Коррекция препаратом кордовой крови "Криоцелл-Гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните

Апробирован способ коррекции нарушений метаболизма препаратом кордовой крови “Криоцелл-Гемокорд” в экспериментальной модели у крыс с острым гнойным перитонитом. Показано, что применение его с антибиотиком в комплексном лечении данной патологии способствовало коррекции нарушений свободнорадикальног...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2011
Автори: Гольцев, К.А., Овсянников, С.Е., Кожина, О.Ю., Останков, М.В., Гольцев, А.Н.
Формат: Стаття
Мова:Russian
Опубліковано: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2011
Назва видання:Проблемы криобиологии
Теми:
Онлайн доступ:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/44883
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Коррекция препаратом кордовой крови "Криоцелл-Гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните / К.А. Гольцев, С.Е. Овсянников, О.Ю. Кожина, М.В. Останков, А.Н. Гольцев // Пробл. криобиологии. — 2011. — Т. 21, № 1. — С. 96-103. — Бібліогр.: 26 назв. — рос., англ.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-44883
record_format dspace
spelling irk-123456789-448832013-06-07T03:06:52Z Коррекция препаратом кордовой крови "Криоцелл-Гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните Гольцев, К.А. Овсянников, С.Е. Кожина, О.Ю. Останков, М.В. Гольцев, А.Н. Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Апробирован способ коррекции нарушений метаболизма препаратом кордовой крови “Криоцелл-Гемокорд” в экспериментальной модели у крыс с острым гнойным перитонитом. Показано, что применение его с антибиотиком в комплексном лечении данной патологии способствовало коррекции нарушений свободнорадикального окисления, уменьшению степени гипоксии, улучшению утилизации кислорода тканями, пережившими гипоксию, восстановлению систем антиоксидантной защиты. Апробовано спосіб корекції порушень метаболізму препаратом кордової крові “Кріоцелл-Гемокорд” в експериментальній моделі у щурів з гострим гнійним перитонітом. Показано, що використання його з антибіотиком у комплексному лікуванні даної патології сприяло корекції порушень вільнорадикального окислення, зменшенню ступеня гіпоксії, поліпшенню утилізації кисню тканинами, які пережили гіпоксію, відновленню систем антиоксидантного захисту. The method of correction of metabolic impairments with "Cryocell-Hemocord" cord blood preparation in experimental model in rats with an acute purulent peritonitis was tested. It has been shown that its application with antibiotics as a combined treatment of this pathology contributed to the correction of impairments of free radical oxidation, lessening of hypoxia rate, improvement of oxygen utilization by the tissues, survived hypoxia, recovery of antioxidant protection systems. 2011 Article Коррекция препаратом кордовой крови "Криоцелл-Гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните / К.А. Гольцев, С.Е. Овсянников, О.Ю. Кожина, М.В. Останков, А.Н. Гольцев // Пробл. криобиологии. — 2011. — Т. 21, № 1. — С. 96-103. — Бібліогр.: 26 назв. — рос., англ. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/44883 615.361.013.68.014.41:616.346.2-002.3 ru Проблемы криобиологии Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Russian
topic Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
spellingShingle Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
Гольцев, К.А.
Овсянников, С.Е.
Кожина, О.Ю.
Останков, М.В.
Гольцев, А.Н.
Коррекция препаратом кордовой крови "Криоцелл-Гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните
Проблемы криобиологии
description Апробирован способ коррекции нарушений метаболизма препаратом кордовой крови “Криоцелл-Гемокорд” в экспериментальной модели у крыс с острым гнойным перитонитом. Показано, что применение его с антибиотиком в комплексном лечении данной патологии способствовало коррекции нарушений свободнорадикального окисления, уменьшению степени гипоксии, улучшению утилизации кислорода тканями, пережившими гипоксию, восстановлению систем антиоксидантной защиты.
format Article
author Гольцев, К.А.
Овсянников, С.Е.
Кожина, О.Ю.
Останков, М.В.
Гольцев, А.Н.
author_facet Гольцев, К.А.
Овсянников, С.Е.
Кожина, О.Ю.
Останков, М.В.
Гольцев, А.Н.
author_sort Гольцев, К.А.
title Коррекция препаратом кордовой крови "Криоцелл-Гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните
title_short Коррекция препаратом кордовой крови "Криоцелл-Гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните
title_full Коррекция препаратом кордовой крови "Криоцелл-Гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните
title_fullStr Коррекция препаратом кордовой крови "Криоцелл-Гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните
title_full_unstemmed Коррекция препаратом кордовой крови "Криоцелл-Гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните
title_sort коррекция препаратом кордовой крови "криоцелл-гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните
publisher Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
publishDate 2011
topic_facet Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/44883
citation_txt Коррекция препаратом кордовой крови "Криоцелл-Гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните / К.А. Гольцев, С.Е. Овсянников, О.Ю. Кожина, М.В. Останков, А.Н. Гольцев // Пробл. криобиологии. — 2011. — Т. 21, № 1. — С. 96-103. — Бібліогр.: 26 назв. — рос., англ.
