Эффективность ген-активированного остеопластического материала с плазмидными ДНК, содержащими ген VEGF, в замещении костных дефектов
Збережено в:
| Дата: | 2013 |
|---|---|
| Автори: | , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2013
|
| Назва видання: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/68768 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Эффективность ген-активированного остеопластического материала с плазмидными ДНК, содержащими ген VEGF, в замещении костных дефектов / Р.В. Деев, И.Я. Бозо, А.Ю. Дробышев, А.А. Исаев // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 4. — С. 355-358. — Бібліогр.: 7 назв. — рос., англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-68768 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-687682014-10-07T14:58:39Z Эффективность ген-активированного остеопластического материала с плазмидными ДНК, содержащими ген VEGF, в замещении костных дефектов Деев, Р.В. Бозо, И.Я. Дробышев, А.Ю. Исаев, А.А. День стволовой клетки. краткие сообщения 2013 Article Эффективность ген-активированного остеопластического материала с плазмидными ДНК, содержащими ген VEGF, в замещении костных дефектов / Р.В. Деев, И.Я. Бозо, А.Ю. Дробышев, А.А. Исаев // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 4. — С. 355-358. — Бібліогр.: 7 назв. — рос., англ. 2307-6143 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/68768 612.753, 617-089.844 ru Проблемы криобиологии и криомедицины Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
День стволовой клетки. краткие сообщения День стволовой клетки. краткие сообщения |
| spellingShingle |
День стволовой клетки. краткие сообщения День стволовой клетки. краткие сообщения Деев, Р.В. Бозо, И.Я. Дробышев, А.Ю. Исаев, А.А. Эффективность ген-активированного остеопластического материала с плазмидными ДНК, содержащими ген VEGF, в замещении костных дефектов Проблемы криобиологии и криомедицины |
| format |
Article |
| author |
Деев, Р.В. Бозо, И.Я. Дробышев, А.Ю. Исаев, А.А. |
| author_facet |
Деев, Р.В. Бозо, И.Я. Дробышев, А.Ю. Исаев, А.А. |
| author_sort |
Деев, Р.В. |
| title |
Эффективность ген-активированного остеопластического материала с плазмидными ДНК, содержащими ген VEGF, в замещении костных дефектов |
| title_short |
Эффективность ген-активированного остеопластического материала с плазмидными ДНК, содержащими ген VEGF, в замещении костных дефектов |
| title_full |
Эффективность ген-активированного остеопластического материала с плазмидными ДНК, содержащими ген VEGF, в замещении костных дефектов |
| title_fullStr |
Эффективность ген-активированного остеопластического материала с плазмидными ДНК, содержащими ген VEGF, в замещении костных дефектов |
| title_full_unstemmed |
Эффективность ген-активированного остеопластического материала с плазмидными ДНК, содержащими ген VEGF, в замещении костных дефектов |
| title_sort |
эффективность ген-активированного остеопластического материала с плазмидными днк, содержащими ген vegf, в замещении костных дефектов |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| publishDate |
2013 |
| topic_facet |
День стволовой клетки. краткие сообщения |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/68768 |
| citation_txt |
Эффективность ген-активированного остеопластического материала с плазмидными ДНК, содержащими ген VEGF, в замещении костных дефектов / Р.В. Деев, И.Я. Бозо, А.Ю. Дробышев, А.А. Исаев // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 4. — С. 355-358. — Бібліогр.: 7 назв. — рос., англ. |
| series |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| work_keys_str_mv |
AT deevrv éffektivnostʹgenaktivirovannogoosteoplastičeskogomaterialasplazmidnymidnksoderžaŝimigenvegfvzameŝeniikostnyhdefektov AT bozoiâ éffektivnostʹgenaktivirovannogoosteoplastičeskogomaterialasplazmidnymidnksoderžaŝimigenvegfvzameŝeniikostnyhdefektov AT drobyševaû éffektivnostʹgenaktivirovannogoosteoplastičeskogomaterialasplazmidnymidnksoderžaŝimigenvegfvzameŝeniikostnyhdefektov AT isaevaa éffektivnostʹgenaktivirovannogoosteoplastičeskogomaterialasplazmidnymidnksoderžaŝimigenvegfvzameŝeniikostnyhdefektov |
| first_indexed |
2025-07-05T18:33:55Z |
| last_indexed |
2025-07-05T18:33:55Z |
| _version_ |
1836832979679182848 |
| fulltext |
УДК 612.753, 617-089.844
Р.В. Деев1, И.Я. Бозо1,2*, А.Ю. Дробышев2, А.А. Исаев1
Эффективность ген-активированного остеопластического материала
с плазмидными ДНК, содержащими ген VEGF, в замещении костных дефектов#
UDC 612.753, 617-089.844
R.V. Deev1, I.Ya. Bozo1,2*, A.Yu. Drobyshev2, A.A. Isaev1
Efficiency of Gene-Activated Osteoplastic Material with Plasmid DNA
Containing VEGF Gene for Bone Defects Healing#
Ключевые слова: репаративный остеогенез, генная индукция, ДНК-плазмиды, ген vegf, краниальные дефекты.
