Введення в культуру in vitro рiзних видiв гiркокаштана
Досліджено ефективність різних методів стерилізації, вибрано найефективніший із них, визначено умови введення й культивування шести видів гіркокаштана (Aesculus L.).
Gespeichert in:
| Datum: | 2010 |
|---|---|
| Hauptverfasser: | , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Ukrainian |
| Veröffentlicht: |
Iнститут фізіології рослин і генетики НАН України
2010
|
| Schriftenreihe: | Физиология и биохимия культурных растений |
| Online Zugang: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/66272 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Введення в культуру in vitro рiзних видiв гiркокаштана / Т.М. Чеченєва, К.Є. Шаванова, С.П. Машковська // Физиология и биохимия культурных растений. — 2010. — Т. 42, № 2. — С. 132-136. — Бібліогр.: 7 назв. — укр. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-66272 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-662722014-07-11T03:01:23Z Введення в культуру in vitro рiзних видiв гiркокаштана Чеченєва, Т.М. Шаванова, К.Є. Машковська, С.П. Досліджено ефективність різних методів стерилізації, вибрано найефективніший із них, визначено умови введення й культивування шести видів гіркокаштана (Aesculus L.). Исследована эффективность разных методов стерилизации, выбран самый эффективный из них, определены условия введения и культивирования шести видов конского каштана (Aesculus L.). Effectivity of different sterilization methods was researched, among them the most effective was chosen; introduction and cultivation conditions for six species of Aesculus L. were determined. 2010 Article Введення в культуру in vitro рiзних видiв гiркокаштана / Т.М. Чеченєва, К.Є. Шаванова, С.П. Машковська // Физиология и биохимия культурных растений. — 2010. — Т. 42, № 2. — С. 132-136. — Бібліогр.: 7 назв. — укр. 0522-9310 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/66272 582.772:634.53 uk Физиология и биохимия культурных растений Iнститут фізіології рослин і генетики НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Ukrainian |
| description |
Досліджено ефективність різних методів стерилізації, вибрано найефективніший із них, визначено умови введення й культивування шести видів гіркокаштана (Aesculus L.). |
| format |
Article |
| author |
Чеченєва, Т.М. Шаванова, К.Є. Машковська, С.П. |
| spellingShingle |
Чеченєва, Т.М. Шаванова, К.Є. Машковська, С.П. Введення в культуру in vitro рiзних видiв гiркокаштана Физиология и биохимия культурных растений |
| author_facet |
Чеченєва, Т.М. Шаванова, К.Є. Машковська, С.П. |
| author_sort |
Чеченєва, Т.М. |
| title |
Введення в культуру in vitro рiзних видiв гiркокаштана |
| title_short |
Введення в культуру in vitro рiзних видiв гiркокаштана |
| title_full |
Введення в культуру in vitro рiзних видiв гiркокаштана |
| title_fullStr |
Введення в культуру in vitro рiзних видiв гiркокаштана |
| title_full_unstemmed |
Введення в культуру in vitro рiзних видiв гiркокаштана |
| title_sort |
введення в культуру in vitro рiзних видiв гiркокаштана |
| publisher |
Iнститут фізіології рослин і генетики НАН України |
| publishDate |
2010 |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/66272 |
| citation_txt |
Введення в культуру in vitro рiзних видiв гiркокаштана / Т.М. Чеченєва, К.Є. Шаванова, С.П. Машковська // Физиология и биохимия культурных растений. — 2010. — Т. 42, № 2. — С. 132-136. — Бібліогр.: 7 назв. — укр. |
| series |
Физиология и биохимия культурных растений |
| work_keys_str_mv |
AT čečenêvatm vvedennâvkulʹturuinvitroriznihvidivgirkokaštana AT šavanovakê vvedennâvkulʹturuinvitroriznihvidivgirkokaštana AT maškovsʹkasp vvedennâvkulʹturuinvitroriznihvidivgirkokaštana |
| first_indexed |
2025-07-05T16:32:59Z |
| last_indexed |
2025-07-05T16:32:59Z |
| _version_ |
1836825370605649920 |
| fulltext |
ФИЗИОЛОГИЯ И БИОХИМИЯ КУЛЬТ. РАСТЕНИЙ. 2010. Т. 42. № 2
УДК 582.772:634.53
ВВЕДЕННЯ В КУЛЬТУРУ IN VITRO РIЗНИХ ВИДIВ ГIРКОКАШТАНА
Т.М. ЧЕЧЕНЄВА,1, 2 К.Є. ШАВАНОВА,1 С.П. МАШКОВСЬКА1
1Національний університет біоресурсів і природокористування України
03041 Київ, вул. Героїв Оборони, 15
2Iнститут фізіології рослин і генетики Національної академії наук України
03022 Київ, вул. Васильківська, 31/17
Досліджено ефективність різних методів стерилізації, вибрано найефективніший
із них, визначено умови введення й культивування шести видів гіркокаштана
(Aesculus L.).