series Проблемы криобиологии
work_keys_str_mv AT golʹcevka korrekciâpreparatomkordovojkrovikriocellgemokordmetaboličeskihnarušenijpriostromgnojnomperitonite
AT ovsânnikovse korrekciâpreparatomkordovojkrovikriocellgemokordmetaboličeskihnarušenijpriostromgnojnomperitonite
AT kožinaoû korrekciâpreparatomkordovojkrovikriocellgemokordmetaboličeskihnarušenijpriostromgnojnomperitonite
AT ostankovmv korrekciâpreparatomkordovojkrovikriocellgemokordmetaboličeskihnarušenijpriostromgnojnomperitonite
AT golʹcevan korrekciâpreparatomkordovojkrovikriocellgemokordmetaboličeskihnarušenijpriostromgnojnomperitonite
first_indexed 2025-07-04T03:27:20Z
last_indexed 2025-07-04T03:27:20Z
_version_ 1836685344887537664
fulltext 96 * Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию: ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.: (+38 057) 373-57-89, факс: (+38 057) 373-30-84, электронная почта: cryopato@rambler.ru * To whom correspondence should be addressed: 23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373 5789, fax: +380 57 373 3084, e-mail: cryopato@rambler.ru Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na- tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков УДК 615.361.013.68.014.41:616.346.2-002.3 К.А. ГОЛЬЦЕВ, С.Е. ОВСЯННИКОВ, О.Ю. КОЖИНА, М.В. ОСТАНКОВ, А.Н. ГОЛЬЦЕВ* Коррекция препаратом кордовой крови "Криоцелл-Гемокорд" метаболических нарушений при остром гнойном перитоните UDC 615.361.013.68.014.41:616.346.2-002.3 K.A. GOLTSEV, S.YE. OVSYANNIKOV, O.YU. KOZHINA, M.V. OSTANKOV, A.N. GOLTSEV* Correction of Metabolic Impairments with "Cryocell-Hemocord" Cord Blood Preparation During Acute Purulent Peritonitis Апробирован способ коррекции нарушений метаболизма препаратом кордовой крови “Криоцелл-Гемокорд” в экспериментальной модели у крыс с острым гнойным перитонитом. Показано, что применение его с антибиотиком в комплексном лечении данной патологии способствовало коррекции нарушений свободнорадикального окисления, уменьшению степени гипоксии, улучшению утилизации кислорода тканями, пережившими гипоксию, восстановлению систем антиоксидантной защиты. Ключевые слова: препарат “Криоцелл-Гемокорд”, острый гнойный перитонит, коррекция метаболических нарушений, гипоксия. Апробовано спосіб корекції порушень метаболізму препаратом кордової крові “Кріоцелл-Гемокорд” в експериментальній моделі у щурів з гострим гнійним перитонітом. Показано, що використання його з антибіотиком у комплексному лікуванні даної патології сприяло корекції порушень вільнорадикального окислення, зменшенню ступеня гіпоксії, поліпшенню утилізації кисню тканинами, які пережили гіпоксію, відновленню систем антиоксидантного захисту. Ключові слова: препарат "Кріоцелл-Гемокорд", гострий гнійний перитоніт, корекція метаболічних порушень, гіпоксія. The method of correction of metabolic impairments with "Cryocell-Hemocord" cord blood preparation in experimental model in rats with an acute purulent peritonitis was tested. It has been shown that its application with antibiotics as a combined treatment of this pathology contributed to the correction of impairments of free radical oxidation, lessening of hypoxia rate, improvement of oxygen utilization by the tissues, survived hypoxia, recovery of antioxidant protection systems. Key words: “Cryocell-hemocord" preparation, acute purulent peritonitis, correction of metabolic impairments, hypoxia . Сложные морфофункциональные изменения, возникающие в отдельных органах и системах, затрудняют лечение перитонита [5, 9, 10, 21, 26]. Одним из важных факторов нарушений метабо- лизма является развитие гипоксии [6, 15], которая приводит к срыву функционирования системы митохондриального окислительного фосфорилиро- вания, что обусловлено уменьшением доставки кислорода к тканям и/или ингибированием окис- лительных ферментов [2, 5, 16]. При перитоните нарушается связь между транспортом кислорода, гемодинамикой и метаболизмом [21]. Развивается “порочный круг” или “синдром взаимного отягоще- ния”, характеризующийся развитием тканевой гипоксии, в результате которой появляются пато- морфологические изменения в органах [8, 11]. К наиболее тяжелым клиническим проявлениям раз- вития острого разлитого перитонита (ОГП) отно- сится формирование вторичной гипоксии тканей – следствие перфузионных нарушений со снижением потребления тканями кислорода [25]. Повреж- дение клеток эндотелия приводит к снижению Complicated morphofunctional changes appearing in some organs and systems of an organism, make dif- ficult the peritonitis treatment [[5, 9, 10, 21, 26]. One of important factors of metabolism disorders is devel- opment of hypoxia [6, 15] leading to the failure in the functioning of the system of mitochondrial oxidative phosphorylation, due to the decreased oxygen delivery to tissues and/or inhibiting of oxidative enzymes [2, 5, 16]. During peritonitis the relation between the trans- port of oxygen, hemodynamics and metabolism is im- paired [21]. As a result the "vicious circle" or "mutual burdening syndrome" is developed, characterized by tissue hypoxia, resulting in pathomorphological changes in organs [8, 11]. The most severe clinical manifesta- tions of an acute purulent peritonitis (APP) is the for- mation of secondary hypoxia of tissues, resulted from perfusion impairments with a reduced consumption of oxygen by the tissues [25]. The damage of endothe- lium cells results in the decrease of oxygen extraction due to elevated permeability of vessel walls, as well as in the strengthening of plasma flow into interstitial space, resulting in the