Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией

Изучали действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией. Наблюдали восстановление количества лейкоцитов крови уже на первые сутки после их введения. Установлено, что криоэкстракты обладают более выраженным и пролонгированным действием, чем экстракты, не подве...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Дата:	2008
Автори:	Кузнецова, В.Г., Жегунов, Г.Ф.
Формат:	Стаття
Мова:	Russian
Опубліковано:	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2008
Назва видання:	Проблемы криобиологии и криомедицины
Теми:	Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
Онлайн доступ:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/69032
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией / В.Г. Кузнецова, Г.Ф. Жегунов // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 3. — С. 328-331. — Бібліогр.: 9 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-69032
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-690322014-10-05T03:02:03Z Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией Кузнецова, В.Г. Жегунов, Г.Ф. Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» Изучали действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией. Наблюдали восстановление количества лейкоцитов крови уже на первые сутки после их введения. Установлено, что криоэкстракты обладают более выраженным и пролонгированным действием, чем экстракты, не подвергавшиеся замораживанию. Вивчали дію екстрактів з ембріональних тканин курей на мишей з експериментальною лейкопенією. Спостерігали відновлення кількості лейкоцитів крові після введення екстрактів, що вивчали в першу добу після їх введення. Встановлено, що кріоекстракти мають більш виражену та подовжену дію, ніж екстракти, що не заморожували. The effect of extracts derived from embryonic tissues of chickens on mice with experimental leucopenia was studied. The recovery of the number of blood leucocytes even at the first 24 hrs after their introduction was observed. It has been found that cryoextracts possessed more manifested and prolonged effect versus the ones non-frozen. 2008 Article Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией / В.Г. Кузнецова, Г.Ф. Жегунов // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 3. — С. 328-331. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/69032 619: 636.028:616.155:615.324.038 ru Проблемы криобиологии и криомедицины Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
spellingShingle	Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» Кузнецова, В.Г. Жегунов, Г.Ф. Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией Проблемы криобиологии и криомедицины
description	Изучали действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией. Наблюдали восстановление количества лейкоцитов крови уже на первые сутки после их введения. Установлено, что криоэкстракты обладают более выраженным и пролонгированным действием, чем экстракты, не подвергавшиеся замораживанию.
format	Article
author	Кузнецова, В.Г. Жегунов, Г.Ф.
author_facet	Кузнецова, В.Г. Жегунов, Г.Ф.
author_sort	Кузнецова, В.Г.
title	Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией
title_short	Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией
title_full	Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией
title_fullStr	Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией
title_full_unstemmed	Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией
title_sort	действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией
publisher	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
publishDate	2008
topic_facet	Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/69032
citation_txt	Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией / В.Г. Кузнецова, Г.Ф. Жегунов // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 3. — С. 328-331. — Бібліогр.: 9 назв. — рос.
