Применение лектина завязи пшеницы для изучения особенностей синтеза секреторного иммуноглобулина А в эпителии тонкой, толстой кишки и клетками нефрона
Загальновідомим є той факт, що ступінь захисту від локальних вірусних інфекцій респіраторного, шлунково‑кишкового трактів і сечостатевої системи, перш за все, залежить від вмісту в організмі секреторного IgA. У роботі запропоновано використання лектину зародків пшениці (Wheat germ agglutinin- (WGA))...
Збережено в:
| Дата: | 2013 |
|---|---|
| Автори: | , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України
2013
|
| Назва видання: | Таврический медико-биологический вестник |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/74418 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Применение лектина завязи пшеницы для изучения особенностей синтеза секреторного иммуноглобулина А в э пителии тонкой, толстой кишки и клетками нефрона / А.Л. Лазарик, Н.А. Волошин, А.А. Светлицкий, С.В. Чугин, Н.Г. Гончарова // Таврический медико-биологический вестник. — 2013. — Т. 16, № 1, ч. 1 (61). — С. 53-55. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-74418 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-744182015-01-21T03:03:15Z Применение лектина завязи пшеницы для изучения особенностей синтеза секреторного иммуноглобулина А в эпителии тонкой, толстой кишки и клетками нефрона Лазарик, А.Л. Волошин, Н.А. Светлицкий, А.А. Чугин, С.В. Гончарова, Н.Г. Оригинальные статьи Загальновідомим є той факт, що ступінь захисту від локальних вірусних інфекцій респіраторного, шлунково‑кишкового трактів і сечостатевої системи, перш за все, залежить від вмісту в організмі секреторного IgA. У роботі запропоновано використання лектину зародків пшениці (Wheat germ agglutinin- (WGA)) з метою вивчення особливостей синтезу секреторного IgA в епітелії тонкої і товстої кишки, а так само у нефронах нирок щурів в ранньому постнатальному періоді (з 1–60 добу життя). It’s well-known that degree of protection from local viral infections respiratory system, gastrointestinal and genitourinary tracts, depends on the content in the body of secretory IgA. This article proposed to use o Wheat germ agglutinin to study features of the secretory IgA synthesis in the epithelium of the small and large intestine, as well as rat kidney nephron in the early postnatal period (from 1–60 days of life). 2013 Article Применение лектина завязи пшеницы для изучения особенностей синтеза секреторного иммуноглобулина А в э пителии тонкой, толстой кишки и клетками нефрона / А.Л. Лазарик, Н.А. Волошин, А.А. Светлицкий, С.В. Чугин, Н.Г. Гончарова // Таврический медико-биологический вестник. — 2013. — Т. 16, № 1, ч. 1 (61). — С. 53-55. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. 2070-8092 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/74418 581.162.1:612.335]:[611.34.018.7+611.61-018]].08 ru Таврический медико-биологический вестник Кримський науковий центр НАН України і МОН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Оригинальные статьи Оригинальные статьи |
| spellingShingle |
Оригинальные статьи Оригинальные статьи Лазарик, А.Л. Волошин, Н.А. Светлицкий, А.А. Чугин, С.В. Гончарова, Н.Г. Применение лектина завязи пшеницы для изучения особенностей синтеза секреторного иммуноглобулина А в эпителии тонкой, толстой кишки и клетками нефрона Таврический медико-биологический вестник |
| description |