Ключові слова: репаративний остеогенез, генна індукція, ДНК-плазміди, ген vegf, краніальні дефекти.
Key words: reparative osteogenesis, gene induction, plasmid DNA, vegf gene, cranial defects.
*Адрес для корреспонденции:
ул. Губкина, д. 3, стр. 2, Москва, Россия 119333;
электронная почта: Ilya-bozo-1989@yandex.ru
*Address for correspondence:
3 Bld. 2, Gubkina str., Moscow, Russia 119333;
e-mail: Ilya-bozo-1989@yandex.ru
1Human Stem Cells Institute, Moscow, Russia
2A.I. Evdokimov Moscow State University of Medicine and Den-
tistry, Moscow, Russia
1Институт cтволовых клеток человека, г. Москва
2Московский государственный медико-стоматологический
университет им. А.И. Евдокимова
Поступила 15.06.2013
Принята в печать 01.12.2013
Проблемы криобиологии и криомедицины. – 2013. – Т. 23, №4. – С. 355–358.
© 2013 Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины
Received June, 15, 2013
Accepted December, 1, 2013
Problems of Cryobiology and Cryomedicine. – 2013. – Vol. 23, Nr. 4. – P. 355–358.
© 2013 Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
Детальное понимание механизмов регуляции
репаративной регенерации тканей имеет высокое
прикладное значение, так как служит теоретической
основой для разработок новых лекарственных
средств, медицинских изделий и способов лечения
пациентов с повреждениями тканей и (или) органов.
Применительно к костным тканям подробно описаны
факторы регуляции остеогенеза, действующие на
разных уровнях – генном, локальном и системном –
в разные периоды онтогенеза (как в пре-, так и в
постнатальном) [1]. В связи с этим, адекватное ис-
пользование основных остеогенных факторов может
позволить добиться более высокой выраженности
восстановительного процесса в области костного
дефекта (или атрофии костной ткани), что крайне
востребовано в клинической практике – в травмато-
логии и ортопедии, хирургической стоматологии и
челюстно-лицевой хирургии [2–4].
В зависимости от природы остеогенных факторов,
исследуемых в качестве индукторов репаративного
процесса, в рамках биомедицинских технологий
сформировались три подхода: постгеномный, кле-
точный и генный. Генная индукция репаративного
остеогенеза является наименее изученной, все ис-
следования находятся лишь на доклиническом этапе,
в связи с чем разрешенных для клинического приме-
нения медицинских изделий, содержащих генные
конструкции, нет.
Определенные предпосылки для внедрения ре-
зультатов исследований в рамках генного подхода в
клиническую практику были сформированы в России
Comprehensive understanding of the mechanisms re-
gulating reparative regeneration of tissues is of high practical
value, since this could serve as a theoretical basis to de-
velop new medications, medical devices and methods for
treating patients suffering tissue and/or organ injuries.
Concerning bone tissue, there is a detailed information
about osteogenesis regulating factors, which act at diffe-
rent levels, i.e. genetic, local and systemic ones, and at
different periods of ontogenesis (both pre- and postnatal)
[1]. In this regard, a proper application of basic osteo-
genic factors may stimulate the recovery processes in the
area of bone injury (or atrophy of bone tissue), which is
extremely demanded in clinics: in traumatology, ortho-
pedics, dental surgery, and maxillofacial surgery [2–4].
Depending on the nature of osteogenic factors, being
a potential inducers of reparative process, biomedical tech-
nologies have three approaches: post-genomic, cellular
and genetic ones. Gene induction of reparative osteoge-
nesis is the least explored, all the studies are only at the
preclinical stage, and therefore there no medical devices
containing gene constructs allowed for the clinical use.