series	Проблемы криобиологии и криомедицины
work_keys_str_mv	AT kuznecovavg dejstvieékstraktovizémbrionalʹnyhtkanejkurnamyšejséksperimentalʹnojlejkopeniej AT žegunovgf dejstvieékstraktovizémbrionalʹnyhtkanejkurnamyšejséksperimentalʹnojlejkopeniej
first_indexed	2025-07-05T18:46:44Z
last_indexed	2025-07-05T18:46:44Z
_version_	1836833786015252480
fulltext	328 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 18, 2008, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 18, 2008, №3 УДК 619: 636.028:616.155:615.324.038 В.Г. КУЗНЕЦОВА, Г.Ф. ЖЕГУНОВ* Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией UDC 619: 636.028:616.155:615.324.038 V.G. KUZNETSOVA, G.F. ZHEGUNOV* Effect of Extracts From Chicken Embryonic Tissues on Mice with Experimental Leucopenia Изучали действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией. Наблюдали восстановление количества лейкоцитов крови уже на первые сутки после их введения. Установлено, что криоэкстракты обладают более выраженным и пролонгированным действием, чем экстракты, не подвергавшиеся замораживанию. Ключевые слова: эмбрионы кур, экстракты, криоконсервирование, лейкопения. Вивчали дію екстрактів з ембріональних тканин курей на мишей з експериментальною лейкопенією. Спостерігали відновлення кількості лейкоцитів крові після введення екстрактів, що вивчали в першу добу після їх введення. Встановлено, що кріоекстракти мають більш виражену та подовжену дію, ніж екстракти, що не заморожували. Ключові слова: ембріони курей, екстракти, кріоконсервування, лейкопенія. The effect of extracts derived from embryonic tissues of chickens on mice with experimental leucopenia was studied. The recovery of the number of blood leucocytes even at the first 24 hrs after their introduction was observed. It has been found that cryoextracts possessed more manifested and prolonged effect versus the ones non-frozen. Key-words: chicken embryos, cryopreservation, leucopenia. В ветеринарной медицине актуальна проблема профилактики и борьбы с массовыми вирусными болезнями животных, обусловленными вторич- ными иммунодефицитами различного происхож- дения, широким распространением латентного вирусного носительства, нарушением обменных процессов, ослабляющих иммунный статус орга- низма [1]. Поэтому при лечении и для профилак- тики таких заболеваний, а также для снятия пост- вакцинальных реакций у животных большое значе- ние придается применению иммуностимуляторов [3]. Это обусловливает необходимость разработки препаратов, корректирующих иммунный статус организма [1]. В настоящее время используются иммуности- муляторы бактериальной природы [4], а также ши- рокий спектр препаратов из тимуса [4, 9]. Недо- статками таких препаратов являются многоста- дийность и сложность их производства. Многие из них обладают нежелательным побочным дейст- вием и имеют множество противопоказаний [3]. В [1] отмечается, что сильным иммуностиму- лирующим действием обладают препараты из эмбрионов птиц, их преимуществом являются доступность технологии, а также низкий уровень побочных реакций и противопоказаний при приме- нении [1]. Эмбриональные ткани практически не иммуногенны [7]. Эффективность некоторых био- препаратов подтверждается результатами экспери- ментальных и клинических разработок [7]. Препа- раты также оказывают влияние на различные стороны метаболизма целостного организма, содержат клетки, способные выполнять замести- тельные функции [7]. Экстракты, полученные из эмбриональных тканей различных органов, после введения в организм оказывают воздействие не только на одноименные ткани, но и на другие органы и весь организм [1]. Известно, что в процессе замораживания-ото- грева в тканях происходят изменения, способст- вующие выходу биологически активных веществ и усилению активности препаратов [6]. Цель работы – получить различные экстракты из тканей эмбрионов кур и изучить их иммуно- стимулирующую активность. Материалы и методы В работе были использованы эмбрионы 9 дней развития. Выбор данного срока был обусловлен тем, что максимальную иммунологическую актив- ность эмбриональных тканей наблюдают именно в этот период [3]. * Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию: ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 373-31-26, факс: +38 (057) 373-30-84, электронная почта: cryo@online.kharkov.ua Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na- tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine * To whom correspondence should be addressed: 23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373 3126, fax: +380 57 373 3084, e-mail:cryo@online.kharkov.ua 329 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 18, 2008, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 18, 2008, №3 Получали четыре варианта экстрактов. После выемки яиц из инкубатора эмбрионы извлекали из скорлупы, освобождали от оболочек и отмывали изотоническим раствором хлористого натрия (рН 7,4). Далее эмбрионы взвешивали и разделяли на 2 группы. Первую группу гомогенизировали 5 мин на фосфатном буфере (рН 7,4) и изотоническом растворе хлористого натрия (1:1). Гомогенат цент- рифугировали при 10 000 об/мин при температуре 4°С (экстракт 1) и при 3 000 об/мин (экстракт 2). Надосадки фильтровали и хранили при температуре –196°С до применения. Вторую группу эмбрионов сначала дважды замораживали в жидком азоте (–196°С) с после- дующим размораживанием на водяной бане при температуре 37–40°С. Далее эмбрионы гомогени- зировали, центрифугировали и хранили, как описано выше (экстракты 3 и 4). Лейкопению моделировали у мышей линии СВА путем внутримышечного введения 0,125 мг/г гидрокортизона натрия. Забор крови производили из хвостовой вены экспериментальных животных. Оценку активности экстрактов проводили путем подсчета количества лейкоцитов в камере Горяева [2, 5] и на мазках, приготовленных по методу Романовского [2, 5]. Исследуемые экстракты животным вводили внутримышечно спустя 24 ч после развития лейкопении. Количество лейкоцитов в крови животных определяли в течение 13 суток. Для контроля использовали изотонический раствор хлористого натрия, экстракт из мышечной ткани взрослой курицы, экстракт из различных тканей суточного цыпленка. Экстракты, используемые как контрольные, получали аналогичным способом с исследуемыми. Всего было сформировано 15 групп животных, которым вводили: 1) экстракт 1 в концентрации 0,03 мг белка/г массы тела; 2) экстракт 1 в концент- рации 0,15 мг белка/г массы тела; 3) экстракт 1 в концентрации 0,3 мг белка/г массы тела; 4) экстракт 2 в концентрации 0,03 мг белка/г массы тела; 5) экстракт 2 в концентрации 0,15 мг белка/г массы тела; 6) экстракт 2 в концентрации 0,3 мг белка/г массы тела; 7) экстракт 3 в концентрации 0,03 мг белка/г массы тела; 8) экстракт 3 в кон- центрации 0,15 мг белка/г массы тела; 9) экстракт 3 в концентрации 0,3 мг белка/г массы тела; 10) экстракт 4 в концентрации 0,03 мг белка/г массы тела; 11) экстракт 4 в концентрации 0,15 мг белка/г массы тела; 12) экстракт 4 в концентрации 0,3 мг белка/г массы тела; 13) эквивалентное количество изотонического раствора хлористого натрия; 14) мышечный экстракт; 15) экстракт из тканей ново- рожденного цыпленка. За наиболее эффективную принимали концент- рацию, после введения которой количество лейко- цитов крови экспериментальных животных воз- растало до самых высоких показателей. Результаты и обсуждение На рис. 1 представлены данные о влиянии экс- тракта 1 на скорость восстановления количества лейкоцитов в крови животных с экспериментальной лейкопенией. Так, при введении мышам экстракта в количестве 0,15 мг белка/г массы тела наблю- дали быстрое повышение количества лейкоци- тарных клеток до максимальных показателей на вторые сутки после введения экстракта, после чего постепенно уменьшалось количество лейкоцитов к 8 дню эксперимента до нормы. Введение экстракта 1 в количестве 0,03 мг белка/г массы тела не оказывало такого эффекта. Количество исследуемых кровяных клеток восстанавливалось до нормы только к 6 дню эксперимента. У жи- вотных, которые получали экстракт 1 в количестве 0,3 мг белка/г массы тела, количество лейкоцитов крови повышалось быстрее всего и ко 2 дню после введения экстракта соответствовало норме, но не превышало ее. У животных контрольной