disorder of gas exchange between the problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №1 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №1 97 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №1 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №1 экстракции кислорода за счет увеличения прони- цаемости сосудистой стенки и усиления тока плаз- мы в интерстициальное пространство, приводящее к нарушениям газообмена между клетками раз- личных органов и кровью. Именно гипоксия яв- ляется важным “пусковым моментом” различных нарушений обмена веществ, проявляющихся на клеточном, субклеточном и молекулярном уровнях [1]. Уменьшение концентрации АТФ в клетке обусловливает ослабление ее влияния на ключевой фермент гликолиза фосфофруктокиназу. Активи- рующийся в результате анаэробный гликолиз час- тично компенсирует недостаток АТФ, однако быс- тро вызывает накопление лактата, развитие ацидо- за и прогрессирующее собственное ингибирование [20]. Гипоксические нарушения в слизистой обо- лочке кишечника, нарушения энергетических и сво- боднорадикальных процессов способствуют де- стабилизации мембран энтероцитов и проникно- вению микроорганизмов и их токсинов из просвета кишечника в кровеносное русло [4, 6]. Следовательно, гипоксия является основным фактором формирования необратимых поражений, при которых расстройства физиологических функ- ций и нарушения деятельности отдельных систем не могут спонтанно корригироваться путем саморе- гуляции и требуют частичной или полной коррекции и замещения функций [18]. При отсутствии адекватной и целенаправленной коррекции данной патологии гипоксия приводит к развитию синдрома полиорганной недостаточ- ности, в частности сердечно-сосудистой и дыха- тельной [18]. Поэтому коррекция нарушений мета- болизма и системы гомеостаза имеет важное зна- чение в клинической практике [6, 7, 15, 21]. Очевидна необходимость совершенствования но- вых подходов в терапии ОГП, которые направ- лены на коррекцию механизмов патогенеза основ- ных расстройств – гипоксии и её последствий. Современные методы терапии ОГП имеют этиологическую направленность [3], сконцент- рированную на коррекции нарушений системного и тканевого уровней с помощью антибактериаль- ных и иммунотропных лекарственных препаратов, инфузионно-трансфузионной и симптоматической терапии, а также метаболических препаратов, повышающих эффективность терапии за счёт воз- действия на клеточный метаболизм, лимитирую- щий энергетическое обеспечение витальных функ- ций жизненно важных органов. Расширение спектра патогенетических факторов развития ОГП опреде- ляет необходимость внесения корректив в методы лечения данной патологии, что по-прежнему ак- туально. Цель работы – обоснование целесообразности применения препарата кордовой крови “Криоцелл- cells of organs and blood. Namely hypoxia is the main "triggering moment" of different metabolic impairments, manifested at cellular, subcellular and molecular levels [1]. The reduction of ATP concentration in a cell stipu- lates the diminishing of its effect on a key enzyme of glycolysis, phosphofructokinase. As a consequence, acti- vated anaerobic glycolysis partially compensates the lack of ATP, however, it rapidly causes the accumula- tion of lactate, development of acidosis and progress- ing own inhibition [20]. Hypoxic changes in intestinal mucous, impairments of energetic and free radical pro- cesses contribute to destabilization of membranes of en- terocytes and penetration of microorganisms and their toxins from intestinal lumen into blood channel [4, 6]. Therefore, the hypoxia is the basic factor of the formation of irreversible damages at which the disor- ders of physiological functions and impairments of the activity of certain systems can not be spontaneously corrected by self-regulation and demand partial or com- plete correction and substitution of the functions [18]. If adequate and targeted correction of this pathol- ogy is absent, the hypoxia leads to the development of the syndrome of polyorgan insufficiency, in particular cardiovascular and respiratory ones [18]. So, the cor- rection of metabolic disorders and homeostasis sys- tem is of great practical importance in clinics [6, 7, 15, 21]. The need in improvement of new approaches in APP therapy, directed to the correction of pathogenesis mechanisms of main disorders, i.e. hypoxia and its consequences, is obvious. Modern methods of APP therapy are of etiological orientation [3], focused to the correction of the impair- ments of system and tissue levels by means of anti- bacterial and immune tropic medicines, as well as meta- bolic preparations, increasing the efficiency of therapy due to the effect on cell metabolism, limiting energetic provision of vital functions of the organs. The widen- ing of the spectrum of APP development pathogenetic factors determines the making corrections to the treat- ment of this pathology, which is still an actual one. The research aim is to stipulate the expediency of applying the "Cryocell-Hemocord" cord blood prepa- ration in a combined treatment of APP with basing on the assessment of the development of lipid peroxidation (LPO) reactions and state of the parameters of glu- tathione-dependent antioxidant system. Materials and methods The experiments were performed in 6-month-old Wistar rats of 160–180 g in accordance with the rules of European Convention on the Protection of Verte- brate Animals Used for Experimental and Other Sci- entific Purposes (Strasbourg, 1985) adopted by Ukrain- ian National Congress on Bioethics (Kiev, 