Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов

Изучена возможность торможения развития локального рентгеновского ожога 3-й степени объемной аутотрансплантацией фибробластов. Показано, что у морских свинок глубокое введение в зону ожога аутофибробластов через 1 ч, а затем каждые 24 ч после облучения в течение 21 сут существенно уменьшает размеры...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	2013
Hauptverfasser:	Кот, Ю.Г., Кот, Е.В., Перский, Е.Э., Поликарпова, А.В., Алтухова, Л.В.
Format:	Artikel
Sprache:	Russian
Veröffentlicht:	Видавничий дім "Академперіодика" НАН України 2013
Schriftenreihe:	Доповіді НАН України
Schlagworte:	Біохімія
Online Zugang:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/85652
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов / Ю.Г. Кот, Е.В. Кот, Е.Э. Перский, А.В. Поликарпова, Л.В. Алтухова // Доповiдi Нацiональної академiї наук України. — 2013. — № 4. — С. 144–147. — Бібліогр.: 8 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-85652
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-856522015-08-12T03:02:12Z Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов Кот, Ю.Г. Кот, Е.В. Перский, Е.Э. Поликарпова, А.В. Алтухова, Л.В. Біохімія Изучена возможность торможения развития локального рентгеновского ожога 3-й степени объемной аутотрансплантацией фибробластов. Показано, что у морских свинок глубокое введение в зону ожога аутофибробластов через 1 ч, а затем каждые 24 ч после облучения в течение 21 сут существенно уменьшает размеры поражения, снижает степень воспалительных процессов, тормозит деструкцию соединительнотканного матрикса и образование лучевой язвы. Вивчено можливiсть гальмування розвитку локального рентгенiвського опiку 3-го ступеня об’ємною аутотрансплантацiєю фiбробластiв. Показано, що у морських свинок глибоке введення в зону опiку аутофiбробластiв через 1 год, а потiм кожнi 24 год пiсля опромiнення протягом 21 доби iстотно зменшує розмiри ушкодження, знижує ступiнь запальних процесiв, гальмує деструкцiю сполучнотканинного матриксу i утворення променевої виразки. The possibility of the local third degree X-ray burn inhibition by volume autotransplantation of fibroblasts is studied. It is shown that, in guinea pigs, a deep injection of autofibroblasts into a zone of burn in 1 hour and then every 24 hours after the irradiation during 21 days significantly decreases the size of damage, reduces inflammatory processes, and inhibits the destruction of a connective tissue matrix and the formation of radiation ulcers. 2013 Article Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов / Ю.Г. Кот, Е.В. Кот, Е.Э. Перский, А.В. Поликарпова, Л.В. Алтухова // Доповiдi Нацiональної академiї наук України. — 2013. — № 4. — С. 144–147. — Бібліогр.: 8 назв. — рос. 1025-6415 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/85652 [57.04+616.5].616-003.616-008 ru Доповіді НАН України Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Біохімія Біохімія
spellingShingle	Біохімія Біохімія Кот, Ю.Г. Кот, Е.В. Перский, Е.Э. Поликарпова, А.В. Алтухова, Л.В. Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов Доповіді НАН України
description	Изучена возможность торможения развития локального рентгеновского ожога 3-й степени объемной аутотрансплантацией фибробластов. Показано, что у морских свинок глубокое введение в зону ожога аутофибробластов через 1 ч, а затем каждые 24 ч после облучения в течение 21 сут существенно уменьшает размеры поражения, снижает степень воспалительных процессов, тормозит деструкцию соединительнотканного матрикса и образование лучевой язвы.
format	Article
author	Кот, Ю.Г. Кот, Е.В. Перский, Е.Э. Поликарпова, А.В. Алтухова, Л.В.
author_facet	Кот, Ю.Г. Кот, Е.В. Перский, Е.Э. Поликарпова, А.В. Алтухова, Л.В.
author_sort	Кот, Ю.Г.
title	Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов
title_short	Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов
title_full	Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов
title_fullStr	Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов
title_full_unstemmed	Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов
title_sort	торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов
publisher	Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
publishDate	2013
topic_facet	Біохімія
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/85652
citation_txt	Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов / Ю.Г. Кот, Е.В. Кот, Е.Э. Перский, А.В. Поликарпова, Л.В. Алтухова // Доповiдi Нацiональної академiї наук України. — 2013. — № 4. — С. 144–147. — Бібліогр.: 8 назв. — рос.
