Оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції

Створено модель змiшаної адено-герпетичної iнфекцiї клiтин MDBK та охарактеризовано особливостi репродукцiї вiрусiв. Одночасне iнфiкування клiтин двома вiрусами призводить до взаємного пригнiчення репродукцiї вiрусiв; суперiнфiкування клiтин HSV-1/US, попередньо iнфiкованих HAdV-5, стимулює репроду...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Дата:	2014
Автори:	Білявська, Л.О., Нестерова, Н.В., Повниця, О.Ю., Войчук, С.І., Бобко, Т.М.
Формат:	Стаття
Мова:	Ukrainian
Опубліковано:	Видавничий дім "Академперіодика" НАН України 2014
Назва видання:	Доповіді НАН України
Теми:	Біологія
Онлайн доступ:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/88563
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції / Л.О. Бiлявська, Н.В. Нестерова, О.Ю. Повниця, С.I. Войчук, Т.М. Бобко // Доповiдi Нацiональної академiї наук України. — 2014. — № 11. — С. 139-145. — Бібліогр.: 13 назв. — укр.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-88563
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-885632015-11-17T03:02:28Z Оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції Білявська, Л.О. Нестерова, Н.В. Повниця, О.Ю. Войчук, С.І. Бобко, Т.М. Біологія Створено модель змiшаної адено-герпетичної iнфекцiї клiтин MDBK та охарактеризовано особливостi репродукцiї вiрусiв. Одночасне iнфiкування клiтин двома вiрусами призводить до взаємного пригнiчення репродукцiї вiрусiв; суперiнфiкування клiтин HSV-1/US, попередньо iнфiкованих HAdV-5, стимулює репродукцiю HAdV-5 та пригнiчує репродукцiю HSV-1/US. Дослiджено дiю препарату рибамiдил на моделi змiшаної одночасної вiрусної iнфекцiї клiтин. Виявлено 100% iнгiбування репродукцiї аденовiрусу за умов моно- i змiшаної iнфекцiї. Показано, що при змiшанiй iнфекцiї ефективнiсть препарату вiдносно HSV-1/US знижується. Создана модель смешанной адено-герпетической инфекции клеток MDBK и охарактеризированы особенности репродукции вирусов. Одновременное инфицирование клеток двумя вирусами приводит к взаимному подавлению репродукции вирусов; суперинфицирование клеток HSV-1/US, предварительно инфицированных HAdV-5, стимулирует репродукцию HAdV-5 и подавляет репродукцию HSV-1/US. Изучено действие препарата рибамидил на модели смешанной одновременной вирусной инфекции клеток. Выявлено 100% ингибирование репродукции аденовируса в условиях моно- и смешанной инфекции. Показано, что в условиях смешанной инфекции эффективность препарата рибамидил относительно HSV-1/US снижается. A model of mixed adeno-herpetic infection of cells MDBK is developed, and features of the reproduction of viruses are described. The simultaneous infection of cells caused the inhibition of reproduction of both viruses. The amplification of HadV-5 reproduction and the inhibition of HSV-1/US reproduction in the case where cells were superinfected by herpesvirus are shown. The efficiency of ribamidil has been studied under conditions of mixed infection of cells. 100% inhibition of the adenovirus reproduction by ribamidil under the conditions of mono- and mixed infections is detected. Under the conditions of mixed infection, the efficiency of ribamidil against HSV-1 decreases. 2014 Article Оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції / Л.О. Бiлявська, Н.В. Нестерова, О.Ю. Повниця, С.I. Войчук, Т.М. Бобко // Доповiдi Нацiональної академiї наук України. — 2014. — № 11. — С. 139-145. — Бібліогр.: 13 назв. — укр. 1025-6415 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/88563 578.825:578.826 uk Доповіді НАН України Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Ukrainian
topic	Біологія Біологія
spellingShingle	Біологія Біологія Білявська, Л.О. Нестерова, Н.В. Повниця, О.Ю. Войчук, С.І. Бобко, Т.М. Оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції Доповіді НАН України
description	Створено модель змiшаної адено-герпетичної iнфекцiї клiтин MDBK та охарактеризовано особливостi репродукцiї вiрусiв. Одночасне iнфiкування клiтин двома вiрусами призводить до взаємного пригнiчення репродукцiї вiрусiв; суперiнфiкування клiтин HSV-1/US, попередньо iнфiкованих HAdV-5, стимулює репродукцiю HAdV-5 та пригнiчує репродукцiю HSV-1/US. Дослiджено дiю препарату рибамiдил на моделi змiшаної одночасної вiрусної iнфекцiї клiтин. Виявлено 100% iнгiбування репродукцiї аденовiрусу за умов моно- i змiшаної iнфекцiї. Показано, що при змiшанiй iнфекцiї ефективнiсть препарату вiдносно HSV-1/US знижується.
