A method for identifying the endocrine cells of the gastrointestinal tract on epoxy thin sections
Запропонований нами спосіб використовується для виявлення та оцінки кількості, розмірів, локалізації та ступеня враження ендокриноцитів в слизовій оболонкамиці шлунково-кишкового тракту при запальних процесах. Спосіб ідентифікації ендокриноцитів на тотальних препаратах включає в себе методику ущіл...
Збережено в:
| Дата: | 2013 |
|---|---|
| Автори: | , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | English |
| Опубліковано: |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України
2013
|
| Назва видання: | Таврический медико-биологический вестник |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/76364 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | A method for identifying the endocrine cells of the gastrointestinal tract on epoxy thin sections / V.I. Shepitko, K.V. Shepitko, G.A. Yeroshenko, S.M. Bilash // Таврический медико-биологический вестник. — 2013. — Т. 16, № 1, ч. 2 (61). — С. 222-224. — Бібліогр.: 6 назв. — англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-76364 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-763642015-02-17T14:18:09Z A method for identifying the endocrine cells of the gastrointestinal tract on epoxy thin sections Shepitko, V.I. Shepitko, K.V. Yeroshenko, G.A. Bilash, S.M. Оригинальные статьи Запропонований нами спосіб використовується для виявлення та оцінки кількості, розмірів, локалізації та ступеня враження ендокриноцитів в слизовій оболонкамиці шлунково-кишкового тракту при запальних процесах. Спосіб ідентифікації ендокриноцитів на тотальних препаратах включає в себе методику ущільнення тотального препарату в ЕПОН-812. Такий метод ущільнення, а потім імпрегнації солями срібла дає змогу ідентифікувати, визначити гістотопографію, кількісний та якісний склад ендокриноцитів на тотальному препараті в різних відділах шлунково-кишкового тракту та визначити ділянки для прицільного подальшого гістохімічного та електрономікроскопічного дослідження. Предложенный нами метод может применяться для выявления и оценки количества, размеров, локализации и степени поражения ендокриноцитив в слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта при воспалительных процессах. Данный способ идентификации ендокриноцитив на тотальных препаратах включает в себя методику помещения тотального препарата в ЭПОН-812. Такой метод уплотнения, а затем импрегнации солями серебра позволяет идентифицировать, определить гистотопографию, количественный и качественный состав ендокриноцитив на тотальном препарате в различных отделах желудочно-кишечного тракта и определить участки для прицельного дальнейшего гистохимического и електрономикроскопичного исследования. 2013 Article A method for identifying the endocrine cells of the gastrointestinal tract on epoxy thin sections / V.I. Shepitko, K.V. Shepitko, G.A. Yeroshenko, S.M. Bilash // Таврический медико-биологический вестник. — 2013. — Т. 16, № 1, ч. 2 (61). — С. 222-224. — Бібліогр.: 6 назв. — англ. 2070-8092 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/76364 611.018+616.33/.35-091.-092.9 en Таврический медико-биологический вестник Кримський науковий центр НАН України і МОН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
English |
| topic |
Оригинальные статьи Оригинальные статьи |
| spellingShingle |
Оригинальные статьи Оригинальные статьи Shepitko, V.I. Shepitko, K.V. Yeroshenko, G.A. Bilash, S.M. A method for identifying the endocrine cells of the gastrointestinal tract on epoxy thin sections Таврический медико-биологический вестник |
| description |
Запропонований нами спосіб використовується для виявлення та оцінки кількості, розмірів, локалізації
та ступеня враження ендокриноцитів в слизовій оболонкамиці шлунково-кишкового тракту при запальних
процесах. Спосіб ідентифікації ендокриноцитів на тотальних препаратах включає в себе методику ущільнення
тотального препарату в ЕПОН-812. Такий метод ущільнення, а потім імпрегнації солями срібла дає змогу
ідентифікувати, визначити гістотопографію, кількісний та якісний склад ендокриноцитів на тотальному
препараті в різних відділах шлунково-кишкового тракту та визначити ділянки для прицільного подальшого
гістохімічного та електрономікроскопічного дослідження. |
| format |
Article |
| author |
Shepitko, V.I. Shepitko, K.V. Yeroshenko, G.A. Bilash, S.M. |
| author_facet |
Shepitko, V.I. Shepitko, K.V. Yeroshenko, G.A. Bilash, S.M. |
| author_sort |
Shepitko, V.I. |