группы восстановление клеток происходило медленно и приходило в норму к 8 дню эксперимента. Наибо- лее эффективной концентрацией для экстракта 1 является 0,15 мг белка/г массы тела. При введении экстракта 2 (рис. 2) в количестве 0,15 мг белка/г массы тела количество лейкоцитов восстанавливается уже на первые сутки. Повы- шенное количество клеток сохраняется до 9 суток, а затем показатели возвращаются до нормальных. При введении исследуемого экстракта в количест- 0 100 200 300 400 500 600 700 800 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Рис. 1. Действие различных концентраций экстракта 1 на динамику восстановления лейкоцитов у животных с экспериментальной лейкопенией: ◆ – 0,03 мг белка/г массы тела; ■ – 0,15 мг белка/г массы тела; ▲ – 0,3 мг белка/г массы тела; × – NaCl; * – введение гидрокортизона натрия; ** – введение экстракта. Срок наблюдения, сутки Ко ли че ст во к ле то к в м м3 * ** 330 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 18, 2008, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 18, 2008, №3 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Ко ли че ст во к ле то к в м м3 Срок наблюдения, сутки Рис. 2. Действие различных концентраций экстракта 2 на динамику восстановления лейкоцитов у животных с экспериментальной лейкопенией: ◆ – 0,03 мг белка/г массы тела; ■ – 0,15 мг белка/г массы тела; ▲ – 0,3 мг белка/г массы тела; × – NaCl; * – введение гидрокортизона натрия; ** – введение экстракта. 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Рис. 3. Действие различных концентраций экстракта 3 на динамику восстановления лейкоцитов у животных с экспериментальной лейкопенией: ◆ – 0,03 мг белка/г массы тела; ■ – 0,15 мг белка/г массы тела; ▲ – 0,3 мг белка/г массы тела; × – NaCl; * – введение гидрокортизона натрия; ** – введение экстракта. Срок наблюдения, сутки Ко ли че ст во к ле то к в м м3 Срок наблюдения, сутки Ко ли че ст во к ле то к в м м3 Рис. 4. Действие различных концентраций экстракта 4 на динамику восстановления лейкоцитов у животных с экспериментальной лейкопенией: ◆ – 0,03 мг белка/г массы тела; ■ – 0,15 мг белка/г массы тела; ▲ – 0,3 мг белка/г массы тела; × – NaCl; * – введение гидрокортизона натрия; ** – введение экстракта. 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 ве 0,30 мг белка/г массы тела также наблюдается восстановление количества лейкоцитов за 1 сутки, а далее их количество возрастает и возвращается до нормы к 10 суткам. При введении 0,03 мг белка/г массы тела эффект выражен слабее. Количество лейкоцитов постепенно повышается и приходит в норму к 8 дню эксперимента, как и у животных контрольной группы. Наиболее эффективной кон- центрацией для экстракта 2 является 0,15 мг белка/г массы тела. На рис. 3 показана динамика скорости восста- новления количества лейкоцитов в крови животных после введения экстракта 3. Введение данного экстракта в количестве 0,03 мг белка/г массы тела повышает количество лейкоцитов до нормы уже на вторые сутки. Далее количество клеток продол- жает увеличиваться и остается на высоком уровне до 13-х суток. При введении исследуемого экс- тракта в концентрации 0,15 мг белка/г массы тела мы также наблюдаем быстрое восстановление количества лейкоцитов. Далее происходит повыше- ние количества клеток, которое сохраняется в те- чение 10 дней. У животных, получивших экстракт 3 в концентрации 0,3 мг белка/г массы тела, количество лейкоцитов возрастает до нормы так- же на 2 день после введения экстракта, далее повышается и остается на высоком уровне до кон- ца эксперимента. Наиболее эффективной концен- трацией в данном случае является 0,3 мг белка/г массы тела. При анализе данных, полученных после введе- ния экстракта 4 (рис. 4), нами было установлено, что восстановление количества лейкоцитов проис- ходит подобно экстракту 3. Однако скорость восстановления лейкоцитов была выше. Наиболее эффективной концентрацией при применении экстракта 4 является 0,15мг белка/г массы тела. Было установлено, что биологически активные вещества из гомогенатов эмбрионов обладают выраженным иммуностимулирующим действием. После введения мышам экстрактов 3 и 4 отме- чались более глубокие и стойкие изменения в крови животных. Количество лейкоцитов возрастало * * * ** 331 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 18, 2008, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 18, 2008, №3 Рис. 5. Действие контрольных экстрактов на динамику восстановления лейкоцитов у животных с эксперимен- тальной лейкопенией: ◆ – 0,03 мг белка/г массы тела; ■ – 0,15 мг белка/г массы тела; ▲ – 0,3 мг белка/г массы тела; × – NaCl; * – введение гидрокортизона натрия; ** – введение экстракта. Срок наблюдения, сутки Ко ли че ст во к ле то к в м м3 Литература Глотов А.