Загальновідомим є той факт, що ступінь захисту від локальних вірусних інфекцій респіраторного, шлунково‑кишкового трактів і сечостатевої системи, перш за все, залежить від вмісту в організмі секреторного IgA. У роботі запропоновано використання лектину зародків пшениці (Wheat germ agglutinin- (WGA)) з метою вивчення особливостей синтезу секреторного IgA в епітелії тонкої і товстої кишки, а так само у нефронах нирок щурів в ранньому постнатальному періоді (з 1–60 добу життя). |
| format |
Article |
| author |
Лазарик, А.Л. Волошин, Н.А. Светлицкий, А.А. Чугин, С.В. Гончарова, Н.Г. |
| author_facet |
Лазарик, А.Л. Волошин, Н.А. Светлицкий, А.А. Чугин, С.В. Гончарова, Н.Г. |
| author_sort |
Лазарик, А.Л. |
| title |
Применение лектина завязи пшеницы для изучения особенностей синтеза секреторного иммуноглобулина А в эпителии тонкой, толстой кишки и клетками нефрона |
| title_short |
Применение лектина завязи пшеницы для изучения особенностей синтеза секреторного иммуноглобулина А в эпителии тонкой, толстой кишки и клетками нефрона |
| title_full |
Применение лектина завязи пшеницы для изучения особенностей синтеза секреторного иммуноглобулина А в эпителии тонкой, толстой кишки и клетками нефрона |
| title_fullStr |
Применение лектина завязи пшеницы для изучения особенностей синтеза секреторного иммуноглобулина А в эпителии тонкой, толстой кишки и клетками нефрона |
| title_full_unstemmed |
Применение лектина завязи пшеницы для изучения особенностей синтеза секреторного иммуноглобулина А в эпителии тонкой, толстой кишки и клетками нефрона |
| title_sort |
применение лектина завязи пшеницы для изучения особенностей синтеза секреторного иммуноглобулина а в эпителии тонкой, толстой кишки и клетками нефрона |
| publisher |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України |
| publishDate |
2013 |
| topic_facet |
Оригинальные статьи |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/74418 |
| citation_txt |
Применение лектина завязи пшеницы для изучения особенностей синтеза секреторного иммуноглобулина А в э пителии тонкой, толстой кишки и клетками нефрона / А.Л. Лазарик, Н.А. Волошин, А.А. Светлицкий, С.В. Чугин, Н.Г. Гончарова // Таврический медико-биологический вестник. — 2013. — Т. 16, № 1, ч. 1 (61). — С. 53-55. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
| series |
Таврический медико-биологический вестник |
| work_keys_str_mv |
AT lazarikal primenenielektinazavâzipšenicydlâizučeniâosobennostejsintezasekretornogoimmunoglobulinaavépiteliitonkojtolstojkiškiikletkaminefrona AT vološinna primenenielektinazavâzipšenicydlâizučeniâosobennostejsintezasekretornogoimmunoglobulinaavépiteliitonkojtolstojkiškiikletkaminefrona AT svetlickijaa primenenielektinazavâzipšenicydlâizučeniâosobennostejsintezasekretornogoimmunoglobulinaavépiteliitonkojtolstojkiškiikletkaminefrona AT čuginsv primenenielektinazavâzipšenicydlâizučeniâosobennostejsintezasekretornogoimmunoglobulinaavépiteliitonkojtolstojkiškiikletkaminefrona AT gončarovang primenenielektinazavâzipšenicydlâizučeniâosobennostejsintezasekretornogoimmunoglobulinaavépiteliitonkojtolstojkiškiikletkaminefrona |
| first_indexed |
2025-07-05T22:52:21Z |
| last_indexed |
2025-07-05T22:52:21Z |
| _version_ |
1836849239403003904 |
| fulltext |
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
УДК 581.162.1:612.335]: [611.34.018.7+611.61–018]].08
© Коллектив авторов, 2013
ПРИМЕНЕНИЕ ЛЕКТИНА ЗАВЯЗИ ПШЕНИцЫ ДЛЯ
ИЗУЧЕНИЯ ОСОБЕННОСТЕЙ СИНТЕЗА СЕКРЕТОРНОГО
ИММУНОГЛОБУЛИНА А В эПИТЕЛИИ ТОНКОЙ, ТОЛСТОЙ
КИШКИ И КЛЕТКАМИ НЕФРОНА
Н. А. Волошин, А. Л. Лазарик, А. А. Светлицкий, С. В. чугин, Н. Г. Гончарова
Кафедра анатомии человека, оперативной хирургии и топографической анатомии (зав. - д. мед. н., проф.