| title |
A method for identifying the endocrine cells of the gastrointestinal tract on epoxy thin sections |
| title_short |
A method for identifying the endocrine cells of the gastrointestinal tract on epoxy thin sections |
| title_full |
A method for identifying the endocrine cells of the gastrointestinal tract on epoxy thin sections |
| title_fullStr |
A method for identifying the endocrine cells of the gastrointestinal tract on epoxy thin sections |
| title_full_unstemmed |
A method for identifying the endocrine cells of the gastrointestinal tract on epoxy thin sections |
| title_sort |
method for identifying the endocrine cells of the gastrointestinal tract on epoxy thin sections |
| publisher |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України |
| publishDate |
2013 |
| topic_facet |
Оригинальные статьи |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/76364 |
| citation_txt |
A method for identifying the endocrine cells of the gastrointestinal tract on epoxy thin sections / V.I. Shepitko, K.V. Shepitko, G.A. Yeroshenko, S.M. Bilash // Таврический медико-биологический вестник. — 2013. — Т. 16, № 1, ч. 2 (61). — С. 222-224. — Бібліогр.: 6 назв. — англ. |
| series |
Таврический медико-биологический вестник |
| work_keys_str_mv |
AT shepitkovi amethodforidentifyingtheendocrinecellsofthegastrointestinaltractonepoxythinsections AT shepitkokv amethodforidentifyingtheendocrinecellsofthegastrointestinaltractonepoxythinsections AT yeroshenkoga amethodforidentifyingtheendocrinecellsofthegastrointestinaltractonepoxythinsections AT bilashsm amethodforidentifyingtheendocrinecellsofthegastrointestinaltractonepoxythinsections AT shepitkovi methodforidentifyingtheendocrinecellsofthegastrointestinaltractonepoxythinsections AT shepitkokv methodforidentifyingtheendocrinecellsofthegastrointestinaltractonepoxythinsections AT yeroshenkoga methodforidentifyingtheendocrinecellsofthegastrointestinaltractonepoxythinsections AT bilashsm methodforidentifyingtheendocrinecellsofthegastrointestinaltractonepoxythinsections |
| first_indexed |
2025-07-06T00:48:55Z |
| last_indexed |
2025-07-06T00:48:55Z |
| _version_ |
1836856572394864640 |
| fulltext |
ТАвРИЧЕСкИЙ мЕДИкО-бИОЛОГИЧЕСкИЙ вЕСТНИк2013, том 16, №1, ч.2 (61)
UDC 611.018+616.33/.35–091.–092.9
© Group of the authors, 2013
A METHOD FOR IDENTIFYING THE ENDOCRINE CELLS OF THE
GASTROINTESTINAL TRACT ON EPOXY THIN SECTIONS
v. i. shepitko, k. v. shepitko, g. a. yeroshenko, s. M. Bilash
Department of Histology, Cytology and Embryology (Head – D. Med. Sc., Prof. V. I. Shepitko), Higher state educational
institution of Ukraine “Ukrainian Medical Stomatological Academy”, 36024 Ukraine, Poltava, Shevchenko Street, 23. E-mail:
ala_umsa@mail.ru
СпОСіб іДЕНТИФіКАЦіЇ ЕНДОКРИНОЦИТіВ ШЛУНКОВО-КИШКОВОГО ТРАКТУ НА ЕпОКСИДНИх
ШЛіФАх
В. і. Шепітько, К. В. Шепітько, Г. А. Єрошенко, С. м. білаш
РЕЗюМЕ
Запропонований нами спосіб використовується для виявлення та оцінки кількості, розмірів, локалізації
та ступеня враження ендокриноцитів в слизовій оболонкамиці шлунково-кишкового тракту при запальних
процесах. Спосіб ідентифікації ендокриноцитів на тотальних препаратах включає в себе методику ущільнення
тотального препарату в ЕПОН-812. Такий метод ущільнення, а потім імпрегнації солями срібла дає змогу
ідентифікувати, визначити гістотопографію, кількісний та якісний склад ендокриноцитів на тотальному
препараті в різних відділах шлунково-кишкового тракту та визначити ділянки для прицільного подальшого
гістохімічного та електрономікроскопічного дослідження.
СпОСОб ИДЕНТИФИКАЦИИ ЕНДОКРИНОЦИТОВ ЖЕЛУДОчНО-КИШЕчНОГО ТРАКТА
НА эпОКСИДНЫх ШЛИФАх
В. И. Шепитько, К. В. Шепитько, Г. А. Ерошенко, С. м. билаш
РЕЗюМЕ
Предложенный нами метод может применяться для выявления и оценки количества, размеров,
локализации и степени поражения ендокриноцитив в слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта
при воспалительных процессах. Данный способ идентификации ендокриноцитив на тотальных препаратах
включает в себя методику помещения тотального препарата в ЭПОН-812. Такой метод уплотнения, а затем
импрегнации солями серебра позволяет идентифицировать, определить гистотопографию, количественный
и качественный состав ендокриноцитив на тотальном препарате в различных отделах желудочно-кишечного
тракта и определить участки для прицельного дальнейшего гистохимического и електрономикроскопичного
исследования.
keywords: endocrine cells, epoxy thin sections, gastrointestinal tract, impregnation.