Г., Аликин Ю.С., Нефедченко А.В. и др. О некоторых механизмах иммуномодулирующего дейст- вия вестина и фагостина при ИРТ крупного рогатого скота // Пробл. стабилизации и развития сел. хоз-ва Казахстана, Сибири и Монголии.– Новосибирск, 2000.– С. 159. Метелкин А.И., Утевский М.Л. Лабораторные кли- нические исследования.– М.: Медгиз, 1951.– 158 с. Мысачева В.И., Хомов В.В.. Сизов А.А. и др. Влияние препаратов на основе эмбриональных тканей кур на им- мунную систему // Ветеринария.– 1995.– №11.– С. 46–47. Растунова Г.А., Щербакова Э.Г., Круглова И.С. Прогидро- зан как активатор перитонеальных макрофагов // Анти- биотики.– 1981.– №6.– С. 524–544. Сахаров П.П., Метелкин А.И., Гудкова Е.И. Лабора- торные животные.– М.: Медгиз, 1952.– 283 с. Филатов В.П. Консервирование по Филатову: Моно- графия.– М.: Медгиз, 1954.– 156 с. Юрченко Т.Н., Прокопюк О.С., Ломако В.В. Клеточная и тканевая трансплантация. Биопрепараты.– Харьков, 2003.– 63 с. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Anal. Biochem.– 1976.– Vol. 72, N1-2.– Р. 248–254. Low T.L.K., Goldstein A.L. Thymosin and other thymic hormones and their synthetic analogues // Springer Seminars in Immunopathology.– 1979.– Vol. 2, N2.– Р. 169–186. Поступила 17.07.2008 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 0 100 200 300 400 500 600 700 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 максимально, причем эффект сохранялся в тече- ние 10–13 дней. При введении животным экстрак- тов, не подвергавшимся замораживанию (1 и 2), эффект развивался также быстро, однако не дости- гал таких же высоких показателей и был менее пролонгированным. Можно предположить, что замораживание способствует высвобождению мо- лекул, которые несколько повышают иммуности- мулирующую активность и эффективность экс- трактов. Таким образом, биологически активные вещества эмбриональных экстрактов тканей кур оказывают положительное влияние на функциони- рование иммунной системы животных, в частности эффективно восстанавливают лейкоциты при лече- нии экспериментальной лейкопении. Для контроля специфической эффективности эмбриональных экстрактов животным вводили экстракты из мышечной ткани взрослых кур и новорожденного цыпленка. На рис. 5 показано, что после введения экстрактов в количестве 0,15 мг белка/г массы тела количество лейкоцитов восста- навливается лучше, чем в контроле. Однако до- вольно медленно, то есть экстракты мышечной ткани взрослой курицы и новорожденного цыпленка обладают некоторым неспецифическим иммуно- стимулирующим действием, но не столь выра- женным, как экстракты из эмбриональных тканей. Под световым микроскопом нами был проведен анализ мазков крови, приготовленных по методу Романовского [2]. Лейкоцитарные клетки предс- тавлены преимущественно гранулоцитами (75%), а также лимфоцитами (20%). При развитии лейкопении и при введении экстрактов процентное соотношение клеток не изменяется. Выводы 1. Все исследуемые экстракты из эмбриональ- ных тканей кур проявляют иммуностимулирующее действие. 2. Экстракты после низкоскоростного центрифу- гирования более эффективны, чем экстракты, под- вергшиеся центрифугированию при 10000 об/мин. 3. Действие экстрактов после замораживания более пролонгированное, чем действие экстрактов, не подвергавшихся замораживанию. 4. Наиболее эффективной для исследуемых экстрактов является концентрация 0,15 мг белка/г массы тела. * ** tlk

Действие экстрактов из эмбриональных тканей кур на мышей с экспериментальной лейкопенией

Репозитарії

Схожі ресурси