Волошин Н. А.), Запорожский государственный медицинский университет. 69035 Украина, г. Запорожье, проспект
Маяковского, 26. E-mail: vnvoloshin@mail.ru
applicaTion oF WheaT gerM agglUTinin To sTUdy a FeaTUres oF
secreTory iMMUnogloBUlin a synThesis in sMall and large inTesTine epiTheliUM, and
cells oF The nephron
n. a. voloshin, a. l. lazaryk, a. a. svetlytskyy, s. v. chuhyn, n. g. goncharova
SUMMARy
It’s well-known that degree of protection from local viral infections respiratory system, gastrointestinal and
genitourinary tracts, depends on the content in the body of secretory IgA. This article proposed to use o Wheat
germ agglutinin to study features of the secretory IgA synthesis in the epithelium of the small and large intestine,
as well as rat kidney nephron in the early postnatal period (from 1–60 days of life).
ЗАСТОСУВАННЯ ЛЕКТИНіВ ЗАРОДКіВ пШЕНИЦі ДЛЯ ОСОбЛИВОСТЕЙ СИНТЕЗУ СЕКРЕТОРНОГО
імУНОГЛОбУЛіНУ А В ЕпіТЕЛіЇ ТОНКОЇ, ТОВСТОЇ КИШКИ і КЛіТИНАмИ НЕфРОНА
Н. А. Волошин, А. Л. Лазарік, А. О. Світлицький, С. В. чугін, Н. Г. Гончарова
РЕЗюМЕ
Загальновідомим є той факт, що ступінь захисту від локальних вірусних інфекцій респіраторного,
шлунково-кишкового трактів і сечостатевої системи, перш за все, залежить від вмісту в організмі
секреторного IgA. У роботі запропоновано використання лектину зародків пшениці (Wheat germ agglutinin-
(WGA)) з метою вивчення особливостей синтезу секреторного IgA в епітелії тонкої і товстої кишки, а так само
у нефронах нирок щурів в ранньому постнатальному періоді (з 1–60 добу життя).
Ключевые слова: секреторный iga, лектин зародышей пшеници, епителиальные клетки, гранулы.
Ни для кого не секрет, что степень защиты
от локальных вирусных инфекций респираторно-
го, желудочно-кишечного трактов и мочеполовой
системы, прежде всего, зависит от содержания в ор-
ганизме секреторного IgA. Стабильная структура,
выраженный аффинитет к поверхности слизистых
оболочек, преобладающее содержание в секрете
молочной железы обусловливают биологическую
роль секреторного IgA в защите организма от не-
благоприятного воздействия различных патогенных
агентов, в том числе вирусов.
Известно, что IgA синтезируется в димер-
ной форме в клетках lamina propria и после
связывания с иммуноглобулиновым рецептором,
синтезированным в эпителиальных клетках, тран-
спортируется на поверхность слизистой оболочки
(Туманов А. В., 2004). В момент выхода IgA в про-
свет кишечника рецептор частично расщепляется,
в результате чего в составе IgA остается фрагмент
рецептора, который называют секреторным компо-
нентом. Таким образом, секреторный IgA является
продуктом кооперации двух типов клеток — плазма-
тических и эпителиальных.
В паренхиме почки синтез IgA может осу-
ществляться мезенгиальными клетками и эпите-
лиоцитами канальцев нефрона. Известно, что
в первые годы жизни у человека и в первые месяцы
жизни крыс проксимальные извитые канальцы могут
выполнять функцию подобную тонкой кишки.