Certain prerequisites for the implementation in clinical
practice of research results obtained within the genetic
approach have been formed in Russia by our research
group. In particular, we have developed and registered
in Russia and Ukraine the world’s first gene drug (Neo-
vaskulgen), which expressed angiogenic activity and
could be used in clinics for treatment of patients with
chronic lower limb ischemia [5]. The main active sub-
stance of the drug is plasmid DNA with the gene enco-
ding vascular endothelial growth factor (VEGF165).
день стволовой клетки. краткое сообщение stem cell day. short communication
#This reseach was presented at minisymposium Stem Cell Day, held
in Kiev, Ukraine, on the 24th of May, 2013.
#Данное исследование было представлено на минисимпозиуме
«День стволовой клетки», проходившем 24 мая 2013 года в
г. Киеве.
нашей исследовательской группой. В частности,
разработан и зарегистрирован на территории России
и Украины первый в мире генный препарат («Неовас-
кулген»), обладающий выраженной ангиогенной ак-
тивностью и показанный для лечения пациентов с хро-
нической ишемией нижних конечностей [5]. Основное
действующее вещество препарата – плазмидные ДНК
с геном, кодирующим сосудистый эндотелиальный
фактор роста (VEGF165). Если учитывать, что ангио-
генез за счет повышения парциального давления кис-
лорода и привнесения камбиальных клеток в зону
костного дефекта является критически значимым
фактором, индуцирующим репаративный остеогенез
[7], то использование плазмидных ДНК с vegf в ка-
честве биологически активных компонентов ген-ак-
тивированных остеопластических материалов теоре-
тически оправдано.
В этой связи наше исследование было нацелено
на разработку частного варианта технологии генной
индукции репаративного остеогенеза плазмидными
ДНК с vegf, а также оценку эффективности реализации
их терапевтического действия.
В ходе лабораторного этапа выполнено совмеще-
ние плазмидных ДНК с носителями различной при-
роды, в том числе аллогенным деминерализованным
костным матриксом, композиционным материалом из
коллагена и гидроксиапатита, ксеногенным депротеи-
низированным костным матриксом, синтетическим β-
трикальцийфосфатом и др. С помощью флуоресцент-
ной спектрофотометрии определяли максимальные
концентрации плазмидных ДНК, которые могли быть
совмещены с каждым из исследуемых носителей,
выбирали два варианта с наибольшей емкостью для
нуклеиновых кислот.
Выбранные варианты матриксов использовали
для создания ген-активированных костных графтов
(ГАКГ). В ряде случаев в качестве биологически ак-
тивного компонента материалов применяли двухкас-
сетные ДНК-плазмиды, которые наряду с vegf содер-
жали ген зеленого флуоресцентного белка (GFP) для
идентификации трансфекции клеток in vivo. Получен-
ные материалы были исследованы в эксперименте на
кроликах (n = 34), каждому из которых выполняли
двусторонние симметричные дефекты (диаметром
10 мм) теменных костей: дефекты правых теменных
костей заполняли ГАКГ (экспериментальные группы
1 и 2), а левых – носителем без ДНК-плазмид (соот-
ветствующие контрольные группы 1 и 2). Результаты
оценивали через 15, 30, 45, 60, 90 суток с использо-
ванием компьютерной томографии (КТ), гистологи-
ческого, иммуногистохимического и гистоморфомет-
рического исследований. Данные гистоморфометрии
обрабатывали статистически и значимость различий
между группами определяли с помощью U-критерия
Манна-Уитни (для межгрупповых сравнений) и
критерия Вилкоксона (при сравнении показателей
одной группы на разных сроках). Для детекции
Taking into consideration that angiogenesis contributes
to increasing of oxygen partial pressure and delivery of
cambial cells into bone injury area and therefore is a
critical factor in reparative osteogenesis induction [7],
using of plasmid DNA vectors with vegf as active com-
ponents of gene activated osteoplastic materials is theore-
tically justified.
In this regard, our study was directed to develop a
particular case of the technology of gene induction of
reparative osteogenesis using plasmid DNA with vegf,
as well as to evaluate their therapeutic effect.
