Апоптоз и некроз лимфоцитов крови in vitro у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом
Исследован уровень апоптоза и некроза лимфоцитов крови у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом. Установлена возможность использования этого показателя в качестве диагностического критерия заболевания....
Gespeichert in:
| Datum: | 2008 |
|---|---|
| Hauptverfasser: | , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
| Schriftenreihe: | Международный медицинский журнал |
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/53879 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Апоптоз и некроз лимфоцитов крови in vitro у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом / Т.М. Клименко, О.В. Воробьева, И.Г. Герасимов // Международный медицинский журнал. — 2008. — Т. 14, № 2. — С. 73-75. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-53879 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-538792014-01-29T03:11:16Z Апоптоз и некроз лимфоцитов крови in vitro у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом Клименко, Т.М. Воробьева, О.В. Герасимов, И.Г. Акушерство и гинекология Исследован уровень апоптоза и некроза лимфоцитов крови у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом. Установлена возможность использования этого показателя в качестве диагностического критерия заболевания. Apoptosis and necrosis level in blood lymphocytes in pre−term newborns with necrotizing enterocolitis was investigated. The possibility to use this parameter as a diagnostic criterion of the disease was established. 2008 Article Апоптоз и некроз лимфоцитов крови in vitro у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом / Т.М. Клименко, О.В. Воробьева, И.Г. Герасимов // Международный медицинский журнал. — 2008. — Т. 14, № 2. — С. 73-75. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. 2308-5274 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/53879 616.348-002.4:616.155.32-002.4-076]-053.32 ru Международный медицинский журнал Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Акушерство и гинекология Акушерство и гинекология |
| spellingShingle |
Акушерство и гинекология Акушерство и гинекология Клименко, Т.М. Воробьева, О.В. Герасимов, И.Г. Апоптоз и некроз лимфоцитов крови in vitro у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом Международный медицинский журнал |
| description |
Исследован уровень апоптоза и некроза лимфоцитов крови у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом. Установлена возможность использования этого показателя в качестве диагностического критерия заболевания. |
| format |
Article |
| author |
Клименко, Т.М. Воробьева, О.В. Герасимов, И.Г. |
| author_facet |
Клименко, Т.М. Воробьева, О.В. Герасимов, И.Г. |
| author_sort |
Клименко, Т.М. |
| title |
Апоптоз и некроз лимфоцитов крови in vitro у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом |
| title_short |
Апоптоз и некроз лимфоцитов крови in vitro у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом |
| title_full |
Апоптоз и некроз лимфоцитов крови in vitro у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом |
| title_fullStr |
Апоптоз и некроз лимфоцитов крови in vitro у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом |
| title_full_unstemmed |
Апоптоз и некроз лимфоцитов крови in vitro у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом |
| title_sort |
апоптоз и некроз лимфоцитов крови in vitro у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| publishDate |
2008 |
| topic_facet |
Акушерство и гинекология |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/53879 |
| citation_txt |
Апоптоз и некроз лимфоцитов крови in vitro у недоношенных новорожденных с некротизирующим энтероколитом / Т.М. Клименко, О.В. Воробьева, И.Г. Герасимов // Международный медицинский журнал. — 2008. — Т. 14, № 2. — С. 73-75. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. |
| series |
Международный медицинский журнал |
| work_keys_str_mv |
AT klimenkotm apoptozinekrozlimfocitovkroviinvitrounedonošennyhnovoroždennyhsnekrotiziruûŝiménterokolitom AT vorobʹevaov apoptozinekrozlimfocitovkroviinvitrounedonošennyhnovoroždennyhsnekrotiziruûŝiménterokolitom AT gerasimovig apoptozinekrozlimfocitovkroviinvitrounedonošennyhnovoroždennyhsnekrotiziruûŝiménterokolitom |
| first_indexed |
2025-07-05T05:17:56Z |
| last_indexed |
2025-07-05T05:17:56Z |
| _version_ |
1836782900020772864 |
| fulltext |
73МЕЖДУНАРОДНЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ № 2’2008
АКУШЕРСТВО
Апоптоз — генетически программированная
гибель клеток, которая не приводит к интокси-
кации организма продуктами их распада. Апоп-
тоз индуцируется клеточным микроокружением,
воздействием различных химических, физических
и физико-химических факторов [1–3]. В процессе
апоптоза происходит фрагментация клеток в окру-
женные мембранами частицы, которые могут быть
элиминированы специализированными фагоцита-
ми [4, 5]. Гибель клеток путем апоптоза индуциру-
ется многими неспецифическими факторами [6–8],
интенсивное воздействие которых на клетки может
привести к некрозу последних [2]. Индуцировать
апоптоз можно различными способами, в том
числе лишением клеток условий среды, сущест-
вующих in vivo, путем перенесения их в среду
in vitro, что и было сделано в настоящей работе.
