Влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и монооксигеназной систем крыс при старении
В работе изучено влияние длительного введения криоконсервированных клеток фетальной печени (КФП) на динамику ряда показателей прооксидантно-антиоксидантной системы крови, состояние монооксигеназной системы печени и выживаемость крыс при старении. Установлено, что многократные инъекции КФП стареющим...
Gespeichert in:
Datum: | 2008 |
---|---|
Hauptverfasser: | , , , |
Format: | Artikel |
Sprache: | Russian |
Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
Schriftenreihe: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
Schlagworte: | |
Online Zugang: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/69065 |
Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
Zitieren: | Влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и монооксигеназной систем крыс при старении / О.В. Оченашко, Ю.В. Никитченко, А.А. Шеремет, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 453-455. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraineid |
irk-123456789-69065 |
---|---|
record_format |
dspace |
spelling |
irk-123456789-690652014-10-05T03:02:00Z Влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и монооксигеназной систем крыс при старении Оченашко, О.В. Никитченко, Ю.В. Шеремет, А.А. Петренко, А.Ю. Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» В работе изучено влияние длительного введения криоконсервированных клеток фетальной печени (КФП) на динамику ряда показателей прооксидантно-антиоксидантной системы крови, состояние монооксигеназной системы печени и выживаемость крыс при старении. Установлено, что многократные инъекции КФП стареющим крысам увеличивают их выживаемость, снижают уровень продуктов ПОЛ и повышают надежность антиоксидантной и монооксигеназной систем. Эти данные позволяют рассматривать КФП как перспективный способ коррекции возрастных изменений. У роботі досліджено вплив довготривалового введення кріоконсервованих клітин фетальної печінки (КФП) на динаміку ряду показників прооксидантно-антиоксидантної системи крові, стан монооксигеназної системи печінки і виживаність щурів при старінні. Встановлено, що багатократні ін’єкції КФП старіючим щурам збільшують їх виживаність, знижують рівень продуктів ПОЛ та підвищують надійність антиоксидантної і монооксигеназної систем. Отримані дані дозволяють розглядати КФП як перспективний засіб корекції вікових змін. The effect of a long-term introduction of cryopreserved fetal liver cells (FLCs) on dynamics of some indices of blood prooxidantantioxidant system, state of liver monooxigenase system and survival of rats during ageing, has been studied in the research. Multiple injections of FLCs to rats under ageing were established to increase their survival rate, to decrease the level of LPO products and augment the reliability of prooxidant and monooxigenase systems. These data enable considering the FLCs as a perspective way to correct the age-related changes. 2008 Article Влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и монооксигеназной систем крыс при старении / О.В. Оченашко, Ю.В. Никитченко, А.А. Шеремет, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 453-455. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/69065 616-089.843:615.36136.013.014.41 ru Проблемы криобиологии и криомедицины Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
collection |
DSpace DC |
language |
Russian |
topic |
Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» |
spellingShingle |
Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» Оченашко, О.В. Никитченко, Ю.В. Шеремет, А.А. Петренко, А.Ю. Влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и монооксигеназной систем крыс при старении Проблемы криобиологии и криомедицины |
description |
В работе изучено влияние длительного введения криоконсервированных клеток фетальной печени (КФП) на динамику ряда показателей прооксидантно-антиоксидантной системы крови, состояние монооксигеназной системы печени и выживаемость крыс при старении. Установлено, что многократные инъекции КФП стареющим крысам увеличивают их выживаемость, снижают уровень продуктов ПОЛ и повышают надежность антиоксидантной и монооксигеназной систем. Эти данные позволяют рассматривать КФП как перспективный способ коррекции возрастных изменений. |
format |
Article |
author |
Оченашко, О.В. Никитченко, Ю.В. Шеремет, А.А. Петренко, А.Ю. |
author_facet |
Оченашко, О.В. Никитченко, Ю.В. Шеремет, А.А. Петренко, А.Ю. |
author_sort |
Оченашко, О.В. |
title |
Влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и монооксигеназной систем крыс при старении |
title_short |
Влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и монооксигеназной систем крыс при старении |
title_full |
Влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и монооксигеназной систем крыс при старении |
title_fullStr |
Влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и монооксигеназной систем крыс при старении |
title_full_unstemmed |
Влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и монооксигеназной систем крыс при старении |
title_sort |
влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и монооксигеназной систем крыс при старении |
publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
publishDate |
2008 |
topic_facet |
Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» |
url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/69065 |
citation_txt |
Влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и монооксигеназной систем крыс при старении / О.В. Оченашко, Ю.В. Никитченко, А.А. Шеремет, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 453-455. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
series |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
work_keys_str_mv |
AT očenaškoov vliâniekriokonservirovannyhkletokfetalʹnojpečeninavyživaemostʹsostoânieprooksidantnoantioksidantnojimonooksigenaznojsistemkryspristarenii AT nikitčenkoûv vliâniekriokonservirovannyhkletokfetalʹnojpečeninavyživaemostʹsostoânieprooksidantnoantioksidantnojimonooksigenaznojsistemkryspristarenii AT šeremetaa vliâniekriokonservirovannyhkletokfetalʹnojpečeninavyživaemostʹsostoânieprooksidantnoantioksidantnojimonooksigenaznojsistemkryspristarenii AT petrenkoaû vliâniekriokonservirovannyhkletokfetalʹnojpečeninavyživaemostʹsostoânieprooksidantnoantioksidantnojimonooksigenaznojsistemkryspristarenii |
first_indexed |
2025-07-05T18:48:00Z |
last_indexed |
2025-07-05T18:48:00Z |
_version_ |
1836833865285500928 |
fulltext |
453 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
УДК 616-089.843:615.36136.013.014.41
О.В. ОчеНАШКО1*, Ю.В. НИКИТчЕНКО2, А.А. ШЕРЕМЕТ2, А.Ю. ПЕТРЕНКО1
Влияние криоконсервированных клеток фетальной печени на
выживаемость, состояние прооксидантно-антиоксидантной и
монооксигеназной систем крыс при старении
UDC 616-089.843:615.36136.013.014.41
O.V. OCHENASHKO1*, YU.V. NIKITCHENKO2, A.A. SHEREMET2, A.YU. PETRENKO1
Effect of Fetal Liver Cryopreserved Cells on Survival,
State of Prooxidant-Antioxidant and Monooxigenase
Systems of Rats During Ageing
В работе изучено влияние длительного введения криоконсервированных клеток фетальной печени (КФП) на динамику
ряда показателей прооксидантно-антиоксидантной системы крови, состояние монооксигеназной системы печени и выживаемость
крыс при старении. Установлено, что многократные инъекции КФП стареющим крысам увеличивают их выживаемость, снижают
уровень продуктов ПОЛ и повышают надежность антиоксидантной и монооксигеназной систем. Эти данные позволяют
рассматривать КФП как перспективный способ коррекции возрастных изменений.
Ключевые слова: криоконсервированные клетки фетальной печени, крысы, старение, монооксигеназная система печени,
прооксидантно-антиоксидантная система, выживаемость.
У роботі досліджено вплив довготривалового введення кріоконсервованих клітин фетальної печінки (КФП) на динаміку
ряду показників прооксидантно-антиоксидантної системи крові, стан монооксигеназної системи печінки і виживаність щурів
при старінні. Встановлено, що багатократні ін’єкції КФП старіючим щурам збільшують їх виживаність, знижують рівень
продуктів ПОЛ та підвищують надійність антиоксидантної і монооксигеназної систем. Отримані дані дозволяють розглядати
КФП як перспективний засіб корекції вікових змін.
Ключові слова: кріоконсервовані клітини фетальної печінки, щури, старіння, монооксигеназна система печінки,
прооксидантно-антиоксидантна система, виживаність.
The effect of a long-term introduction of cryopreserved fetal liver cells (FLCs) on dynamics of some indices of blood prooxidant-
antioxidant system, state of liver monooxigenase system and survival of rats during ageing, has been studied in the research. Multiple
injections of FLCs to rats under ageing were established to increase their survival rate, to decrease the level of LPO products and
augment the reliability of prooxidant and monooxigenase systems. These data enable considering the FLCs as a perspective way to
correct the age-related changes.
Key-words: cryopreserved fetal liver cells, rats, ageing, monooxigenase system of liver, prooxidant-antioxidant system, survival.