At the first laboratory step we performed the embed-
ding of plasmid DNA into scaffolds of different nature,
including allogenic demineralized bone matrix, collagen
and hydroxyapatite composite, deproteinized xenogenic
bone matrix, synthetic β-tricalcium phosphate etc. The-
reafter fluorescence spectrophotometry was used to es-
timate maximum concentration of plasmid DNA uptaken
by each of the investigated carriers and two types of
scaffolds with the largest capacity for the nucleic acids
were chosen.
The chosen samples were used to create gene activated
bone grafts (GABG). In some cases, the biologically ac-
tive component of the graft was double cassette DNA
vector, where vegf gene was accompanied with the green
fluorescent protein gene (GFP) to detect the transfection
of cells in vivo. The resulted samples were used in an
experiment in rabbits (n = 34): parietal bones of each
animal were subjected to a bilateral symmetrical injuries
(of 10 mm diameter): the right parietal bone defects were
filled with GABG (experimental groups 1 and 2) and left
ones were grafted with carriers without plasmid DNA
(corresponding control groups 1 and 2). The outcomes
were evaluated in 15, 30, 45, 60, and 90 days using
computed tomography (CT), histological, immunohisto-
chemical and histomorphometric studies. Histomorpho-
metry data were statistically processed and significance
of the differences between groups was determined by
Mann-Whitney U-test (for intergroup comparisons) and
Wilcoxon test (comparison of the data within one group
at different stages). Cell transfection with plasmid DNA
of grafted GABG was identified immuno-histochemically
using antibodies for GFP, and for the visualization of
vessels the reaction with antibodies for α-SMA was
performed. All the experiments were conducted in
compliance with the bioethical principles and biosafety
regulations.
The studies allowed to select two types of carriers
presented the maximum capacity for plasmid DNA which
was thereafter used to create GABG: collagen and hydro-
xyapatite composite (GABG1; experimental and control
groups 1) and deproteinized xenogenic bone matrix
(GABG2; experimental and control groups 2) with DNA
uptake of 176 and 116.4 ng/mg, respectively.
In 15 days after grafting no significant differences
according CT data between regenerates of the right and
356 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue 4, 2013
трансфекции клеток плазмидами ГАКГ использовали
иммуногистохимический анализ с антителами к GFP,
для визуализации сосудов – реакцию с антителами к
α-SMA. Все эксперименты выполнены с соблюде-
нием принципов биоэтики и норм биологической бе-
зопасности.
В результате проведенных исследований выбрали
два типа носителей с максимальной емкостью для
плазмидных ДНК, которые затем использовали для
создания ГАКГ: композиционный материал из колла-
гена и гидроксиапатита (ГАКГ1; экспериментальная
и контрольная группы 1), а также ксеногенный депро-
теинизированный костный матрикс (ГАКГ2; экспери-
ментальная и контрольная группы 2) с емкостями 176
и 116,4 нг/мг соответственно.
Через 15 суток существенной разницы по данным
КТ между регенератами правой и левой теменных
костей не выявлено; плотность регенерата соответст-
вовала плотности рыхлой волокнистой соединитель-
ной ткани; в ткани регенерата наблюдали частицы с
повышенной рентгенконтрастностью – фрагменты
носителей. Через 30 суток после использования ГАКГ1
размеры дефектов уменьшались в среднем на 1–3 мм,
их контуры были неровными. В контрольной группе 1
границы дефектов также становились менее четки-
ми, в сравнении со сроком наблюдения 15 суток; изна-
чальная округлая форма и размеры сохранялись.
В целом, на всех сроках наблюдения в эксперимен-
тальных группах рентгенконтрастность регенерата
была выше, а размеры видимого дефекта теменной
кости меньше, чем в контрольныx группах.
Результаты КТ подтверждены гистологическими
данными. Через 15 суток во всех группах дефекты
были заполнены реактивно измененной волокнистой
соединительной тканью, включавшей фрагменты но-
сителей. Со стороны костных опилов наблюдали тон-
кий слой регенерата из ретикулофиброзной костной
ткани. В зоне репаративного остеогенеза эксперимен-
тальной группы выявлены GFP+-клетки, что подтвер-
ждало высвобождение плазмидных ДНК из струк-
туры материалов, поступление в клетки-мишени и
экспрессию в них. В экспериментальных группах
наблюдался более выраженный ангиогенез, что может
быть обусловлено повышенной экспрессией VEGF в
экспериментальных группах за счет плазмидных ДНК.