The diagnosis and treatment of digestive deseases
remain an urgent problem given their prevalence in
Ukraine and abroad. Statistical studies show that more
than half of the working population in more developed
countries suffers from gastrointestinal pathology [1].
Leading morphologists emphasize that the most likely
accurate diagnosis in the gastrointestinal pathology
can be established only after the morphological study,
which allows to determine morphometric accurately and
according to the objective position the presence and the
nature of structural changes, the direction of regenerative
process; understanding of the normal structure is a
prerequisite for successful analysis of the pathogenesis
of digestive deseases [2].
Recently, there is an increase of interest in the
research and study of endocrine cells in the mucosa
of gastrointestinal (GI) tract. Numerous studies in this
field have shown that in case of GI pathology, one of
the leading roles played by APUD cells. Under these
conditions, the quantity and quality of endocrine cells
have great importance for the digestion process; their
identification and morphological study are (done)
performed by silvering that is due to the ability of APUD
cells to accumulate the silver salts. Among the endocrine
cells of (GI) tract distinguished: alpha cells, which secrete
enteroglucagon; D cells that produce somatostatin; P/D1
cells that stimulate vasoactive intestinal polypeptide;
enterochromaffin (EC) cells that produce serotonin and
motilin; ECL cells that produce histamine; G cells that
secrete gastrin; I cells that produce cholecystokinin; K
cells that produce the gastric inhibitory polypeptide; L
cells that produce enteroglucagon; M cells that produce
motilin; N cells that produce neurotensin; P-cells that
produce bombesin; PP cells that produce pancreatic
polypeptide; S cells that release secretin [3]. All of the
above mentioned endocrine cells have great importance
in the digestion, absorption, and neuroregulation in
the GI tract. Therefore, the actual problem of modern
medicine is to identify and to determine the qualitative
structure of the endocrine cells of GI tract.
Objective. The aim of work is to modify the method
for determining the endocrine cells in different parts of
GI tract on the epoxy thin sections with a large survey
surface of these parts.
MATERIALS AND METHODS
To date, there is a way to determine the endocrine
cells on paraffin and semi-thin sections [4]. However,
222
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
a significant drawback is that it does not provide
a complete picture of cytoarchitectonics, quantity,
qualitative composition of different types of endocrine
cells in mucous membranes of GI tract in general.
Plastination [5, 6] of the biological material for
microscopic study provides an opportunity to investigate
the biological structures with a large survey surface
on the total specimen. This method is that the biopsy
sample is placed in an epoxy compound (EPON 812)
and thin sections are made from them using the known
techniques. But the significant drawback of the above
methods is that they were carried out on the complexes of
cartilage, bone tissues and were stained with methylene
blue, which makes it impossible to identify the APUD
cells of GI tract.
RESULTS AND DISCUSSION
A thorough study of silvering methods made
it possible to conclude that G cells are detected by
Grimelius silver stain, EC cells are detected by Sevier-
Munger silver technique. Comparing the results of the
immunofluorescence and the histochemical method for
determining the endocrine cells of gastric mucosa, we
concluded that identification and analysis of G cells are
possible with the use of a Grimelius and Sevier-Munger
complex method. Developing the principle of integrated
use of histochemical methods in the study of endocrine
cells of the mucosa of GI tract on epoxy thin sections,
we proposed and approved the scheme of histochemical
identification of G cells, EC cells and ECL cells that
is based on a comparative evaluation of the data. The
latest data obtained by the Sevier-Munger method,
which detects the argentaffin cells, and by Masson-
Hamperl method that detects only argentophile cells
and opens the possibility to identify on the thin sections
of ECL cells. Also, evaluating the enterochromaffin
cells of GI tract, we concluded that the inclusion in the
histochemical analysis diazo reactions is needed, namely
diazonium pink. The need to use the latter is determined
by qualitative differences of EC cells of GI tract. Our
studies have shown that the Masson-Hamperl method
effectively detects the EC cells, while diazol pink stains
well the granules of enterochromaffin cells of GI tract on
the epoxy thin sections. The use of the proposed scheme
for identification the endocrine cells on the epoxy thin
sections allowed us to identify a number of new factors
revealing, in varying degrees, the role of G cells, EC
cells and ECL cells in normal and pathological GI tract.
The quantitative evaluation of endocrine cells can
be performed in different ways fundamentally irrelevant.
