Выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий при криоконсервации и лиофилизации
Gespeichert in:
| Datum: | 2012 |
|---|---|
| Hauptverfasser: | , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2012
|
| Schriftenreihe: | Проблемы криобиологии |
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/68605 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий при криоконсервации и лиофилизации / А.Д. Герасимович, Г.И. Новик // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 315. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-68605 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-686052014-09-27T03:01:47Z Выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий при криоконсервации и лиофилизации Герасимович, А.Д. Новик, Г.И. Стендовые доклады 2012 Article Выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий при криоконсервации и лиофилизации / А.Д. Герасимович, Г.И. Новик // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 315. — рос., англ. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/68605 ru Проблемы криобиологии Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Стендовые доклады Стендовые доклады |
| spellingShingle |
Стендовые доклады Стендовые доклады Герасимович, А.Д. Новик, Г.И. Выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий при криоконсервации и лиофилизации Проблемы криобиологии |
| format |
Article |
| author |
Герасимович, А.Д. Новик, Г.И. |
| author_facet |
Герасимович, А.Д. Новик, Г.И. |
| author_sort |
Герасимович, А.Д. |
| title |
Выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий при криоконсервации и лиофилизации |
| title_short |
Выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий при криоконсервации и лиофилизации |
| title_full |
Выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий при криоконсервации и лиофилизации |
| title_fullStr |
Выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий при криоконсервации и лиофилизации |
| title_full_unstemmed |
Выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий при криоконсервации и лиофилизации |
| title_sort |
выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий при криоконсервации и лиофилизации |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| publishDate |
2012 |
| topic_facet |
Стендовые доклады |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/68605 |
| citation_txt |
Выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий при криоконсервации и лиофилизации / А.Д. Герасимович, Г.И. Новик // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 315. — рос., англ. |
| series |
Проблемы криобиологии |
| work_keys_str_mv |
AT gerasimovičad vyživaemostʹbakteriofagovfitopatogennyhbakterijprikriokonservaciiiliofilizacii AT novikgi vyživaemostʹbakteriofagovfitopatogennyhbakterijprikriokonservaciiiliofilizacii |
| first_indexed |
2025-07-05T18:27:29Z |
| last_indexed |
2025-07-05T18:27:29Z |
| _version_ |
1836832574184357888 |
| fulltext |
315
Выживаемость бактериофагов фитопатогенных бактерий
при криоконсервации и лиофилизации
А.Д. ГЕРАСИМОВИЧ, Г.И. НОВИК
Институт микробиологии НАН Беларуси, г. Минск
Survival Rate of Bacteriophages of Phytopathogenic Bacteria
after Cryopreservation and Freeze-Drying
A.D. GERASIMOVICH, G.I. NOVIK
Institute of Microbiology of the National Academy of Sciences of Belarus, Minsk, Belarus
В промышленности и сельском хозяйстве интерес к
бактериофагам обусловлен их использованием для конт-
роля популяций бактерий, приносящих вред на произ-
водствах и поражающих сельскохозяйственные растения.
Использование различных биопрепаратов для контроля
таких бактерий является одним из перспективных мето-
дов биологической защиты растений от инфекционных
заболеваний. Для успешной разработки биопрепаратов
необходимо поддержание данных микроорганизмов в
жизнеспособном состоянии в течение длительного вре-
мени. В связи с этим важна разработка эффективных
методов консервирования бактериофагов.
Для изучения выживаемости фагов BV-50, BV-51, BV-
52 и BV-53 (из фонда Белорусской коллекции непатоген-
ных микроорганизмов Института микробиологии НАН
Беларуси) при криоконсервировании исследовали
влияние различных скоростей охлаждения (4, 100 и 400
град/мин) и криопротекторов (10%-й глицерол и 5%-й
диметилсульфоксид) на жизнеспособность бактерио-
фагов. При исследовании влияния лиофилизации на
жизнеспособность бактериофагов лизаты смешивали с
обезжиренным молоком в конечной концентрации 10%
и помещали в ампулы в количестве 200 мкл. Лиофилиза-
цию осуществляли в установке для сублимационного
высушивания «Modulyo 4K» («Edwards»). Исследовали
выживаемость бактериальных вирусов при длительном
хранении в лиофилизированном и замороженном
состоянии.