В литературе обсуждается возможность ис-
пользования апоптоза и некроза лимфоцитов
в качестве критериев тяжести бактериальной ин-
фекции и степени инфекционного токсикоза [2,
9, 10]. Однако мы не нашли в литературе данных
об уровнях апоптоза и некроза лимфоцитов при
некротизирующем энтероколите (НЭК) у недоно-
шенных новорожденных, хотя исследование этих
показателей было бы полезно не только для бо-
лее объективной характеристики заболевания, но
и для диагностики ранних стадий НЭК.
Учитывая это обстоятельство, мы поставили
перед собой цель оценить возможность исследо-
вания уровней апоптоза и некроза лимфоцитов
крови для диагностики НЭК у новорожденных.
Обследовали 98 недоношенных новорожден-
ных обоего пола в возрасте 1–28 суток. Контроль-
ную группу составили 27 условно здоровых недо-
ношенных новорожденных. В анамнезе беремен-
ности и родов у матерей этих детей отсутствовали
факторы риска внутриутробного и интранатально-
го бактериального инфицирования плода. В груп-
пу наблюдения вошел 71 недоношенный ребенок
с клинически и лабораторно подтвержденным
НЭК [11, 12]: у 34 детей диагностирована II стадия,
у 37 — I стадия заболевания. Детей с III стадией
НЭК в исследование не включали. Распределе-
ние детей по массе тела в зависимости от геста-
ционного возраста (ГВ) представлено в табл. 1.
Таблица 1
Масса тела (г)
недоношенных новорожденных
Степень
недоно-
шенно-
сти
ГВ,
нед Контроль
Стадии НЭК
I II
I 36–35 2100±410 — —
II 34–32 — 1600±180 1600±200
III 31–28 — 1300±100 1300±150
IV < 28 — — —
УДК 616.348-002.4:616.155.32-002.4-076]-053.32
АПОПТОЗ И НЕКРОЗ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ
IN VITRO У НЕДОНОШЕННЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ
С НЕКРОТИЗИРУЮЩИМ ЭНТЕРОКОЛИТОМ
Проф. Т. М. КЛИМЕНКО, канд. мед. наук О. В. ВОРОБЬЕВА, докт. мед. наук И. Г. ГЕРАСИМОВ
APOPTOSIS AND NECROSIS OF BLOOD LYMPHOCYTES IN VITRO
IN PRE-TERM NEWBORNS WITH NECROTIZING ENTEROCOLITIS
T. M. KLIMENKO, O. V. VOROBYOVA, I. G. GERASIMOV
Харьковская медицинская академия последипломного образования,
Донецкий национальный медицинский университет им. М. Горького,
НИИ медицинских проблем семьи Донецкого национального медицинского университета
Исследован уровень апоптоза и некроза лимфоцитов крови у недоношенных новорожденных
с некротизирующим энтероколитом. Установлена возможность использования этого показателя
в качестве диагностического критерия заболевания.
Ключевые слова: недоношенные новорожденные, некротизирующий энтероколит, лимфоциты, апоптоз,
некроз.
Apoptosis and necrosis level in blood lymphocytes in pre-term newborns with necrotizing enterocoli-
tis was investigated. The possibility to use this parameter as a diagnostic criterion of the disease was
established.
Key words: pre-term newborns, necrotizing enterocolitis, lymphocytes, apoptosis, necrosis.