Начиная с 30-х суток, на всех сроках наблюдения
при использовании ГАКГ определялся более выра-
женный репаративный остеогенез (т.е. больший объем
костного регенерата) со стороны костных опилов, по
сравнению с контролем. Примечательно, что фраг-
менты ГАКГ, расположенные в центральной части де-
фектов, были окружены новообразованной костной
тканью, что являлось прямым подтверждением остео-
индуктивного действия материала (рисунок). При
использовании материалов без плазмидных ДНК
остеоиндуктивного действия не наблюдалось, реге-
нерат образовывался только со стороны костных опи-
left parietal bones were found; density of regenerate was
similar to the one of loose fibrous connective tissue;
inside the regenerate tissue we observed highly radio-
paque particles, considered as fragments of the carriers.
In 30 days after implantation of GABG1 the dimensions
of injuries were decreased by 1–3 mm in average, their
outlines became jagged. In the control group 1, the edges
of the injuries also become less distinct if compared
with day 15; initial rounded shape and size were preser-
ved. Generally, during whole observation term radio-
pacity of regenerates in the experimental groups was
higher and the dimensions of the visible injury of the
parietal bone were less than that in the control groups.
Computed tomography data were confirmed histo-
logically. In 15 days after grafting the defects in all the
groups were filled with fibrous connective tissue with
reactive changes, which included the fragments of carriers.
Along the bonesaw-line we observed the thin layer of
regenerate bone consisted of reticular fibrous bone tissue.
In the areas of reparative osteogenesis in experimental
group we found GFP+ cells, that confirmed the release
of plasmid DNA from the scaffold, its delivery into target
cells and expression therein. The experimental groups we-
re characterized with more evident angiogenesis, which
may be caused by increased expression of VEGF in the
experimental groups due to the presence of plasmid DNA.
Starting from day 30 after grafting all the observation
terms were characterized by more pronounced reparative
Регенерат в области костных дефектов на 30-е сутки после
имплантации: A – экспериментальная группа 1 (ГАКГ1), B –
контрольная группа 1 (носитель без плазмид); ×100; окраска
по Массону-Голднеру.
Regenerate in bone injury area on day 30 after grafting: A –
experimental group 1 (GABG1), B – 1 control group (carrier without
plasmid DNA); ×100; staining according to Masson-Goldner.
A
B
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue 4, 2013
357
лов. Необходимо отметить, что, начиная с 45-х суток,
наибольший объем костного регенерата выявляли в
экспериментальной группе 2, т. е. ксеногенный депро-
теинизированный костный матрикс, выбранный в ка-
честве носителя для плазмидных ДНК, обладал боль-
шим остеокондуктивым действием, по сравнению с
композиционным матриксом из коллагена и гидро-
ксиапатита.
Проведенный гистоморфометрический анализ
подтвердил данные гистологических наблюдений:
объем костного регенерата в группах с ГАКГ был
значимо выше (p < 0,05) по сравнению с контрольны-
ми группами. Полученные нами данные согласуют-
ся с результатами других исследований в рамках ген-
ной индукции репаративного остеогенеза [6].
Таким образом, экспериментально показана воз-
можность успешной генной индукции репаративного
остеогенеза с помощью плазмидных ДНК с геном
vegf, введенных в область дефекта. Степень восста-
новления целостности костной ткани в зоне дефекта
зависела не только от воздействия биологически ак-
тивных компонентов – генных конструкций, но и от
выраженности остеокондуктивных свойств носителя.
Успешные результаты экспериментов закладывают
основу для будущих клинических исследований.
osteogenesis (in terms of bigger amount of bone regene-
rate) along bonesaw-line in case of GABG if compared
with the control. It was noteworthy that GABG frag-
ments located in the central part of the defects were
surrounded by newly formed bone tissue, that could be
a direct confirmation of osteoinductive action of the graft
(Figure). Application of the grafts without plasmid DNA
did not allow to see any osteoinductive action: regene-
rate was formed only along the bonesaw-line. It should
be noted that, starting from the 45th day the greatest
amount of bone regenerate was found in the experimental
group 2, i. e. xenogenic deproteinized bone matrix selec-
ted as a carrier for the plasmid DNA possessed higher
osteoinductive effect if compared with collagen and
hydroxyapatite composite.