2003) [12]. APP was modelled by ligation and dissecting of vermix, leaving it in abdominal cavity [19]. The sur- 98 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №1 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №1 Гемокорд” в комплексном лечении ОГП на основа- нии оценки развития реакций перекисного окис- ления липидов (ПОЛ) и состояния показателей глу- татион-зависимой антиоксидантной системы. Материалы и методы Эксперименты проведены на 6-месячных кры- сах линии Вистар массой 160–180 г в соответствии с правилами “Европейской Конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспе- риментальных и других научных целей” (Страсбург, 1985), одобренными Национальным конгрессом Украины по биоэтике (Киев, 2003) [12]. Моделировали ОГП путем перевязки и отсече- ния червеобразного отростка, оставляя его в брюш- ной полости [19]. Оперировали крыс под общим тиопенталовым наркозом. Препарат “Криоцелл- Гемокорд” получали из цельной кордовой крови че- ловека в виде лейкоконцентрата в собственной плазме путём пассивной седиментации эритроци- тов в градиенте плотности с добавлением полиглю- кина. Криоконсервирование осуществляли на про- граммном замораживателе УОП-6 (СКТБ с ОП ИПКиК НАН Украины) без добавления традицион- ного криопротектора по двухэтапной программе, разработанной и запатентованной в ИПКиК НАН Украины [23]. Размораживание осуществляли на водяной бане при температуре 40–41°С [7]. Все крысы были разделены на 4 группы: 1-я – интактные (контроль); 2-я – крысы с ОГП, которым проводили релапаротомию и санацию брюшной полости раствором фурацилина; 3-я – крысы с ОГП, которым проводили релапаротомию и внут- римышечную инъекцию ампицилина в дозе 40 мг/кг массы тела; 4-я – крысы с ОГП, которым проводили релапаротомию и одновременно с инъек- цией ампицилина внутривенно вводили препарат “Криоцелл-Гемокорд” в объеме 0,3 мл (5–6×106 клеток). Животных выводили из эксперимента декапи- тацией под легким эфирным наркозом. Биохими- ческие показатели и тяжесть состояния животных по шкале Глазго [24] оценивали на 1, 3, 5-е сутки после релапаротомии. Уровень ПОЛ оценивали в эритроцитах крыс по содержанию малонового диальдегида (МДА) [4], концентрации восстанов- ленного глутатиона (ВГ) по методу [17], активности глутатион-пероксидазы (ГП) по методу [25] и каталазы [13]. В гомогенатах печени определяли содержание гидроперекисей липидов (ГПЛ), актив- ность ГП и глутатион-редуктазы (ГР) – методом [20]. Содержание белка определяли методом Лоури. Статистическую обработку эксперименталь- ных данных проводили непараметрическими методами с помощью программы “Биостат”. gery of rats was done with general thiopental narco- sis. "Cryocell-Hemocord" preparation was derived from human whole blood as leukoconcentrate in own plasma by means of passive sedimentation of erythrocytes in density gradient with adding polyglucinum. Cryopreser- vation was carried-out with programmable freezer UOP-6 (Special Design and Technical Bureau of the Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy of Sciences of Ukraine) ac- cording to two-step program designed and patented at the of IPC&C of the National Academy of Sciences of Ukraine [23], thawing was done in water bath at 40–41°C [7]. All the rats were divided into 4 groups: the first one was intact (control); the 2nd one was the rats with APP subjected to relaparotomy and sanation of abdominal cavity with furacilin solution; the 3rd one comprised the rats with APP, subjected to relaparotomy and intra- muscular injection of ampicillin in a dose of 40 mg/kg of body mass; the 4th comprised the rats with APP subjected to relaparotomy simultaneously with injec- tion of ampicillin and intravenous injection of "Cryocell- Hemocord" preparation in the volume of 0.3 ml (5– 6×106 cells). The animals sacrified by decapitation under light ether narcosis. Biochemical indices and severity of the state of animals (according Glasgow scale [24]) were estimated to the 1st, 3rd and 5th day following relapara- tomy. LPO rate was assessed in erythrocytes of rat blood as the content of malone dialdehyde (MDA) [4], concentration of reduced glutathione (RG) was as- sessed by the method of Putilina [17], activity of glu- tathione-peroxidase (GP) by the method of Steffers et al. [25], and catalase – according Korolyuk [13]. Liver homogenates were examined for the content of lipid hydroperoxides (LHP), activity of GP and glutathione reductase (GR) by the method of Chernov [20]. The protein content was studied by Lowry method. Experimental data were statistically processed by non-parametric methods using Biostat software. Results and discussion It has been established that in rats of all the groups there were observed the deviations of indices of oxy- gen-transport systems and free radical disorders. Nev- ertheless, judging on the assessed parameters, the se- verity of the state of animals in the groups varied. So, in the animals of the group 2 during 24 hrs after relaparotomy this index made 13.4 ± 4.3, 12.8 ± 2.2 for the group 3 and 12.2 ± 2.2 points for the group 4. The experimental results (Table 1) show that on APP background in rat blood cells there is a failure of pro-oxidant – anti-oxidant balance even at initial stage of pathology development. In the rats of group 2 these phenomena are getting growing for the whole obser- vation period up to 5 days. The established accumula- аппурГ хынтовиж fopuorG slamina ьлетазакоП xednI иктус,яинедюлбанкорС syad,mretnoitavresbO 1 3 5 1 ьлортноK lortnoC АДМ ADM 42,0±24,6 42,0±24,6 42,0±24,6 ГВ GR 03,2±68,3 