Ключові слова: Aesculus L., культура in vitro, стерилізація, калюс.
Гіркокаштани (Aesculus L.) — одна з надзвичайно цікавих груп рослин,
дуже популярних у світі завдяки високим декоративним якостям. Вони
є джерелом біологічно активних речовин, тому належать до ресурсних
рослин. В Україні є види гіркокаштана з Південної Європи, Північної
Америки, Східної Азії, Iндії, інтродуковані в 1557—1923 рр. [2—4]. Нині
стан гіркокаштанових насаджень у містах України, в тім числі й у Києві,
катастрофічно погіршився. Це пов’язано як із несприятливою екологіч-
ною ситуацією в промислових містах, так і з масовим поширенням хво-
роб і шкідників, таких як каштанова мінуюча міль (Cameraria ohridella)
[1]. Внаслідок сумісної дії зазначених чинників велика кількість рослин
найпоширенішого в Україні гіркокаштана звичайного (Aesculus hippocas-
tanum L.) знаходиться в критичному стані. Iнші види і форми гіркокаш-
танів також не витримують антропогенного тиску, що призводить до їх
всихання і загибелі.
Гіркокаштан звичайний — символ міста Києва, він прикрашає йо-
го понад 200 років, але близько 50 % дерев уже вичерпали свій адаптив-
ний потенціал [4, 7]. Тому важливо вирішити проблему з посадковим
матеріалом, генетично стійким до біотичних і абіотичних чинників урба-
нізованого середовища, оптимізувати умови вирощування рослин гірко-
каштанів за впливу критичних чинників середовища.
Одним із найперспективніших рішень у цій ситуації може бути за-
стосування методів культури in vitro для прискореного мікроклонально-
го розмноження найстійкіших рослин [5—7].
Метою досліджень був добір оптимальних умов стерилізації, куль-
тивування і складу поживного середовища для введення в культуру in
vitro різних видів гіркокаштана.
Методика
Дослідження проводили на базі Національного університету біоресурсів
і природокористування України протягом весняно-літнього сезону 2007
і 2008 років.
© Т.М. ЧЕЧЕНЄВА, К.Є. ШАВАНОВА, С.П. МАШКОВСЬКА, 2010
132
Для введення в культуру використовували меристеми листкової
пластинки шести видів гіркокаштана (2n = 40): гіркокаштани звичай-
ний (Aesculus hippocastanum L.), восьмитичинковий (A. octandra Marsh.),
забутий (A. neglecta Lingl.), дрібноквітковий (A. parviflora Walt.), голий
(A. glabra Willd.), червоний (A. pavia L.).
Молоді листкові пластинки промивали у розчині мийного засобу
для зниження кількості поверхневої мікрофлори, після чого піддавали
стерилізації за трьома схемами.
Перша схема передбачала поверхневу стерилізацію послідовним за-
нуренням експлантатів на 15 с у 70° розчин етанолу, промивання дисти-
льованою водою та обробку у 15 %-му розчині комерційного препарату
«Білизна» упродовж 15 хв.
Друга схема стерилізації полягала в послідовному використанні 70°
розчину етанолу (15 с), промиванні дистильованою водою та обробці
мертіолятом (5 хв).