Поиск новых подходов и средств для увеличе-
ния продолжительности жизни является одной из
актуальных биомедицинских проблем современ-
ности. Выраженное биологическое действие транс-
плантации криоконсервированных клеток феталь-
ной печени (КФП), направленное на восстановление
структурной и функциональной целостности клеток
и организма в целом [5, 8], позволяет рассматри-
вать КФП как перспективное геропротекторное
средство.
Вместе с тем влияние трансплантации криокон-
сервированных КФП на выживаемость, свободно-
радикальные процессы и процессы детоксикации
стареющего организма практически не изучено.
Цель работы – изучить влияние длительного
введения КФП на динамику ряда показателей
прооксидантно-антиоксидантной системы крови,
состояние монооксигеназной системы печени и
выживаемость крыс при старении.
Материалы и методы
Исследования проведены на белых нелинейных
крысах-самцах, содержащихся в соответствии с
положениями “Европейской конвенции о защите
позвоночных животных, используемых для экспе-
риментальных и научных целей” (Страсбург, 1986).
Все хирургические манипуляции, включая декапи-
тацию, проводили под эфирным наркозом.
Клетки фетальной печени выделяли из эмбрио-
нов человека неферментативным методом [8] и
криоконсервировали под защитой 10% ДМСО с ис-
пользованием программного замораживателя.
* Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38
(057) 373-31-26, факс: +38 (057) 373-30-84, электронная почта:
cryo@online.kharkov.ua
1Институт проблем криобиологии и криомедицины
НАН Украины, г. Харьков
2Институт биологии Харьковского национального универ-
ситета им. В.Н. Каразина, г. Харьков
* To whom correspondence should be addressed: 23,
Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373
3126, fax: +380 57 373 3084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua
1Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
2Institute of Biology of the V.N. Karazin Kharkov National
University, Kharkov, Ukraine
454 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
Перед опытом КФП отогревали и вводили в бед-
ренную вену крыс с 13-месячного возраста (10 млн
клеток/0,3 мл) 4 раза с интервалом 3 мес. Жизне-
способность КФП была не менее 60% (тест с окра-
шиванием трипановым синим). Контрольной группе
животных вводили среду криоконсервирования
клеток в эквивалентном объеме.
Перед каждым введением клеток (13-, 16-, 19-
и 22-месячным крысам), а также в конце экспери-
мента у 25-месячных животных в сыворотке крови,
полученной из хвостовой вены, измеряли содержа-
ние гидроперекисей липидов (ГПЛ) [3], супер-
оксиддисмутазную и глутатионпероксидазную
активности [4, 9]. Содержание цитохрома Р-450 [6]
и амидопирин-N-деметилазную активность [7]
определяли в гомогенате печени 25-месячных
животных после их декапитации. Все измерения
проводили на двулучевом спектрофотометре
Specord UV VIS (Германия, Йена) при 37°С.
Содержание белка в гомогенатах печени опре-
деляли по методу Лоури в модификации Миллера.
Для оценки достоверности различий исполь-
зовали t-критерий Стьюдента. Расчет выживае-
мости проводили по методу Каплана-Мейера [1].
Для сравнения кривых выживаемости использовали
критерий Гехана с поправкой Йейтса [1].
Результаты и обсуждение
Проведенные в течение 12 мес (возраст крыс
с 13 по 25 месяцев) исследования позволили
установить, что к концу эксперимента численность
контрольных крыс сокращалась на 60%, а опыт-
ных – только на 40 %. Из данных, представленных
на рисунке, видно, что кривая выживаемости
животных, длительное время получавших КФП,
при всех исследуемых сроках эксперимента была
существенно выше кривой выживаемости конт-
рольных крыс. Сравнение кривых выживаемости
(по Гехану с поправкой Йейтса) показало их досто-
верное отличие.
Исследование динамики содержания ГПЛ в
крови крыс в возрасте от 13 до 25 мес позволило
установить, что концентрация этих продуктов ПОЛ
у контрольных животных увеличивалась к 25-ме-
сячному возрасту на 24% (р<0,05), а у крыс, дли-
тельное время получавших КФП, достоверно не
изменялась.
Активность глутатионпероксиды – основного
фермента, утилизирующего ГПЛ крови, у контроль-
ных крыс несколько увеличивалась к 19-месячному
возрасту, а затем к 25-месячному значительно сни-
жалась (на 44%) по сравнению с 13-месячными
животными. У животных, которым вводили КФП,
активность исследуемого фермента достоверно не
изменялась.