03,2±68,3 03,2±68,3 ПГ PG 230,0±217,0 230,0±217,0 230,0±217,0 азалатаK esalataC 18,2±62,94 18,2±62,94 18,2±62,94 2 ПГО PPA АДМ ADM 4,1±76,21 4,3,1 6,1±2,31 4,3,1 8,0±5,31 4,3,1 ГВ GR 742,0±446,2 1 112,0±072,2 212,0±900,2 4,1 ПГ PG 230,0±435,0 1 820,0±205,0 1 270,0±784,0 4,3,1 азалатаK esalataC 7,3±26,03 1 75,2±50,92 4,1 84,2±74,82 4,3,1 3 +ПГО китоибитна +PPA toibitna ci s АДМ ADM 01,1±86,9 2,1 7,0±15,9 2,1 1,1±32,9 2,1 ГВ GR 132,0±448,2 1 122,0±258,2 1 752,0±268,2 1 ПГ PG 770,0±815,0 1 840,0±735,0 1 240,0±785,0 4,2,1 азалатаK esalataC 87,3±70,13 1 15,3±16,33 1 74,3±13,83 2,1 4 +ПГО +китоибитна ллецоирK" - "дрокомеГ +PPA toibitna ci +s llecoyrC" - "drocomeh АДМ ADM 68,0±59,9 2,1 4,0±0,8 1 6,0±61,7 3,2 ГВ GR 042,0±618,2 1 373,0±159,2 1 82,0±91,3 2 ПГ PG 450,0±525,0 1 820,0±595,0 1 360,0±186,0 3,2 азалатаK esalataC 1,4±33,43 1 27,2±62,93 2,1 86,2±54,44 3,2 99 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №1 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №1 Результаты и обсуждение Установлено, что у крыс всех групп с ОГП наб- людали отклонения показателей кислородо- транспортных систем и свободнорадикальных нарушений. Тем не менее, судя по оцененным пока- зателям, тяжесть состояния животных в группах была различной. Так, у животных 2-й группы в 1-е сутки после релапаротомии этот показатель сос- tion of lipoperoxidation products may testify to both the exhaustion of the system of anti-oxidant protection (Table 1) and mobilization of an organism immune sys- tem due to implementation of signal function of hydro- peroxides of unsaturated fatty acids [14]. Therapy both with antibiotics (the 3rd group) and in combination with the "Cryocell-Hemocord" prepara- tion resulted in the reduced accumulation of MDA al- Таблица 1. Содержание МДА (нмоль/г Hb), ВГ (мг%) и активность антиоксидантных ферментов ГП (нмоль, НАДФН/ г Hb/ мин) и каталазы (у.е./г Hb/мин) в эритроцитах крыс с ОГП до и после лечения Table 1. MDA content (nM/g Hb), RG (mg%), activity of anti- oxidant enzymes of GP (nM, NADPh/g Hb/min) and catalase (relative units/g Hb/min) in rat's erythrocytes with APP prior to and after treatment Примечание: достоверные различия (р < 0,05) по сравнению: 1 – с 1-й группой (контроль), 2 – 2-й группой, 3 – 3-й группой, 4 – 4-й группой в соответствующие сроки. Notes: statistically significant differences (p < 0.05) if compared with: 1 – group 1 (control); 2 – group 2; 3 – group 3; 4 – group 4 into corresponding terms. тавлял 13,4 ± 4,3 балла, в 3-й группе – 12,8 ± 2,2 и в 4-й группе – 12,2 ± 2,2 балла. Результаты экспериментов (табл. 1), показывают, что на фоне ОГП в эри- троцитах крови крыс происходит срыв прооксидантно-антиоксидантного рав- новесия уже на начальном этапе раз- вития патологии. У крыс 2-й группы эти явления продолжают нарастать в тече- ние всего периода наблюдения вплоть до 5-х суток. Установленное накоп- ление продуктов липопереокисления может свидетельствовать как об ис- тощении системы антиоксидантной защиты (табл. 1), так и о мобилизации иммунной системы организма за счет реализации сигнальной функции гидро- перекисей ненасыщенных жирных кис- лот [14]. Терапия как антибиотиком (3-я группа), так и совместно с “Криоцелл- Гемокордом” (4-я группа) приводила к снижению накопления МДА почти на 20%. Более высокая эффективность комплексной терапии ОГП анти- биотиком в сочетании с препаратом “Криоцелл-Гемокорд” даёт возмож- ность предположить, что адекватное лечение изучаемой патологии возмож- но и без применения высоких доз анти- биотиков, которые могут в настоящих условиях усиливать присутствующую токсическую компоненту, что относит- ся к безусловно позитивным свойствам применения “Криоцелл-Гемокорда”. Аналогичная картина наблюдалась и в гомогенатах печени эксперимен- тальных животных (табл. 2). Получен- ные результаты коррелируют и с сома- тическим состоянием животных. В группе животных, которых лечили препаратом “Криоцелл-Гемокорд”, от- мечали более раннюю реабилитацию функции печени, что, вероятно, связано с отсутствием токсических свойств у данного препарата по сравнению с ан- тибиотиком. Факт снижения содержа- аппурГ хынтовиж fopuorG slamina ьлетазакоП xednI иктус,яинедюлбанкорС syad,mretnoitavresbO 1 3 5 1 ьлортноK lortnoC ЛПГ PHL 70,0±92,0 70,0±92,0 70,0±92,0 ПГ PG 7,31±2,69 7,31±2,69 7,31±2,69 РГ RG 8,2±6,65 8,2±6,65 8,2±6,65 2 ПГО PPA ЛПГ PHL 40,0±76,0 4,3,1 60,0±27,0 4,3,1 8,0±57,0 4,3,1 ПГ PG 4,11±4,861 1 0,21±0,97 1 12,31±9,86 РГ RG 1,2±5,16 0,3±8,73 1 7,2±5,13 4,3,1 3 +ПГО китоибитна +PPA toibitna i sc ЛПГ PHL 20,0±13,0 70,0±72,0 20,0±62,0 ПГ PG 0,52±0,351 1 1,7±8,08 2,9±4,58 2 РГ RG 4,7±6,56 6,3±9,04 1 6,5±4,54 2 4 +ПГО +китоибитна ллецоирK" - "дрокомеГ +PPA toibitna i +sc llecoyrC" - "drocomeh ЛПГ PHL 60,0±52,0 40,0±03,0 60,0±62,0 ПГ PG 0,62±6,251 1 5,8±5,58 3,11±9,09 РГ RG 4,0±7,23 3,2,1 2,4±9,24 1 3,3±2,35 2 100 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №1 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №1 ния МДА в тканях при включении в терапию “Криоцелл-Гемокорда” свидетельствует, кроме того, о наличии у препарата антиоксидантных свойств. Если в остром периоде течения ОГП преиму- щества комплексной терапии антибиотиком с препаратом “Криоцелл-Гемокорд” перед приме- нением только антибиотикотерапии выражены не явно, то в периоде ранней реабилитации они гораздо более очевидны. Как видно из данных, представ- ленных в табл. 1 и 2, дополнительное применение препарата “Криоцелл-Гемокорд” в большей степе- ни, чем антибиотик, снижает накопление продуктов ПОЛ, параллельно в большей степени увеличивая