series	Доповіді НАН України
work_keys_str_mv	AT kotûg tormoženierazvitiâlokalʹnogolučevogoožogaobʺemnojautotransplantaciejfibroblastov AT kotev tormoženierazvitiâlokalʹnogolučevogoožogaobʺemnojautotransplantaciejfibroblastov AT perskijeé tormoženierazvitiâlokalʹnogolučevogoožogaobʺemnojautotransplantaciejfibroblastov AT polikarpovaav tormoženierazvitiâlokalʹnogolučevogoožogaobʺemnojautotransplantaciejfibroblastov AT altuhovalv tormoženierazvitiâlokalʹnogolučevogoožogaobʺemnojautotransplantaciejfibroblastov
first_indexed	2025-07-06T12:55:54Z
last_indexed	2025-07-06T12:55:54Z
_version_	1836902309951438848
fulltext	оповiдi НАЦIОНАЛЬНОЇ АКАДЕМIЇ НАУК УКРАЇНИ 4 • 2013 БIОХIМIЯ УДК [57.04+616.5].616-003.616-008 Ю.Г. Кот, Е. В. Кот, Е.Э. Перский, А.В. Поликарпова, Л.В. Алтухова Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов (Представлено членом-корреспондентом НАН Украины С.А. Костериным) Изучена возможность торможения развития локального рентгеновского ожога 3-й степени объемной аутотрансплантацией фибробластов. Показано, что у морских сви- нок глубокое введение в зону ожога аутофибробластов через 1 ч, а затем каждые 24 ч после облучения в течение 21 сут существенно уменьшает размеры поражения, сни- жает степень воспалительных процессов, тормозит деструкцию соединительноткан- ного матрикса и образование лучевой язвы. Лучевые ожоги — тяжелейшие поражения тканей, для которых характерны отдаленные по- следствия, заключающиеся в развитии язв, не заживающих самостоятельно, а в некоторых случаях — в развитии рака кожи. Существующие методы лечения лучевых ожогов (фарма- кологические и хирургические) являются, в сущности, методами “позднего реагирования”, когда поражение имеет клинические проявления или вступает в хроническую стадию [1]. Один из путей решения этой проблемы состоит в торможении развития ожога на ранних этапах его формирования, что позволит более эффективно использовать стандартные ме- тоды для дальнейшего лечения. Целью исследования было изучение возможности торможения развития лучевых ожогов аутотрансплантацией фибробластов в зону поражения сразу же после облучения. Исследования проведены на морских свинках-самцах массой 350–450 г. Животные были разделены на три группы по семь особей в каждой: I — контрольная; II — облученные без аутотрансплантации фибробластов; III — облученные с аутотрансплантацией фибробластов. Для получения аутофибробластов из выбритого участка кожи на бедре правой задней лапы каждого животного под эфирным наркозом брали четыре биоптата площадью (2 × × 2,5) мм2 и толщиной 1 мм. Наработку клеточной массы проводили по стандартному протоколу [2]. В эксперименте использовали фибробласты 4-го пассажа, которые хранили в жидком азоте в среде с 70% ДМЕМ, 20% фетальной сыворотки и 10% ДМСО. © Ю. Г. Кот, Е.В. Кот, Е.Э. Перский, А.В. Поликарпова, Л.В. Алтухова, 2013 144 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2013, №4 Рис. 1. Влияние аутотрансплантации фибробластами на развитие лучевого ожога и лучевой язвы у морских свинок: А — облучение; Б — облучение с аутотрансплантацией А Б Рис. 2. Влияние аутотрансплантации фибробластами на временные изменения общей площади лучевого ожога и площади лучевой язвы у морских свинок. * Достоверно (P < 0,05) относительно облучения и предыдущего значения площади 5 мм 5 мм Микрораны после биопсии затягивались на 2-е сутки, а на 15-е сутки целостность кожи полностью восстанавливалась. Лучевой ожог животным II и III групп производили на 32-е сутки после биопсии под эфирным наркозом, облучая выбритый участок кожи площадью 1,5 см2 на бедре левой зад- ней лапы рентгеновским излучением дозой 60 Гр на установке УРС-55 (Сu анод, U = 40 кВ, Ja = 5 мA, мощность излучения 4,25 Гр/мин). В этих условиях облучения радиационное поражение соответствовало третьей степени лучевого ожога [3]. Через 1 ч после облучения, а затем каждые 24 ч животным III группы по периметру зоны