Performed histomorphometric analysis confirmed the
data of histological observation: volume of bone rege-
nerate bone in groups with GABG implantation was signi-
ficantly higher (p < 0,05) if compared with the control
groups. Our findings are consistent with the reported
data of studies concerned with gene induction of repara-
tive osteogenesis [6].
Collectively, the possibility of successful gene induc-
tion of reparative osteogenesis using plasmid DNA vec-
tors with vegf gene, introduced into the injured area,
was experimentally demonstrated. Amplitude of bone
tissue integrity restoration in the injured zone depended
both on the effect of biologically active components,
i.e. the gene constructs, and the expression of osteocon-
ductive properties of the carrier as well. Successful out-
comes of the experiments lay the foundation for future
clinical studies.
358 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue 4, 2013
Литература
1. Гололобов В.Г., Дулаев А.К., Деев Р.В. и др. Морфо-
функциональная организация, реактивность и регене-
рация костной ткани. – СПб, 2006. – 47 с.
2. Дробышев А.Ю. Клинико-экспериментальное обоснова-
ние применения биокомпозиционных материалов при
костно-восстановительных операциях на челюстях:
Дисс. … на соиск. ст. д-ра. мед. наук. – М.: МГМСУ, 1999. –
248 с.
3. Дробышев А.Ю., Киселев А.А. Применение дистракцион-
ного метода у больных при дефектах и атрофии альвео-
лярной части нижней челюсти. – М., 2007. – 62 с.
4. Хирургическая стоматология и челюстно-лицевая хирур-
гия. Национальное руководство / Под ред. Л.А. Кулакова,
Т.Г. Робустовой, Л.И. Неробеевой. – М.: «ГЭОТАР-Медиа»,
2010. – 928 с.
5. Червяков Ю.В., Староверов И.Н., Нерсесян Е.Г. и др. Тера-
певтический ангиогенез в лечении больных с хроничес-
кими облитерирующими заболеваниями артерий нижних
конечностей: ближайшие и отдаленные результаты //
Ангиология и сосудистая хирургия. – 2012. – Т. 18, №3. –
С.19–27.
6. Geiger F., Bertram H., Berger I. et al. Vascular endothelial
growth factor gene-activated matrix (VEGF165-GAM) enhan-
ces osteogenesis and angiogenesis in large segmental bone
defects // J. Bone Miner. Res. – 2005. – Vol. 20, №11. – P. 2028–
2035.
7. Krompecher S. Reaction of tissue differentiation to various
effects in granulating bone surface, particularly in callus forma-
tion // Langenbecks Arch. Klin. Chir. Ver. Dtsch. Z. Chir. –
1956. – Vol. 281, №5. – P. 472–512.
References
1. Gololobov V.G., Dulayev A.K., Deev R.V. et al. Morphofunctional
organization, reactivity and regeneration of bone tissue. –
St.-Petersburg, 2006. – 47 p.
2. Drobyshev A.Yu. Clinical and experimental substantiation of
biocomposite material application for bone-reconstructive sur-
geries in jaws: Disseration of Dr. Med. Sci. – Moscow: Moscow
State University of Medicine and Dentistry, 1999. – 248 p.
3. Drobyshev A.Yu., Kiselev A.A. Application of distraction method
in patients with defects and atrophies of mandibular sinus
floor. – Moscow, 2007. – 62 p.
4. Dental and maxillofacial surgery. National guidelines / Ed by.
L.A. Kulakov, T.G. Robustova, L.I. Nerobeeva. – Moscow:
GEOTAR-Media, 2010. – 928 p.
5. Cherviakov Iu.V., Staroverov I.N., Nersesian E.G. et al. Thera-
peutic angiogenesis in treatment of patients with chronic oblite-
rating diseases of lower limb arteries // Angiol. Sosud. Khir. –
2012. – Vol. 18, N3. – P. 19–27.
6. Geiger F., Bertram H., Berger I. et al. Vascular endothelial growth
factor gene-activated matrix (VEGF165-GAM) enhances osteo-
genesis and angiogenesis in large segmental bone defects // J.
Bone Miner. Res. – 2005. – Vol. 20, N11. – P. 2028–2035.
7. Krompecher S. Reaction of tissue differentiation to various effects
in granulating bone surface, particularly in callus formation //
Langenbecks Arch. Klin. Chir. Ver. Dtsch. Z. Chir. – 1956. –
Vol. 281, N5. – P. 472–512.
|