Супероксиддисмутазная активность сыворотки
крови крыс контрольной группы монотонно снижа-
лась в течение всего срока наблюдения, и у 25-
месячных животных была на 30% ниже (р<0,05),
чем у 13-месячных крыс. У животных, которым
вводили КФП, активность фермента достоверно
не изменялась.
Изученные показатели, характеризующие
состояние монооксигеназной системы печени –
содержание цитохрома Р-450 и амидопирин-N-
деметилазная активность, которые согласно дан-
ным [2] снижались при старении крыс, после мно-
гократных инъекций КФП были значительно выше
уровня контрольных животных (таблица). Так,
амидопирин-N-деметилазная активность подопыт-
ных крыс превышала уровень контрольных в 1,7
раза, а содержание цитохрома Р-450 – в 1,9 раза.
0,2
0,4
0,6
0,8
1,0
13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
1
2
Возраст животных, мес
Вы
жи
ва
ем
ос
ть
, о
тн
. е
д.
Кривые выживаемости (по Каплан-Мейеру) крыс, кото-
рым с 13-месячного возраста повторно вводили среду 1,
(контроль) и криоконсервированные клетки фетальной
печени 2 (опыт); – интервалы внутривенных инъекций.
Амидопирин-N-деметилазная активность и
содержание цитохрома Р-450 в гомогенатах печени
старых крыс (25 мес) в контроле и после
многократного введения клеток фетальной печени
Примечание: * – р<0,05 по сравнению с контролем.
ыртемарапеымеуделссИ ьлортноK ПФKеинедевВ
-итемед-N-нириподимА
,ьтсонвиткаяанзал
аклебгм·ним/ьломп
1,06±5,743 *9,08±8,785
аморхотицеинажредоС
аклебгм/ьломп,054-Р 5,21±2,05 *2,01±49
455 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
Выводы
Полученные данные свидетельствуют, что мно-
гократные инъекции криоконсервированных КФП
стареющим крысам увеличивают их выживае-
мость, снижают уровень продуктов ПОЛ и повы-
шают надежность антиоксидантной и монооксиге-
назной систем. Эти данные позволяют рассмат-
ривать КФП как перспективный способ коррекции
возрастных изменений и требуют проведения даль-
нейших детальных исследований механизмов их
геропротекторного действия.
Литература
Гланц С. Медико-биологическая статистика: Пер. с англ.–
М.: Практика, 1998.– 459 с.
Лемешко В.В. Система микросомального окисления при
развитии и старении организма // Биохимия.– 1980.–
Т. 45, №11.– С. 1964–1969.
Asakawa T., Matsushita S. Coloring condition of thiobarbituric
acid test for detecting lipid hydroperoxide // Lipids.– 1980.–
Vol. 15, N3.– P.137–140.
Beauchamp C., Fridovich I. Superoxide dismutase: improved
assays and an assay applicable to acrylamide gels // Anal.
Biochem.– 1971.– Vol. 44, N1.– P. 276–287.
Lebedinsky A.S., Cherkashina D.V., Sukach A.N. et al. Positi-
ve effects of cryopreserved adult or fetal liver cell transplants
on hypercholesterolemia and hepatic antioxidant defenses in
cholesterol-fed rabbits // Cryobiology. – 2007.– Vol. 55, N1. –
P. 72–79.
Matsubara T., Koike M., Touchi A. et al. Quantitative deter-
mination of cytochrome P-450 in rat liver homogenate // Anal.
Biochem. – 1976. – Vol. 75, N2.– P. 596–603.
Nash T. Colorimetric estimation of formaldehyde by means of
the Hartzsch reaction // Biochem J.– 1953.– Vol. 55, N 3.–
P. 416–421.
Ochenashko O.V., Volkova N. A., Mazur S. P. et al. Cryopre-
served fetal liver cell transplants support the chronic failing
liver in rats with CCl4-induced cirrhosis // Cell Transplant.–
2006.– Vol. 15, N1.– P. 23–33.
Paglia D.E., Valentine W.N. Studies on the quantitative and
qualitative charactarization of erythrocyte glutathione
peroxidase // J. Lab. Clin. Med. – 1967. – Vol. 70, N1.– P. 158–
169.
Поступила 08.07.2008
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
|