Третя схема включала стерилізацію з використанням 70° розчину
етанолу (15 с), промивання дистильованою водою та занурення у 10 %-й
розчин пероксиду водню Н2О2 (5 хв).
В усіх схемах стерилізації кінцевим етапом було триразове проми-
вання експлантатів стерильною дистильованою водою.
Після добору умов стерилізації для введення експлантатів рослин
роду Aesculus (молоді листкові пластинки 3—5 см завдовжки по цент-
ральній жилці з поперечно перерізаними жилками на відстані 1 мм) в
культуру in vitro для подальшого культивування застосовували модифіко-
вані агаризовані середовища з макро- і мікросолями за МС [5, 6], дода-
ванням вітамінів і гормонів росту. Iндукція первинного калюсу відбу-
валася в темряві, регенерація рослин — за 16-годинного фотоперіоду,
освітленості 2000—2500 лк, температури 22—24 °С.
Досліди виконували у триразовій повторності, кількість експлан-
татів становила 300 шт. для кожного виду. Отримані результати оброб-
лені статистично.
Результати та обговорення
Деревні рослини, у тім числі й гіркокаштан, характеризуються повіль-
ним ростом, містять велику кількість вторинних сполук (феноли, терпе-
ни), які в ізольованих тканинах активуються і можуть інгібувати ріст і
поділ клітин, що ослаблює здатність тканин до регенерації. У деревних
рослин також спостерігається тенденція до накопичення внутрішньої
інфекції, тому важливо підібрати оптимальну схему стерилізації.
Основним показником ефективності стерилізаційної речовини є
кількість експлантатів, які нормально розвиваються. У результаті
досліджень з використанням 10 %-го розчину Н2О2 рівень інфекції для
різних видів гіркокаштана змінювався в межах 94—100 %. Найменший
відсоток інфікованих експлантатів для п’яти видів гіркокаштана отрима-
но в разі використання 15 %-го розчину «Білизни»: застосування
мертіоляту (друга схема стерилізації) дало кращі результати лише для
рослин A. pavia L. (рис. 1).
Після добору схеми стерилізації на модифікованому середовищі МС
проводили індукцію калюсу в термостаті за температури 22—24 °С (рис. 2).
Iндукцію калюсоутворення спостерігали на 9—10-ту добу культиву-
вання. Здатність до калюсоутворення залежно від виду гіркокаштана
133
ВВЕДЕННЯ В КУЛЬТУРУ IN VITRO РIЗНИХ ВИДIВ ГIРКОКАШТАНА
Физиология и биохимия культ. растений. 2010. Т. 42. № 2
змінювалась від максимальної в A. hippocastanum L. (71 %) до мінімаль-
ної в A. neglecta Lingl. (45 %) при обліку наприкінці первинного пасажу
(22—24-та доба).
З метою подальшого мікроклонального розмноження видів гіркока-
штана у наступному пасажі калюси переносили на світло (16-годинний
фотоперіод, освітленість 2000—2500 лк, температура 22—24 °С). Iнтен-
сивне позеленіння ділянок калюсу з подальшим пагоновим морфогене-
зом спостерігали в усіх досліджуваних видів. Найбільшою регенерацій-
ною здатністю характеризувався A. hippocastanum (рис. 3).
Встановлено, що оптимальною придатною схемою стерилізації лист-
кових пластинок рослин роду Aesculus L. є послідовна обробка експлан-
134
Т.Н. ЧЕЧЕНЕВА, Е.Е. ШАВАНОВА, С.П. МАШКОВСКАЯ
Физиология и биохимия культ. растений. 2010. Т. 42. № 2
Рис. 1. Вплив стерилізаційного агента на життєздатність експлантатів:
на осі абсцис — різні види гіркокаштана; на осі ординат — частка життєздатних експлантатів, %
Рис. 2. Здатність різних видів гіркокаштана до калюсоутворення:
на осі абсцис — різні види гіркокаштана; на осі ординат — частка експлантатів, що утворили калюс, %
«Білизна» Мертіолят Н2О2%
80
60
40
20
0
80
60
40
20
0
%
A. hippocastanum A. octandra A. neglecta A. parviflora A. glabra A. pavia
татів упродовж 15 с у
70° розчині етанолу,
промивання дисти-
льованою водою та
занурення у 15 %-й
розчин комерційного
препарату «Білизна»
на 15 хв.