глутатион-зависимый антиоксидантный баланс в эритроцитах и клетках печени. Следовательно, использование препарата “Крио- целл-Гемокорд” в комплексной терапии ОГП most by 20%. Higher efficiency of combined therapy of APP with antibiotics and the "Cryocell-Hemocord" preparation allow to suppose that an adequate treat- ment of the studied pathology is possible even without application of high doses of antibiotics, which could aggravate the present toxic situation, and this is a undoubtly positive feature of "Cryocell-Hemocord" application. The similar results were observed also in liver homogenates of experimental animals (Table 2). The findings correlated with somatic indices of the animal's state too. In the group of animals treated with "Cryocell- Hemocord" preparation an earlier rehabilitation of liver function was noted, that is likely associated with the absence of toxic properties in this preparation if com- pared with antibiotics. The fact of reduced MDA con- Таблица 2. Содержание ГПЛ (нмоль МДА /мг белка), ВГ (мг%) и активность антиоксидантных ферментов ГП (нмоль, НАДФН/ мг белка/ мин) и ГР (нмоль, НАДФН/ мг белка/мин) в гомогенатах печени крыс с ОГП до и после лечения Table 2. Content of LHP (MDA nM/protein mg), RG (mg%), activity of anti- oxidant enzymes of GP (nM, NADPh/protein mg/min) and GR (nM, NADPh/ protein mg/min) in rat's liver homogenates with APP prior to and after treatment Примечание: достоверные различия (р < 0,05) по сравнению: 1 – с 1-й группой (конт- роль), 2 – 2-й группой, 3 – 3-й группой, 4 – 4-й группой в соответствующие сроки. Notes: statistically significant differences (p < 0.05) if compared with: 1 – group 1 (con- trol); 2 – group 2; 3 – group 3; 4 – group 4 into corresponding terms. tent in tissues when involving the "Cryocell-Hemocord" preparation into the therapy testifies also to the existence of its anti-oxidant prop- erties. During an acute period of APP the advantages of "Cryocell-He- mocord" preparation vs. the the- rapy with antibiotics are not viv- idly expressed, but within early rehabilitation period they are more manifested. The data of Tables 1 and 2 show that the "Cryocell-He- mocord" preparation in a greater extent reduces the accumulation of LPO products comparing with antibiotics, as well as simultane- ously increases the glutathione-de- pendent anti-oxidant balance in erythrocytes and liver cells. Therefore the application of "Cryocell-Hemocord" preparation in a combined therapy of APP decreases the intensity of LPO processes. Possible causes of this positive effect are related to both recovery of the pool of water-solu- ble anti-oxidants (RG is one of the main representative of this group) and fat-soluble anti-oxidants in tis- sues of different organs and to the rise in activity of enzymes of anti- oxidant protection. The "Cryocell- Hemocord" preparation renders a positive effect on activity of en- zymes of anti-radical protection. Post-operative course of APP is characterized with the suppres- sion of the activity of these en- 101 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №1 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №1 приводит к снижению интенсивности процессов ПОЛ. Возможные причины данного положитель- ного эффекта связаны как с восстановлением пула водорастворимых антиоксидантов (ВГ является одним из основных представителей данной группы) и жирорастворимых антиоксидантов в тканях различных органов, так и с увеличением активнос- ти ферментов антиоксидантной защиты. Препарат “Криоцелл-Гемокорд” оказывает положительное влияние на активность ферментов антирадикаль- ной защиты. Послеоперационное течение ОГП характери- зуется угнетением активности данных ферментов в клетках, что связано с развитием тяжелой гипо- ксии тканей и сопровождается усиленной нара- боткой активных форм кислорода, наибольшее зна- чение среди которых имеет супероксидный ради- кал, способный инактивировать ГП и частично ингибировать каталазу [8, 14]. Полученные данные свидетельствуют о более выраженном и раннем угнетении активности ГП и каталазы в эритроцитах крыс при ОГП, а снижение активности ГР отме- чается в более поздние сроки. Применение препарата “Криоцелл-Гемокорд” в комплексной терапии с антибиотиком повышало активность ГП и каталазы на 5-е сутки и было более выраженной по сравнению с показателями у животных, не получавших препарата (табл. 2). Еще один механизм восстановления активности ГП связан с увеличением концентрации ВГ за счет повышения глутатион-редуктазной активности (табл. 2). Таким образом, выявленные изменения свиде- тельствуют об антиоксидантном действии препа- рата “Криоцелл-Гемокорд” при его использовании в комплексной терапии ОГП. Данные эффекты зак- лючаются в снижении интенсивности процессов перекисного окисления, повышении содержания основного антиоксиданта клетки – ВГ, повышении активности антиоксидантных ферментов – ката- лазы и ГП. Наличие антигипоксантных и антиоксидантных свойств данного препарата в комплексной терапии ОГП позволяет снизить гипоксию тканей, которая усугубляет нарушения тканевого метаболизма. Выводы 1. Применение препарата “Криоцелл-Гемокорд” в комплексной терапии ОГП приводит к более быстрому восстановлению нарушений метаболиз- ма в эритроцитах и клетках печени за счет умень- шения повреждений, вызванных интенсификацией продуктами свободнорадикального окисления липидов, уменьшения гипоксии и восстановления процессов утилизации кислорода тканями. zymes in the cells that is related to the development of severe hypoxia of tissues and accompanied with in- tensive