74
АКУШЕРСТВО
Кровь (1 мл) из локтевой вены утром натощак
гепаринизировали (5 ЕД/мл), термостатировали
на водяной бане при 37 °С в течение 5 ч, отбира-
ли лимфоцитарную взвесь, окрашивали акриди-
новым оранжевым и бромидом этидия и микро-
скопировали под люминесценцией [1]. Среди
100 клеток подсчитывали количество типичных
(ЛТ), апоптических (ЛА) и некротических лим-
фоцитов (ЛН) [13].
Среднее и его доверительный интервал рас-
считывали с доверительной вероятностью p = 0,95;
регрессионный анализ проводили, используя пакет
статистических программ «STATISTICA 6.0».
Через 5 ч термостатирования уровни апоп-
тоза и некроза лимфоцитов крови у здоро-
вых недоношенных новорожденных составили
5±2,2 и 3±1,5 % соответственно, что не отличает-
ся (p > 0,05) от показателей у условно здоровых
детей в возрасте 7–8 лет (4±4,1 и 4±4,0 % соот-
ветственно) [1]. Результаты исследования уровня
апоптоза и некроза лимфоцитов недоношенных
новорожденных приведены в табл. 2. Поскольку
НЭК учитывался только у детей со II и III сте-
пенями недоношенности и при этом у детей без
НЭК была I степень недоношенности, в данной
таблице приведены результаты исследования
апоптоза и некроза лимфоцитов периферической
крови новорожденных с указанными степенями
недоношенности.
Как видно из таблицы, при наличии НЭК, не-
зависимо от стадии заболевания, уровни некроза
и апоптоза лимфоцитов повышаются по сравнению
с контролем. С развитием НЭК индуцированный
апоптоз угнетается, тогда как уровень некроза,
наоборот, возрастает. По этой причине число ти-
пичных лимфоцитов практически не зависит от
стадии НЭК.
Наличие НЭК приводит к следующим изме-
нениям рассматриваемых показателей по сравне-
нию с контролем: при НЭК, независимо от стадии,
число типичных лимфоциотов меньше (p < 0,05),
ЛТ и (ЛА + АН) — больше (p < 0,05), а в случае
ЛА наблюдается тенденция (p > 0,1) к увеличе-
нию их доли. Последняя тенденция обусловлена
тем, что количество апоптических лимфоцитов
периферической крови разнонаправлено изме-
няется в зависимости от стадии НЭК. Как вид-
но из табл. 2, при НЭК I стадии доля ЛА выше
(p < 0,05), а при НЭК II стадии — ниже (p < 0,05),
чем в контроле. При этом в случае НЭК I стадии
и недоношенности III степени выявлена только
тенденция (p < 0,1), что, очевидно, обусловлено
относительно высокой погрешностью определения
показателя (примерно 20 %).
Примечательно, что обсуждаемые показатели,
за исключением ЛТ, значимо (p < 0,05) изменяются
в зависимости от стадии НЭК. Так, при НЭК I ста-
дии доля ЛА выше (p < 0,05), а ЛН и (ЛА + АН)
ниже (p < 0,05), чем при НЭК II стадии (см. табл.
2). Следовательно, развитие заболевания приводит
к угнетению индуцированного апоптоза лимфоци-
тов периферической крови и к увеличению гибели
клеток за счет их некроза.
Таким образом, НЭК I стадии может быть диф-
ференциально диагностирован, когда доля апоп-
тических лейкоцитов составляет примерно 12 %,
некротических лейкоцитов — около 30 % и общее
количестве гибнущих клеток близко к 40 %. При
НЭК II стадии эти показатели составляют соот-
ветственно примерно 5, 45 и 50 %.