облучения под углом 45◦ к ее центру делали шесть подкожных инъекций на глубину 1 мм. Каждая инъекция объемом 100 мкл представляла собой суспензию из (200÷210) ·103 аутофибробластов с содержанием живых клеток 80–85%. Перед каждым введением аутофибробластов по фотографиям зоны облучения у жи- вотных II и III групп с помощью программы Jmage J 1.45s подсчитывали общую площадь лучевого ожога и площадь лучевой язвы. На 22-е сутки животных всех групп декапитировали под тиопенталом натрия и иммуно- ферментным методом (наборы DRG, Германия) измеряли концентрацию провоспалитель- ных (IL-1, IL-2, TNF-α) и противовоспалительных (IL-4, IL-10) интерлейкинов в сыворотке крови, а у животных II и III групп также и в гомогенатах ожоговых участков кожи. Состояние межклеточного матрикса в ожоговых участках оценивали с помощью гисто- логических методов, определяя площади, занятые нативным и деградированным коллаге- ном [4], гликозаминогликанами [5, 6], погибшими и живыми клетками [7], коллагеном I типа (FITC-конъюгированные моноклональные антитела Invitrogen). Статистическую обработку результатов проводили с использованием критерия Манна–Уитни [8]. У животных II группы к концу 1-х суток после облучения появилась выраженная гипе- ремия облученного участка кожи, которая развивалась и на 10-е сутки эта область упло- тнилась и начала покрываться струпом. На 21-е сутки в зоне облучения развился дефект, представляющий собой покрытый коричневым струпом участок некроза кожи и более глу- боко расположенных под ним тканей — так называемую сухую язву. Общая площадь ожога к этому времени значительно увеличилась. Никаких признаков заживления лучевого ожога не наблюдалось. В то же время у животных III группы развитие этих процессов значительно замедлилось. На рис. 1 приведены фотографии, иллюстрирующие этот эффект. Анализ численных значений обнаруженного эффекта (рис. 2) показывает, что общая площадь ожога при аутотрансплантации все время наблюдения остается меньшей, чем без нее, а с 12-х суток перестает увеличиваться. На 21-е сутки она составляет 75% площади ожога, который развивался без торможения аутотрансплантацией. Еще эффективнее влияет аутотрансплантация фибробластами на развитие лучевой язвы. При введении аутофибробластов в зону облучения площадь язвы увеличивается только до 9-х суток, после чего начинает уменьшаться. При этом на 9-е сутки она состав- ляет 15%, а на 2-е сутки — только 4% площади язвы, развивающейся без аутотрансплан- тации фибробластами. Согласно данным о влиянии аутотрансплантации на динамику изменения гистологичес- ких показателей области поражения и интенсивности воспалительного процесса (табл. 1, 2), наблюдаемый эффект торможения определяется меньшим количеством погибших соеди- нительнотканных клеток и, соответственно, меньшей степенью нарушения строения меж- клеточного матрикса. Гистологические характеристики зоны лучевого ожога при введении в нее аутофибробластов приближаются к норме. К 21-м суткам у животных, которым вво- ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2013, №4 145 Таблица 1. Влияние аутотрансплантации фибробластами на площадь, занимаемую клетками и биополиме- рами матрикса соединительной ткани морских свинок в зоне лучевого ожога на 21-е сутки после облуче- ния, % Вариант опыта Количество живых клеток Общий нативный коллаген Коллаген I типа Деградиро- ванный коллаген Гликозамино- гликаны Контроль 21,6 ± 1,2 37,2± 1,4 34,7± 1,3 4,2± 0,4 22,8 ± 1,4 Облучение 12,2 ± 0,8 ∗ 25,0± 1,4 ∗ 22,1± 1,0 ∗ 17,3 ± 0,7 ∗ 10,5 ± 0,7 ∗ Облучение с ауто- трансплантацией 15,6 ± 1,2 ∗ 31,6± 1,2 ∗ 29,3± 1,1 ∗ 11,0 ± 0,7 ∗ 27,1 ± 1,0 ∗ ∗Достоверно (p < 0,05) по отношению к предыдущему показателю. Таблица 2. Влияние аутотрансплантации фибробластами на концентрацию про- и противовоспалительных интерлейкинов в крови (пкг/мл) и коже (пкг/г белка) морских свинок в зоне лучевого ожога на 21-е сутки после облучения Вариант опыта IL-1β IL-2 