The morphometry of endocrine cells was conducted
by counting their number to the square of section from
the epoxy microsection, using a microscope with an
Olympus C 3040-ADU digital micro nozzle with the
program adopted for this research (Olympus DP – Soft,
license № VJ285302, VT310403, 1AV4U13B26802)
and BIOREX 3 (serial number 5604) with further
recalculation to 1mm2 of mucosa area. Statistical
analysis, in our choice, is the most suitable using the
nonparametric criteria.
Biopsies were compacted in the epoxy according
to generally accepted method for electron-microscopic
examination without soaking the tissues by osmium
salts. To study the APUD cells on the total specimens of
different parts of GI tract, the compaction is performed
for the whole organocomplex in EPON 812 in order
to obtain a complete picture of the place and role of
different types of APUD cells in the mucosa of the GI
tract.
Our short method for detecting the endocrine cells
on epoxy thin sections gradually is performed as follows:
The specimens of tissue from the different parts of
GI tract were fixed in glutaraldehyde solution of 2,5 %
and compacted in EPON 812 according to the standard
technique for electron-microscopic examinations
including the contrasting phase in osmium salts;
The thin sections with thickness from 0,5 to 0,8 mm
were made of snab blocks;
Within 5 minutes, the thin sections were immersed
in the phosphate buffer a solution pH 5,6;
Subsequently, the thin sections were kept for 10
minutes in a freshly prepared Buen solution;
Then thin sections were kept for 1 hour (under visual
control) in a 0.3 % silver nitrate solution on the phosphate
buffer (pH 5, 6) at a temperature of 370°C;
Later thin sections were developed for 3 minutes
in 1 % hydroquinone solution on the 5 % sodium sulfite
solution in the thermostat at 450°C;
Preparations were washed with distilled water for 10
minutes, dried in the thermostat a temperature of 370°C
and investigated in the light microscope at different
magnifications.
The granules of endocrine cells have been staining
dark brown, other structures stained yellow that makes
it possible to identify and to define the cytotopography,
the qualitative and quantitative composition of the cells
of diffuse endocrine system of GI tract. This compaction
method and further impregnation with silver salts
according to different methods makes it possible to
identify and to define the cytotopography, the qualitative
and quantitative composition of the endocrine cells on
the total specimen in the different parts of GI tract and
to define the areas for the further impact histochemical
and electron-microscopic examination.
CONCLUSIONS
Thus, the above methods of histochemical
identification of endocrine cells of the mucosa of GI
tract on the epoxy thin sections are relatively simple, do
not require the use of expensive reagents and instruments
and can be widely used in practice of morphological
laboratories to assess the endocrine system of GI mucous
membranes.
223
ТАвРИЧЕСкИЙ мЕДИкО-бИОЛОГИЧЕСкИЙ вЕСТНИк2013, том 16, №1, ч.2 (61)
POSSIBILITIES OF FURTHER STUDIES
This method is promising and visionary. Despite
its simplicity in implementation, the researcher is able
to use this method not only to identify the cells of the
endocrine system of GI tract but also to detect the APUD
cells of other organ specificity. In further studies, this
method is planned to test at the diffuse endocrine system
of respiratory system.
REFERENCES
1. Передерий В. Г. Современные представления
о причинах возникновения и лечении язвенной бо-
лезни / В. Г. Передерий, С. М. Ткач // Журнал “Мис-
тецтво лiкування”. Украина.– 2007.– 2 (38). С-4–6.
2. Білаш.С.М. Вивчення морфо-функціональних
змін шлунку щурів при запаленні викликані
λ-карагенин та корекції його трансплантацією кріо-
консервованої плаценти / С. М. Білаш, В. І. Шепітько
// Світ медицини та біології.– 2011.—№ 2.– С.169–173.
3. Струков А. І. Патологічна анатомія: Підруч-
ник. Пер. з рос. 4-е вид., стереотипне / Струков А. І.,
Сєров В. В..– Х.: Факт, 2004.– 760 с.
4. Старченко І. І. К методике гистохимической
идентификации эндокринных клеток слизистой
оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки /
І. І. Старченко, В. М. Успенский, В. Ю. Голефеевский
//Архив патологи.– № 1.– 1996.– С.78–80.
5. Старченко І. І. Застосування методу пластина-
ції в стереоморфологічних дослідженнях / І. І. Стар-
ченко, О. К. Прилуцький // Вісник проблем біології і
медицини.– 2006, Вип. 2.– С. 420–422.
6. С. М. Білаш Значення та місце ендокриноци-
тів асоційованих зі слизовою оболонкою шлунку
в патогенезі гострого гастриту / С. М. Білаш,
В. І. Шепітько, Г. А. Єрошенко [та ін.] // Актуальні
проблеми сучасної медицини: Вісник Української
медичної стоматологічної академії.– Т. 12, Вип. 4
(40).– С 206–210.
224
|