Усі шість протес-
тованих видів гірко-
каштана можуть бути
введені в ізольовану
культуру й утворюють
тотипотентний калюс
із листкової пластин-
ки на модифіковано-
му поживному сере-
довищі МС.
1. Акимов И.А., Зерова М.Д., Гершензон З.С. Первое сообщение о появлении в Украине ка-
штановой минирующей моли Cameraria ohridella (Lipidoptera, Gracillariidae) на конском
каштане обыкновенном Aesculus hippocastanum L. (Hippocastanaceae) // Вестн. зоо-
логии. — 2003. — 37, № 1. — С. 3—12.
2. Алентьев П.Н., Троян А.В., Задорожный И.М. Каштан // Садоводство. — 1973. — № 11. —
С. 33.
3. Волошин М.П. Конский каштан (Aesculus L.) на Украине // Бюл. Главн. бот. сада. —
1961. — Вып. 44. — С. 28—31.
4. Григорюк I.П., Машковська С.П., Яворовський П.П., Колесніченко О.В. Біологія каш-
танів. — К.: Логос, 2004. — 379 с.
5. Джонс О.П. Размножение хозяйственно важных древесных растений in vitro //
Биотехнология сельскохозяйственных растений. — М.: ВО Агропромиздат, 1987. —
С. 134—152.
6. Кушнір Г.П., Сарнацька В.В. Мікроклональне розмноження рослин. Теорія і практика. —
К.: Наук. думка, 2005. — 243 с.
7. Шаванова К.Є., Огороднійчук Ю.О., Машковська С.П., Чеченєва Т.М. Можливості та
перспективи введення в культуру in vitro різних видів каштанів // Матеріали I наук.-
практ. конф. «Рослини та урбанізація» (Дніпропетровськ, 21—23 лист., 2007). —
Дніпропетровськ, 2007. — С. 234—235.
Отримано 21.05.2009
ВВЕДЕНИЕ В КУЛЬТУРУ IN VITRO РАЗНЫХ ВИДОВ КОНСКОГО КАШТАНА
Т.Н. Чеченева,1,2 Е.Е. Шаванова,1 С.П. Машковская1
1Национальный университет биоресурсов и природопользования Украины, Киев
2Институт физиологии растений и генетики Национальной академии наук Украины, Киев
Исследована эффективность разных методов стерилизации, выбран самый эффективный
из них, определены условия введения и культивирования шести видов конского каштана
(Aesculus L.).
135
ВВЕДЕННЯ В КУЛЬТУРУ IN VITRO РIЗНИХ ВИДIВ ГIРКОКАШТАНА
Физиология и биохимия культ. растений. 2010. Т. 42. № 2
Рис. 3. Пагоновий морфогенез із калюсу A. hippocastanum
CULTURE IN VITRO INDUCTION OF DIFFERENT SPECIES AESCULUS L.
T.M. Checheneva,1, 2 K.E. Shavanova,1 S.P. Mashkovska1
1National University of Life and Environmental Sciences of Ukraine
15 Heroyiv Oborony St., Kyiv, 03041, Ukraine
2Institute of Plant Physiology and Genetics, National Academy of Sciences of Ukraine
31/17 Vasylkivska St., Kyiv, 03022, Ukraine
Effectivity of different sterilization methods was researched, among them the most effective was
chosen; introduction and cultivation conditions for six species of Aesculus L. were determined.
Key words: Aesculus L., culture in vitro, sterilization, callus.
136
Т.Н. ЧЕЧЕНЕВА, Е.Е. ШАВАНОВА, С.П. МАШКОВСКАЯ
Физиология и биохимия культ. растений. 2010. Т. 42. № 2
|