p. 12. Darzynkiewicz Z., Juan G., Li X. et al Cytometry 27, 1, 1997;

Вплив ендотоксикозу на механізми адаптації до стрессу

Institution

Ähnliche Einträge