Таблица 2
Количество (в %) типичных, апоптических, некротических и гибнущих лимфоцитов
периферической крови недоношенных новорожденных в зависимости от стадии НЭК
Показа-
тель, %
Стадии
недоношенности Контроль
Стадии НЭК
Все I II
ЛТ Все 92±4,5 52±3,3* 58±3,2* 50±7,1*
II — 54±5,9 59±4,8 —
III — 54±5,7 59±7,8 51±6,5
ЛА Все 5±2,2 8±1,9 11±2,1* 5,3±3,1*,**
II — 7±2,5 7±3,3 —
III — 9±3,4 12±2,9 4±2,5**
ЛН Все 3±1,5 39±6,3*к 30±2,3*к 45±4,1*,**
II — 39±5,6 39±5,0 —
III — 36±7,2 29±3,0 46±7,6*,**
ЛА+ЛН Все 9±2,9 47±1,9* 41±2,1* 49±4,0*,**
II — 45±5,4 39±5,1 —
III — 44±4,1 40±2,7 50±6,7**
Примечание. Статистически значимые отличия данного значения: * — от контроля; ** — от значений
при НЭК I стадии.
75
Т. М. КЛИМЕНКО… АПОПТОЗ И НЕКРОЗ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ IN VITRO…
Л и т е р а т у р а
1. Апоптоз лимфоцитов крови при болезни Легг-
Кальве-Пертеса / И. Г. Герасимов, Д. Ю. Игнатов,
Т. Я. Усикова, Ф. В. Климовицкий // Ортопед.
травматол. и протезир.— 2002.— № 2.— С. 90–94.
2. Зайчик А. Ш., Чурилов Л. П. Основы общей патофи-
зиологии.— СПб.: ЭЛБИ-СПб, 1999.— 618 с.
3. Huynh M. L., Fadok V. A., Henson P. M. Phosphatidyl-
serine-dependent ingestion of apoptotic cells promotes
TGF-beta1 secretion and the resolution of inflammati-
on // Clin. Invest.— 2002.— Vol. 109, № 1.— P. 41–50.
4. А high frequency of apoptosis was found in cultures of
lymphocytes isolated from the venous blood of children
born with a low birth weight / E. Barg, K. Gasiorowski,
B. Brokos et al. // Cell. Mol. Biol. Lett.— 2004.— Vol. 9,
№ 1.— P. 135–143.
5. Microglial phagocytosis of apoptotic inflammatory
T cells leads to down-regulation of microglial im-
mune activation / T. Magnus, A. Chan, O. Grauer
et al. // J. Immunol.— 2001.— Vol. 167, № 9.—
P. 5004–5010.
6. Levy O., Martin S., Eichenwald E. Impaired innate im-
munity in the newbons: newborn neutrophils are defi-
cient in bactericidal/permeability-increasing protein //
Pediatrics.— 1999.— Vol. 104, № 6.— P. 1327–1333.
7. Psychological stress increases human T cell apoptosis in
vitro / S. Sakami, A. Nakata, T. Yamamura, N. Kawamu-
ra // Neuroimmunomodulat.— 2002–2003.— Vol. 10,
№ 4.— P. 224–231.
8. Relationship between lymphocyte apoptosis and en-
dotoxin translocation after thermal injury in rats /
P. Y. Xia, J. Zheng, H. Zhou et al. // World J. Gas-
troenterol.— 2002.— Vol. 8, № 3.— P. 546–550.
9. Endotoxemia-induced lymphocyte apoptosis is aug-
mented by a hyperinsulinemic-euglycemic clamp /
J. S. Nielsen, A. Larsson, V. Brix-Christensen et al. //
Anesthesiology.— 2005.— Vol. 102, № 4.— P. 768–773.
10. Sharma R., Hudak M. L., Mollitt D. L. Neonatal gut bar-
rier and multiple organ failure: role of endotoxin and
proinflammatory cytokines in sepsis and necrotizing
enterocolitis // J. Pediatr. Surg.— 2007.— Vol. 43.—
P. 454–461.
11. Шабалов Н. П. Неонатология: Уч. пособие. В 2-х
томах.— М.: МЕДпресс, 2006.— Т. 2.— 505 с.
12. Посiбник з неонатологiї: Пер. з англ. / За ред. Джона
Клоертi, Енн Старк.— Київ: Фонд допомоги дiтям
Чорнобиля, 2002.— 772 с.
13. Анкина М. А., Михайлов Г. Ф. Модификация способа
посева лимфоцитов в культуру и приготовления
препаратов при микроядерном методе, основанном
на цитокинетическом блоке // Клин.-лаб. диагн.—
1992.— № 3–4.— С. 17–20.
Поступила 12.03.2008
|