TNF-α IL-4 IL-10 Кровь Контроль 7,45 ± 0,34 14,08 ± 1,22 1,16 ± 0,09 20,37 ± 1,28 2,64 ± 0,11 Облучение 12,05 ± 0,19 ∗ 32,30 ± 0,31 ∗ 4,60 ± 0,12 ∗ 19,02 ± 1,31 3,09 ± 0,49 Облучение с ауто- 5,05 ± 0,36 ∗∗ 7,03± 0,24 ∗∗ 1,63 ± 0,21 ∗∗ 30,42 ± 1,48 ∗∗ 22,09 ± 0,09 ∗∗ трансплантацией Кожа Контроль 0,00 0,00 0,27 ± 0,09 6,38± 0,47 1,38 ± 0,07 Облучение 66,30 ± 3,99 ∗ 20,48 ± 1,37 ∗ 120,00 ± 3,50 ∗ 14,02 ± 0,31 ∗ 10,68 ± 0,05 ∗ Облучение с ауто- трансплантацией 15,41 ± 1,71 ∗∗ 8,22± 1,04 ∗∗ 4,53 ± 0,21 ∗∗ 11,08 ± 0,11 ∗∗ 12,27 ± 0,14 ∗∗ ∗Достоверно (p 6 0,01) по сравнению с контрольной группой. ∗∗Достоверно (p 6 0,01) по сравнению с контрольной группой и группой животных, облученных без ауто- трансплантации. дили аутофибробласты, практически нормализуются и воспалительные процессы, о чем свидетельствует приближение концентраций про- и противовоспалительных интерлейки- нов к значениям, характерным для необлученных животных I группы (см. табл. 2). Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о реальной возможности на ранних этапах тормозить развитие лучевых ожогов кожи объемной аутотрансплантацией фибробластов. 1. Tenenhaus M., Rennekampff H.O. Burn surgery. Clinics in Plastic // Surgery. – 2007. – 34, Is. 4. – P. 697–715. 2. Keira S.M. Experimental model for fibroblast culture. [Електронний ресурс]. Режим доступу до прото- колу: www.scielo.br/pdf/acb/v19s1/v19s1a03.pdf. 3. Звягiнцева Т.В. Моделювання мiсцевих променевих пошкоджень шкiри // Фiзiол. журн. – 1998. – 44. – С. 106–112. 4. Протокол обробки сполучної тканини в парафiнових зрiзах для фарбування за Ван-Гiзоном. [Еле- ктронний ресурс]. Режим доступу до протоколу: http://www.histomix.ru/product_5.html. 5. Протокол обробки сполучної тканини в парафiнових зрiзах для фарбування кислих глiкозамiноглiка- нiв алцiановим синiм. [Електронний ресурс]. Режим доступу до протоколу: http://www.histomix.ru/ product_4.html. 6. Гiстохiмiчна iдентифiкацiя вуглеводiв. Протокол ШИК-реакцiї. [Електронний ресурс]. Режим до- ступу до протоколу: http://www.histopathology.narod.ru/documents/gistohimija_uglevodov.html. 146 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2013, №4 7. Протокол обробки сполучної тканини в парафiнових зрiзах гематоксилiном i еозином. [Електронний ресурс]. Режим доступу до протоколу: http://www.histomix.ru/product_17.html. 8. Glantz S. A. Primer of Biostatistics. – 4th ed. – New York: McGraw-Hill, 2007. – P. 298. Поступило в редакцию 27.06.2012Харьковский национальный университет им. В.Н. Каразина Ю.Г. Кот, К.В. Кот, Є. Е. Перський, Г. В. Полiкарпова, Л. В. Алтухова Гальмування розвитку локального променевого опiку об’ємною аутотрансплантацiєю фiбробластiв Вивчено можливiсть гальмування розвитку локального рентгенiвського опiку 3-го ступе- ня об’ємною аутотрансплантацiєю фiбробластiв. Показано, що у морських свинок глибоке введення в зону опiку аутофiбробластiв через 1 год, а потiм кожнi 24 год пiсля опромiнення протягом 21 доби iстотно зменшує розмiри ушкодження, знижує ступiнь запальних про- цесiв, гальмує деструкцiю сполучнотканинного матриксу i утворення променевої виразки. Yu.G. Kot, K.V. Kot, Ye. E. Persky, A.V. Polikarpova, L.V. Altuhova Inhibition of local radiation burn development by volume fibroblast autotransplantation The possibility of the local third degree X-ray burn inhibition by volume autotransplantation of fibroblasts is studied. It is shown that, in guinea pigs, a deep injection of autofibroblasts into a zone of burn in 1 hour and then every 24 hours after the irradiation during 21 days significantly decreases the size of damage, reduces inflammatory processes, and inhibits the destruction of a connective tissue matrix and the formation of radiation ulcers. ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2013, №4 147

Торможение развития локального лучевого ожога объемной аутотрансплантацией фибробластов

Institution

Ähnliche Einträge