Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов

Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Datum:2008
Hauptverfasser: Волова, Л.Т., Россинская, В.В., Яценко, Т.В., Болтовская, В.В.
Format: Artikel
Sprache:Russian
Veröffentlicht: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2008
Schriftenreihe:Проблемы криобиологии и криомедицины
Schlagworte:
Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
Online Zugang:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/68945
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов / Л.Т. Волова, В.В. Россинская, Т.В. Яценко, В.В. Болтовская // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 196. — рос., англ.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-68945
record_format dspace
spelling irk-123456789-689452014-10-03T03:01:51Z Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов Волова, Л.Т. Россинская, В.В. Яценко, Т.В. Болтовская, В.В. Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» 2008 Article Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов / Л.Т. Волова, В.В. Россинская, Т.В. Яценко, В.В. Болтовская // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 196. — рос., англ. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/68945 ru Проблемы криобиологии и криомедицины Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Russian
topic Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
spellingShingle Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
Волова, Л.Т.
Россинская, В.В.
Яценко, Т.В.
Болтовская, В.В.
Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов
Проблемы криобиологии и криомедицины
format Article
author Волова, Л.Т.
Россинская, В.В.
Яценко, Т.В.
Болтовская, В.В.
author_facet Волова, Л.Т.
Россинская, В.В.
Яценко, Т.В.
Болтовская, В.В.
author_sort Волова, Л.Т.
title Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов
title_short Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов
title_full Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов
title_fullStr Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов
title_full_unstemmed Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов
title_sort простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов
publisher Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
publishDate 2008
topic_facet Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/68945
citation_txt Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов / Л.Т. Волова, В.В. Россинская, Т.В. Яценко, В.В. Болтовская // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 196. — рос., англ.
series Проблемы криобиологии и криомедицины
work_keys_str_mv AT volovalt prostojiékonomičnyjmetodkriokonservaciiéksperimentalʹnyhkletočnyhobʺektov
AT rossinskaâvv prostojiékonomičnyjmetodkriokonservaciiéksperimentalʹnyhkletočnyhobʺektov
AT âcenkotv prostojiékonomičnyjmetodkriokonservaciiéksperimentalʹnyhkletočnyhobʺektov
AT boltovskaâvv prostojiékonomičnyjmetodkriokonservaciiéksperimentalʹnyhkletočnyhobʺektov
first_indexed 2025-07-05T18:43:25Z
last_indexed 2025-07-05T18:43:25Z
_version_ 1836833577340239872
fulltext 196 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 18, 2008, №2 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 18, 2008, №2 Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов Л.Т. ВОЛОВА, В.В. РОССИНСКАЯ, Т.В. ЯЦЕНКО, В.В. БОЛТОВСКАЯ Самарский государственный медицинский университет Simple and Cost-Effective Method for Experimental Cell Object Cryopreservation L.T. VOLOVA, V.V. ROSSINSKAYA, T.V. YATSENKO, V.V. BOLTOVSKAYA Samara State Medical University, Russia Цель работы − отработка и внедрение простого и экономичного способа криоконсервации клеточных культур. Исследования проводили на клеточных культурах дермальных фибробластов и фибробластоподобных клеток из стромы гиалинового хряща человека и живот- ных. Материалом для получения клеток служили: край- няя плоть мальчиков 3–14 лет, полученная при операции циркумцизии; абортивный материал; кожа новорожден- ных крысят; суставной гиалиновый хрящ взрослых кро- ликов. Криоконсервацию выполняли в жидком азоте в сосуде Дьюара (полезный объем 6 л) с 6 цилиндрами. В качестве криопротектора использовали диметилсульфо- ксид (ДМСО) марки “хч” в концентрации 5 % от общего объема замораживаемой суспензии. Сравнивали два ва- рианта среды для замораживания клеток: с содержанием сыворотки эмбрионов коров 20% (1 серия) и 70% (2 серия). Клетки замораживали в экспоненциальной и стационарной фазе роста. Культуру клеток криоконсерви- ровали в два этапа: криопробирки помещали в моро- зильную камеру (–70°С) на 24 ч, затем погружали в жидкий азот для длительного хранения. Исследования проводили в течение 2 лет, при этом первые 6 месяцев культуры размораживали раз в месяц, затем раз в 2 меся- ца. Всего проведено 254 эксперимента. Состояние культур до и после криоконсервации оценивали при помощи морфологических и морфометрических мето- дов. Изучение морфофункциональных характеристик клеток после размораживания показало, что при крио- консервации в жидком азоте и использовании в качестве протектора ДМСО лучшие результаты во всех исследо- ванных культурах достигаются во 2-й серии эксперимен- тов (содержание сыворотки в среде для замораживания 70%). В этом случае количество жизнеспособных клеток остается постоянным и составляет 86,7±4,9% в течение всего срока эксперимента. В 1-й серии с содержанием сыворотки 20 % этот показатель сохранялся высоким в течение первых 4 месяцев, после чего интенсивно сни- жался и к концу второго года составил 48,4±2,1 %. Клетки всех исследованных культур после размораживания сохраняли форму, размеры, ядерно-цитоплазменные отношения, скорость удвоения и плотность монослоя. Таким образом, использованный нами метод не требует специальной дорогостоящей аппаратуры, эф- фективен для криоконсервации различных видов культур клеток. Our research aim was to master and introduce a sample and cost-effective way for cell culture cryopreservation. Research was carried-out in cell cultures of dermal fibroblasts and fibroblast-like cells from human and animal hyaline cartilage stroma. Cells were procured from the following materials: prepitium of 3–15 years’ old boys, obtai- ned after circumcision operation; abortive material; newborn rat’s skin; joint hyaline cartilage of mature rabbits. Cryopre- servation was performed in liquid nitrogen in Dewar vessel (6 l net volume) with 6 cylinders. “Chemically pure” graded dimethyl sulfoxide (DMSO) in 5% concentration of total volume of frozen suspension was used as cryoprotectant. We compared two variants of medium for cell freezing: with 20 and 70% bovine embryo serum (1 and 2 series, corres- pondingly). Cells were cryopreserved in both exponential and stationary growth phases. Cell culture was cryopreser- ved in two steps: cryovials were placed in a freezing chamber (–70°C) for 24 hrs, then immersed into liquid nitrogen for a long-term storage. Research was realized within 2 years, herewith the cultures were thawed once per month within the first 6 months, then once per 2 months. There were carried-out 254 experiments in total. Culture state prior to and after cryopreservation was morphologically and mor- phometrically assessed. Study of cell morphofunctional characteristics after tha- wing has demonstrated that under cryopreservation in liquid nitrogen and with DMSO as cryoprotectant the highest results in the whole studied cultures were obtained in the 2nd experimental series (70% serum content in freezing medium). In this case the amount of viable cells remains constant and makes 86.7±4.9% within all experimental term. In the 1st series (20% serum content) this index remained high within the first 4 months, then intensively reduced and was 48.4±2.1% to the second year termination. Cells in all studied cultures after thawing preserved the shape, size, nuclear and cytoplasm ratios, doubling rate and monolayer density. Thus, the method we used does not require a special expensive equipment, being efficient for different cell culture cryopreservation.

Ähnliche Einträge