Секреторный IgA образуется не только в ди-
мерной, но и в тетрамерной форме, что усиливает его
вируснейтрализующую способность. Секреторный
компонент предохраняет IgA от расщепления про-
теолитическими ферментами, что обусловливает его
значительные преимущества перед антителами других
классов. Секреторный IgA нейтрализует вирус не толь-
ко в просвете кишечника, но и при транспортировке его
внутрь клетки. Димер IgA способен нейтрализовать
вирус в подслизистой основе оболочки кишечника,
а затем, связавшись с рецептором, транспортировать
его в просвет кишечника. Кроме того, около 90 % плаз-
матических клеток в lamina propria эпителия кишки
продуцируют IgA, в то время как в лимфатических
узлах доля таких клеток составляет всего 2–5 %.
Лектин завязи пшеницы (Wheat germ agglu-tinin-
(WGA)) селективно связываеться с секре-торным
компонентом IgA. Поэтому появление WGA+ гранул
в эпителии толстой и тонкой кишки может свиде-
тельствовать о нахождении секреторного компонента
данного иммуноглобулина в данных клетках, что мо-
жет помочь более глубокому изучению гуморального
звена иммунной системы.
53
ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2013, том 16, №1, ч.1 (61)
Также, в последнее время, особый интерес пред-
ставляют дефензины — мелкие антимикробные
пептиды, обладающие широким спектром ак-
тивности в отношении грамположительных
и грамотрицательных бактерий, грибов и оболочечных
вирусов. б- и в-дефензины человека расположены
в гранулах нейтрофилов, макрофагов, НК-клеток,
интестинальной и эпителиальной ткани, клет-
ках Панета, коже, слизистых респираторного,
урогенитального и пищеварительного трактов,
в биологических жидкостях. Кроме прямого анти-
микробного действия, дефензины обладают спосо-
бностью регулировать хемотаксис, оказывать им-
муномодулирующий, противоопухолевый и другие
эффекты. Подтвержденные биологические эффекты
регуляторных пептидов в экспериментальной и кли-
нической медицине открывают новые возможности
в лечении социально значимых заболеваний — таких
как вирусный гепатит, туберкулез, рак, вторичные
иммунодефициты.
Цель исследования: описать распределение
WGA+ гранулы в эпителии тонкой и толстой кишки,
а также в проксимальных канальцах нефрона почки
на ранних сроках после рождения в норме и после
внутриутробного введения антигена.
МАТЕРИАЛы И МЕТОДы
Объектом исследования была двенадцатиперстная,
тонкая и толстая кишки, а также почки белых крыс
линии Вистар на 1-е, 3-е, 7-е, 11-е, 14-е, 21-е, 30-е,
45-е и 60-е постнатальной жизни. Возрастные группы
установлены расчетным путем (Г. А. Добровольский,
1984 г.). Крыс содержали в виварии соответственно
рекомендациям Ю. Н. Кожемякина и др. В работе
исследованы 3-и группы животных: первая группа —
интактные крысы, вторая — крысы, которым вводили
физиологический раствор NaCl, в те же сроки, что
и экспериментальным животным, третья группа —
экспериментальные животные, которым внутриплодно
вводили человеческий иммуноглобулин. Внутриутроб-
ное введение антигена осуществлялось плодам на 18-е
сутки внутриутробного развития, оперативным путем
(Волошин М. А., 1981 г.). Забой животных проводили
путем декапитации. Кусочки кишки и почки фиксиро-
вали в жидкости Буэна, проводили в восходящей кон-
центрации спиртов и заливали в воск-каучук-парафин.
Готовились серийные срезы, толщиной 5–6 мкм. Для
выявления структур, фенотипически различающихся
по углеводным остаткам проводили исследования с ис-
пользованием лектина пшеницы (WGA+) в стандартных
наборах «Лектинтест» (Львов). Обработку срезов про-
изводили коньюгатом лектин пшеницы — пероксидаза
хрена (WGA+-HRP). Для выявления использовали ра-
створ 3,3-диметилбензидина. Учет результатов реакции
с коньюгатами лектина пшеницы WGA+ проводили
полуколичественно при имерсионном увеличении
микроскопа (об.90, ок.10): ++ — темно-коричневая
окраска (позитивная реакция), + — светло-коричневая
окраска — слабо позитивная реакция), 0 — отсутствие
реакции.