accumulation of reactive oxygen species, of the highest value among those is superoxide radical capable of inactivating GP and partially inhibiting cata- lase [8, 14]. The findings testify to more manifested and early suppression of GP and catalase activity in rat erythrocytes during APP, as well as the reduction of GR activity, found at later terms. The application of "Cryocell-Hemocord" prepara- tion in combined therapy with antibiotics increased the activity of GP and catalase in rats to the 5th day and was more manifested if compared with the indices in non-treated animals (Table 2). One more mechanisms of recovery of GP activity is related to the rise in con- centration due to the increase of glutathione-reduct- ase activity (Table 2). Thus, the revealed changes testify to an antioxi- dant effect of "Cryocell-Hemocord" preparation when it is used for a combined therapy of APP. These ef- fects consist in the reduction of the intensity of lipid peroxidation processes, rise in the content of main cell antioxidant, RG, and increased activity of antioxidant enzymes, catalase and GP. The presence of anti-hypoxant and anti-oxidant properties of this preparation in a combined therapy of APP enables to reduce the tissue hypoxia which ag- gravates the tissue metabolism. Conclusions 1. Application of "Cryocell-Hemocord" preparation in a combined therapy of APP leads to more rapid cure of metabolism impairments in erythrocytes and liver cells due to lessening of damages caused by in- tensified LPO, as well as to minimization of hypoxia and restoration of oxygen utilization processes by the tissues. 2. "Cryocell-Hemocord" preparation recovers the activity of anti-oxidant defense system, reduces the activity of peroxidation processes, level of endotoxemia both in plasma and erythrocytes, restores the functional activity of liver, the organ providing the detoxication process in an organism. Литература Bagnenko S.F., Gorbachev N.B., Amagyrov V.P. et al. Pharmacological correction of metabolic impairments at acute purulent peritonitis: Methodical recommendations.– St- Petersburg, 2007.– 29 p. Bilenko M.V. Ischemic and reperfusion impairments of organs. Moleculr mechanisms, ways of preventing and treatment.– Moscow: Meditsyna, 1989.– 368 p. Bondarev R.V., Bondarev V.I. Peculiarities of classification of acute purulent peritonitis// Ukr. Med. Almanakh.– 2004.– Vol. 7, N5.– P. 24–27. 1. 2. 3. 102 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №1 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №1 Литература Багненко С.Ф., Горбачев Н.Б., Амагыров В.П. и др. Фар- макологическая коррекция метаболических нарушений при разлитом перитоните: Метод. рекомендации.– СПб:, 2007.– 29 с. Биленко М.В. Ишемические и реперфузионные повреж- дения органов. Молекулярные механизмы, пути предуп- реждения и лечения.– М.: Медицина,1989.– 368 с. Бондарев Р.В., Бондарев В.И. Особенности классифика- ции острого разлитого перитонита. // Укр. мед. альма- нах.– 2004.– Т. 7, №5.– С. 24–27. Владимиров Ю.А. Нарушение барьерных свойств внут- ренней и наружной мембраны митохондрий, некроз и апоптоз // Биологические мембраны.– 2002.– Т. 19, №5.– С. 356–377. Гельфанд Е.Б., Гологорский В.А., Гельфанд Б.Р. Абдоми- нальный сепсис: интегральная оценка тяжести состоя- ния больных и полиорганной дисфункции // Анестезиоло- гия и реаниматология.– 2000.– №3.– С. 29–33. Голиков П.П., Матвеев С.Б., Мычко-Мегрин В.В., Марчен- ко В.В Регуляция кислородного обмена у больных перито- нитом в остром периоде // Анестезиология и реанимато- логия.– 1985.– №2.– С. 30–32. Гольцев А.Н., Калиниченко Т.А. Пуповинная кордовая кровь человека как источник гемопоэтических клеток для клинического применения. Часть I. Характеристики гемопоэтического потенциала. // Проблемы криобиоло- гии.– 1998.– №1.– С. 3–24. Гостищев В.К., Сажин В.П., Авдовенко А.Л. Перитонит. - М.: Медицина, 1992.– 224 с. Гринберг А.А. Неотложная абдоминальная хирургия.– М.: Триада-Х, 2000.– 496 с. Гусев Е.Ю., Юрченко Л.Н., Черешнев В.А., Зотова Н.В. Методология изучения системного воспаления. // Цито- кины и воспаление.– 2008.– Т. 7, №1.– С. 15–23. Ерюхин И.А., Белый В.Я., Ханевич М.Д. и др. Перекисное окисление липидов в генезе эндотоксикоза при остром разлитом перитоните и возможность ее коррекции гемо- сорбцией // Вестник хирургии.– 1987.– №10.– С. 104–109. Загальноетичні принципи експериментів на тваринах // Ендокринологія.– 2003.– Т. 8, №1.– С. 142–145. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г. Метод опре- деления активности каталазы. // Лаб. дело.– 1988.– №1.– С. 16–19. Лукьянова Л.Д. Митохондриальная дисфункция - типо- вой патологический процесс, молекулярный механизм гипоксии // Проблемы гипоксии – молекулярные, физиоло- гические и медицинские аспекты / Под ред. Л.Д. Лукьяно- вой и И.Б. Ушакова.– М.: Медицина, 2004.– С. 8–50. Матвеев Д.В., Сергеева Н.А., Гельфанд Б.Р. Нарушение метаболизма при перитоните: гемодинамика или клетка // Сов. медицина.– 1991.– №8.– С. 3–8. Меньшикова Е.Б., Ланкин В.З., Зеньков Н.К. и др. Окис- лительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты.– М. "Слово".– 2006.– 556 с. Vladimirov Yu.A. Impairment of barrier properties of inner and outer membranes of mitochondria, necrosis and apoptosis // Biologicheskie Membrany.– 2002.– Vol. 19, N5.– P. 367–377. Gelfand E.B., Gologrsky V.A., Gelfand B.R. Abdominal sepsis: integral assessment of severity of patients' state and polyorgan dysfunction// Anesteziologiya i Reanimatologiya. - 2000.