В результате исследований показано, что наибольший
уровень выживаемости достигается при замораживании
фагов со скоростью охлаждения 400 град/мин и состав-
ляет 61–76%. В других вариантах опыта титр вирусов
снижался на 1 порядок. Наиболее выраженными криоза-
щитными свойствами обладает глицерол. Выживаемость
бактериофагов в данных условиях увеличивается на 8–
17%.
Лиофилизация обеспечивает выживаемость иссле-
дуемых фагов на уровне 70%. В среднем количество жиз-
неспособных вирионов составляет 108–109 БОЕ/мл. Титр
наиболее чувствительных фагов снижается на 1–2 по-
рядка. При длительном хранении фагов (в течение 6 ме-
сяцев) установлено, что оптимальным для фагов Pf-1,
Pf-2, Pf-3 является хранение при –70°С, а для фага Pf-4 –
–20°С. Наибольшей устойчивостью при хранении в лио-
филизированном состоянии обладают бактериофаги
Pf-1, Pf-2 и Pf-4.
Таким образом, оптимальным режимом длительного
хранения бактериофагов является замораживание со
сверхбыстрой скоростью охлаждения с последующим
хранением фагов Pf-1, Pf-2 и Pf-3 при температуре –70°С,
а фага Pf-4 – при –20°С. Лиофилизация обеспечивает
меньшую выживаемость фагов, но также может исполь-
зоваться.
In industry and agriculture the interest to bacteriopha-
ges is stipulated by their application in controling the
populations of bacteria, making harm in industries and
injuring the agricultural plants. Application of different bio-
preparations to control these bacteria is one of the most
perspective methods of biological protection of plants from
infection diseases. For successful developing of bioprepa-
rations it is necessary to maintain these microorganisms in
viable state for a long time period. In this connection the
developing of effective methods of bacteriophages’ cryo-
preservation is important.
To study the survival rate of phages BV-50, BV-51, BV-
52 and BV-53 (from the Belarusian collection of non-patho-
genic microorganisms at the Institute of Microbiology of
the National Academy of Sciences of Belarus) during cryo-
preservation there was studied the effect of different cooling
rates (4, 100 and 400 deg/min) as well as the effect of cryopro-
tectants (10% glycerol and 5% dimethyl sulfoxide) on via-
bility of bacteriophages. When investigating the effect of
freeze-drying on viability of bacteriophages the lysates were
mixed with skimmed milk in final concentration of 10% and
placed into the ampoules in the amount of 200 ml. Lyophi-
lization was performed by means of the Modulyo 4K freeze-
dryer (Edwards, UK). The survival rate of bacterial viruses
after long-term storage in frozen-dried and frozen states
was studied.
As a result of the investigations it has been shown that
the highest survival rate is achieved when freezing the pha-
ges with cooling rate of 400 deg/min and makes 61–76%. In
other experimental variants the titre of viruses reduced by
1 order. Glycerol possesses the most manifested cryoprotec-
tive properties. Survival rate of bacteriophages under these
conditions increases by 8–17%.
Freeze-drying provides the survival rate of the studied
phages at the level of 70%. In average the number of viable
virions makes 108–109 PFU /ml. The titre of most sensitive
phages reduces by 1–2 orders. During long-term storage of
phages (for 6 months) it has been established that the optimal
for phages Pf-1, Pf-2, Pf-3 is the storage at –70°C and –20°C
for the phage Pf-4. The highest survival after storage in
frozen-dried state was found in bacteriophages Pf-1, Pf-2
and Pf-4.
Thus an optimal regimen of long-term storage of bacte-
riophages is freezing with ultra-rapid cooling rate with fol-
lowing storage of the phages Pf-1, Pf-2 and Pf-3 at –70°C
and at –20°C for Pf-3 phage. Freeze-drying provides lower
survival rate of phages, but also can be used.
problems
of cryobiology
Vol. 22, 2012, №3
проблемы
криобиологии
Т. 22, 2012, №3
|