РЕЗУЛЬТАТы И Их ОбСУЖДЕНИЕ
В рамках концепции «Лимфоцит — фактор морфо-
генеза», в процессе изучения морфо-функциональных
особенностей эпителия различных отделов тонкой
и толстой кишки крыс, а также извитых канальцев
почки в норме и после введения антигенов установ-
лено, что в эпителии данных структур наблюдается
накопление WGA-положительных включений. Вклю-
чения тонкой кишки локализуются преимущественно
в клетках крипты, и их количество уменьшается
по мере перемещения из крипты в ворсинку. Внутри
клетки включения локализуются диффузно или ближе
к апикальной части клетки. При постановке реакции
лектина завязи пшеницы с пероксидазой хрена (WGA-
HPR) и обработкой срезов бензидином установлено,
что включения приобретают темно-коричневую
окраску, что свидетельствует о резко положительной
реакции. В норме появление WGA-положительных
гранул в эпителиальных клетках подвздошной киш-
ки крыс отмечается на 3–7 сутки после рождения,
достигает максимума на 14-е сутки и уменьшается
к 60-м суткам жизни. У животных, которым в плод-
ном периоде онтогенеза вводили антиген, появление
гранул можно обнаружить уже в первые сутки по-
сле рождения, их содержание несколько выше, чем
у интактных животных и сохраняется увеличенным
до 60-х суток постнатального развития. В прокси-
мальном отделе тонкой кишки (двенадцатиперстная
кишка) в криптах, популяция клеток с WGA + — гра-
нулами определяется, начиная с третьих суток после
рождения. Клетки большие по размерам, локализуют-
ся в криптах и в базальных частях ворсинок тонкой
кишки. Цитоплазматические включения, также как
и в подвздошной кишке, располагаются в цитоплазме
клеток диффузно. Количество клеток, содержащих
гранулы, уменьшается по мере смещения из крипты
в ворсинку. На верхушках ворсинок эпителиоцитов
с WGA + — гранулами в цитоплазме не обнаружено.
В толстой кишке крыс (слепой и восходящей обо-
дочной), как у интактных, так и экспериментальных
животных накопление WGA-позитивных гранул,
также как и в тонкой кишке наблюдается в клетках
крипт. Гранулы так же, как и в тонкой кишке имеют
выраженную положительную реакцию, локализуют-
ся диффузно в цитоплазме или в апикальной части
клетки. Однако в отличие от тонкой кишки гранулы
выявляются, начиная с 14-х суток жизни, и сохраняют-
ся до 60-х суток постнатального развития включитель-
но. В почке интактных крыс, WGA-положительные
гранулы обнаруживаются в проксимальных извитых
канальцах нефрона, также как и в эпителиальных
клетках кишки крыс с 3–7х суток после рождения,
достигают максимума на 14-е сутки и уменьшают-
54
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
ся к 60-м суткам жизни. У антигенпремированых
животных, данные гранулы выявляются уже с первых
суток после рождения, их содержание также выше, чем
у интактных животных и сохраняется увеличенным
до 60-х суток постнатального развития.
Природа WGA+-гранул активно обсуждается.
Изначально ранее описанные WGA+-гранулы в клет-
ках эпителия крипт и нефрона мы расценивали как
элементы становления внутриклеточных структур
на ранних сроках после рождения, которые в своей
структуре имеют остатки N–ацетил–D–глюкозамина
и сиаловой кислоты, выявляемые лектином пшеницы.
Однако, в толстой кишке, наибольшее количество
выявленных гранул приходится на 14-е сутки жиз-
ни, что не согласуется с вышесказанным. Наличие
гранул в эпителии кишки и проксимальных извитых
канальцах нефрона почки может свидетельствовать
о процессах расщепления и всасывания белков, что
характерно для почки на ранних сроках (К. А. Зуфа-
ров, 1970). Однако введение антигена не оказывает
влияние на процессы внутриклеточного пищеварения,
что не соответствует установленному в работе увели-
чению количества гранул после введения антигена.