– N3. - P. 29-33. Golikov P.P., Matveev S.B., Mychko-Megrin V.V., Marchen- ko V.V. Regulaiton of oxygen exchange in patients with perito- nitis in acute period // Anesteziologiya i Reanimatologiya.– 1985.– N2.– P. 30–32. Goltsev A.N., Kalinichenko T.A. Human cord blood as source of hemopoietic cells for clinical application. Part. 1. Charac- teristics of hemopoietic potential // Problems of Cryobiology.– 1998.– N1.– P. 3–24. Gostischev V.K., Sazhin V.P., Avdovenko A.L. Peritonitis.– Moscow: Meditsyna, 1992.– 224 p. Grinberg A.A. Urgent abdominal surgery.– Moscow: Triada-X, 2000.– 496 p. Gusev E.Yu., Yurchenko L.N., Chereshnev V.A., Zotova N.V. Methodology of study of systemic inflammation // Tsitokiny i Vospaleniye.– 2008.– Vol. 7, N1.– P. 15–23. Yeryukihn I.A., Belyy V.Ya., Khanevich M.D. et al. Lipid peroxidation in genesis of endotoxicosis at acute and pos- sibility of its correction with hemosorption// Vestnik Khirurugii.– 1987.– N10.– P. 104–109. General ethical principles of experiments in animals // Endokrinologiya.– 2003.– Vol. 8, N1.– P. 142–145. Korolyuk M.A., Ivanova L.I., Mayorova I.G. Method of examin- ing catalase activity // Lab. Delo.– 1988.– N1.– P. 16–19. Lukyanova L.D. Mitochondrial dysfunction is typical patho- logical process, molecular mechanism of hypoxia // In: Prob- lems of hypoxia – molecular, physiological and medical aspects / Ed. by L.D. Lukyanova and I.B. Ushakov.– Moscow: Meditsy- na, 2004.– P. 8–50. Matveev D.V., Sergeeva N.A., Gelfand B.R. Disorder of meta- bolism at peritonitis: hemodynamics or cell // Sov. Meditsyna.– 1991.– N8.– P. 3–8. Menshikova E.B., Lankon V.Z., Zenkov N.K. et al. Oxidative stress. Pro-oxidants and antioxidants.– Moscow: Slovo.– 2006.– 556 p. Putilina F.E. Examining the content of reduced glutathione in tissues // Methods of biochemical studies / Ed. by M.I. Prokho- rova.– Leningrad: Leningrad University, 1982.– P. 183–185. Ryabov G.A. Hypoxia of critical states.– Moscow: Meditsyna, 1988.– 287 p. Usikov F.F., Pasternak E.V., Romanova L.D. et al. Surgical model of acute purulent peritonitis // Khirurgiya.– 1984.– N8.– P. 27–29. Chernov N.N. Study of glutathione reductase in liver of rats // Enzymology of tumors / Ed. by T.T. Berezov.– Moscow: Univer- sity of Peoples' Friendship, 1979.– P. 96–101. Shanin V.Yu. Clinical pathophysiology.– St-Petersburg, 1998.– 569 p. Shurkalin B.K., Faller A.P., Gorskiy V.A., Glushkov P.S. Post- operative complications in patients with peritonitis // Khirur- giya.– 2003.– N4.– P. 32–35. Patent N31847A Ukraine, IPC A01N1/02. Method of cryopre- servation of hemopoietic cells of cord blood / A.O. Tsutsayeva, V.I. Grischenko, O.S. Prokopyuk et al. Appl. 05.1198. Publ. 15.12.2000. Bul. N7.– P. 1–10. Kologlu M., Elker D., Altun H., Sayek I. Validation of MPI and PIA II in two different groups patients with secondary peritonitis // Hepatogastroenterology.– 2001.– Vol. 48, N37.– P. 147–151. Steffes C.P., Dahn M.S., Lange M.P. Oxygen transport- dependent splanchnic metabolism in the sepsis syndrome // Arch. Surg.– 1994.– Vol. 129, N2.– P. 46–52. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 2. Препарат “Криоцелл-Гемокорд” восстанав- ливает активность системы антиоксидантной за- щиты, снижает активность процессов перекисного окисления, уровень эндотоксемии как в плазмен- ном, так и в эритроцитарном секторе, восстанав- ливает функциональную активность печени – органа, обеспечивающего процессы детоксикации в организме. 103 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №1 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №1 Путилина Ф.Е. Определение содержания восстановлен- ного глутатиона в тканях // Методы биохимических иссле- дований / Под ред. М.И. Прохоровой.– Л.: Изд-во Ленинград ун-та, 1982.– С. 183–185. Рябов Г.А. Гипоксия критических состояний.– М.: Меди- цина, 1988.– 287 с. Усиков Ф.Ф., Пастернак Е.В., Романова Л.Д. и др. Хирур- гическая модель острого гнойного перитонита // Хирур- гия.– 1984.– №8.– С. 27–29. Чернов H.H. Исследование глутатионредуктазы в печени крыс // Энзимология опухолей / Под ред. Т.Т. Березова.– М.: Ун-т дружбы народов, 1979.– С. 96–101. Шанин В.Ю. Клиническая патофизиология.– СПб: 1998.– 569 с. Шуркалин Б.К., Фаллер А.П., Горский В.А., Глушков П.С. Послеоперационные осложнения у больных с перитони- том // Хирургия.– 2003.– №4.– С. 32–35. Патент №31847А, Україна, МПК А01№1/02. Спосіб кріоконсервування кровотворних клітин кордової крові/ А.О. Цуцаєва, В.І. Грищенко, О.С. Прокопюк та ін. Заявлено 05.11.98. Опубл. 15.12.2000 Бюл. №7.– С. 1.10. Kologlu M., Elker D., Altun H., Sayek I. Validation of MPI and PIA II in two different groups patients with secondary peritonitis // Hepatogastroenterology.– 2001.– Vol. 48, N37.– P. 147–151. Steffes C.P., Dahn M.S., Lange M.P. Oxygen transport- dependent splanchnic metabolism in the sepsis syndrome // Arch. Surg.– 1994.– Vol. 129, N2.– P. 46–52. Takahashi T., Hohda T., Sugimoto N. et al. Antioxidant roles of cellular ubiquinone and related redox cycles: potentiated resistance of rat hepatocytes having stimulated NADPH- dependent ubiquinone reductase against hydrogen peroxide toxicity // Biol. Pharm. Bull.– 1999.– Vol. 22, N11.– P. 1226– 1233. Поступила 01.02.2011 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. Takahashi T., Hohda T., Sugimoto N. et al. Antioxidant roles of cellular ubiquinone and related redox cycles: potentiated resistance of rat hepatocytes having stimulated NADPH- dependent ubiquinone reductase against hydrogen peroxide toxicity // Biol. Pharm. Bull.– 1999.– Vol. 22, N11.– P. 1226– 1233. Accepted in 01.02.2011 26.