Также, учитывая выявленную локализацию
гранул в эпителии кишки и канальцах почки можно
предположить образование дефензинов. По данным
А. С. Будихиной (2008 г.), дефензины расположены
в эпителиальных покровах кишки и почки именно
в местах обнаружения нами WGA+-положительных
гранул, но точных данных о локализации дифензина
в клетке, а также его взаимодействии с лектином
пшеницы нет, кроме того, дефензины являются
элементом неспецифической защиты и введение
антигена не должно влиять на их количество.
Учитывая расположение и сроки появления, мы
склонны думать, что выявленные нами гранулы,
вероятнее всего, относятся к процессам образования
секреторного компонента IgA. Максимальное коли-
чество IgA в клетках эпителия тонкой и толстой киш-
ки находится в эпителиоцитах крипты, постепенно
уменьшаясь по направлению к ворсинке тонкой киш-
ки, что соответствует данным Р. В. Петрова (1986 г.),
относительно синтеза и секреции IgA. Кроме того,
полученное нами увеличение содержания этих гра-
нул, со второй недели после рождения в эпителии
тонкой и толстой кишки, и проксимальных каналь-
цев почки, позволяет предположить о начале про-
цессов образования секреторного компонента IgA,
на высоте формирования гуморального иммунитета,
что согласуется с данными И. В. Нестеровой (2002 г.)
ВыВОДы
В эпителии тонкой, толстой кишки, канальцах
почки процесс секреции WGA+ веществ начинается
на первой неделе после рождения, достигает макси-
мума к 14-м суткам и остается стабильным до 60-х
суток.
WGA+ структуры синтезируются в базальных от-
делах эпителиоцитов, которые расположены только
в криптах, где под базальной мембраной находятся
В-лимфоциты.
После внутриутробного введения иммуноглобу-
лина, WGA+ структуры в эпителиоцитах выявляются
на неделю раньше по сравнению с интактными
и контрольными животными.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бернік Н. В. Морфологія людини і лектингіс-
тохімія/Бернік Н. В., Олійник І. Ю., Лаврів Л. П.//
Клінічна та експериментальна патологія. — 2010. —
Т. 9, № 3 (33). — С. 138–143.
2. Будихина А. С. Дефензины — мультифунк-
циональные катионные пептиды человека/А. С. Буди-
хина, Б. В. Пинегин//Иммунопатология, алергология,
инфектология. — Москва, 2008. — № 2. — С. 31–40
3. Волошин М. А. Внутриутробная антигенная
стимуляция как модель для изучения морфоге-
неза органов/М. А. Волошин, Е. А. Григорьева,
М. С. Щербаков//Морфологические ведомости. —
Уфа, 2006. — № 1–2, прил. № 1. — С. 57–59.
4. Науково-практичні рекомендації з утримання
лабораторних тварин та роботи з ними/Кожемя-
кін Ю. М., Хромов О. С., Філоненко М. А., Сайфет-
дінова Г. А. — К.: Авіценна, 2002. — 156 с.
5. Не стерова И. В . Особенно сти строе-
ния и функционирования иммунной системы
желудочно-кишечного тракта/И. В. Нестерова,
И. Н. Швыдченко//Аллергология и иммунология. —
2002. — Т. 3, № 2. — С. 282–292.
6. Петров Р. В. Иммунология/Р. В. Петров. — М.:
Медицина, 1982. — 368 с.
7. Ройт. А . Основы иммунологии: пер .
с англ./А. Ройт. — Мир, 1991. — 287 с.
8. Туманов А. В. Развитие вторичных лимфоид-
ных органов/А. В. Туманов//Иммунология. — 2004. —
№ 2. — С. 120–128.
9. Хаитов Р. М. Иммунная система желудочно —
кишечного тракта: особенности функционирования
в норме и при патологии/Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин//
Иммунология. — 1997. — № 5. — С. 4–7.
55
|