format	Article
author	Білявська, Л.О. Нестерова, Н.В. Повниця, О.Ю. Войчук, С.І. Бобко, Т.М.
author_facet	Білявська, Л.О. Нестерова, Н.В. Повниця, О.Ю. Войчук, С.І. Бобко, Т.М.
author_sort	Білявська, Л.О.
title	Оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції
title_short	Оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції
title_full	Оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції
title_fullStr	Оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції
title_full_unstemmed	Оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції
title_sort	оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції
publisher	Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
publishDate	2014
topic_facet	Біологія
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/88563
citation_txt	Оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції / Л.О. Бiлявська, Н.В. Нестерова, О.Ю. Повниця, С.I. Войчук, Т.М. Бобко // Доповiдi Нацiональної академiї наук України. — 2014. — № 11. — С. 139-145. — Бібліогр.: 13 назв. — укр.
series	Доповіді НАН України
work_keys_str_mv	AT bílâvsʹkalo ocínkaantivírusnoíaktivnostípreparaturibamídilnamodelízmíšanoíadenogerpetičnoíínfekcíí AT nesterovanv ocínkaantivírusnoíaktivnostípreparaturibamídilnamodelízmíšanoíadenogerpetičnoíínfekcíí AT povnicâoû ocínkaantivírusnoíaktivnostípreparaturibamídilnamodelízmíšanoíadenogerpetičnoíínfekcíí AT vojčuksí ocínkaantivírusnoíaktivnostípreparaturibamídilnamodelízmíšanoíadenogerpetičnoíínfekcíí AT bobkotm ocínkaantivírusnoíaktivnostípreparaturibamídilnamodelízmíšanoíadenogerpetičnoíínfekcíí
first_indexed	2025-07-06T16:21:48Z
last_indexed	2025-07-06T16:21:48Z
_version_	1836915264041517056
fulltext	оповiдi НАЦIОНАЛЬНОЇ АКАДЕМIЇ НАУК УКРАЇНИ 11 • 2014 БIОЛОГIЯ УДК 578.825:578.826 Л.О. Бiлявська, Н.В. Нестерова, О. Ю. Повниця, С. I. Войчук, Т.М. Бобко Оцiнка антивiрусної активностi препарату рибамiдил на моделi змiшаної адено-герпетичної iнфекцiї (Представлено академiком НАН України В.С. Пiдгорським) Створено модель змiшаної адено-герпетичної iнфекцiї клiтин MDBK та охарактери- зовано особливостi репродукцiї вiрусiв. Одночасне iнфiкування клiтин двома вiруса- ми призводить до взаємного пригнiчення репродукцiї вiрусiв; суперiнфiкування клiтин HSV-1/US, попередньо iнфiкованих HAdV-5, стимулює репродукцiю HAdV-5 та пригнi- чує репродукцiю HSV-1/US. Дослiджено дiю препарату рибамiдил на моделi змiшаної одночасної вiрусної iнфекцiї клiтин. Виявлено 100% iнгiбування репродукцiї аденовiрусу за умов моно- i змiшаної iнфекцiї. Показано, що при змiшанiй iнфекцiї ефективнiсть препарату вiдносно HSV-1/US знижується. Аденовiрус та вiрус простого герпесу 1-го типу — збудники iнфекцiйних хвороб людини, що вражають очi, респiраторний, ентеральний, урогенiтальний тракти, центральну та перифе- ричну нервову системи, здатнi тривалий час знаходитись в латентному станi та активува- тись пiд впливом ендо- та екзогенних факторiв [1, 2]. Широка розповсюдженiсть вiрусiв, їх тропiзм до одних i тих самих тканин створює можливiсть iнфiкування органiзму кiлько- ма вiрусами з розвитком змiшаної iнфекцiї. Коiнфекцiя може включати iнфiкування однiєї клiтини кiлькома видами вiрусiв або декiлька вiрусiв можуть iнфiкувати рiзнi типи клiтин у межах одного органiзму. Результатом цього може бути як вiдсутнiсть взаємодiї, так i вза- ємний вплив вiрусiв — iнгiбування чи стимулювання реплiкацiї вiрусiв, змiни пермiсивностi, тропiзму, латентностi, патологiї, у тому числi iмунопатологiї та iмунологiчних реакцiй. Клi- нiчнi прояви змiшаних iнфекцiй можуть бути рiзноманiтнi залежно вiд виду збудникiв, їх бiологiчних властивостей, взаємовiдносин один з одним i з клiтинами-господарями [3]. При деяких коiнфекцiях характер патологiчного процесу не змiнюється, проте часто спостерi- гається його посилення, а тому важливим завданням є пошук та розробка сполук, якi б виявляли високу ефективнiсть вiдносно обох вiрусiв, iнгiбуючи їх репродукцiю та пере- дачу. Майже не дослiджена активнiсть офiцинальних та нових ефективних антивiрусних препаратiв за умови змiшаної вiрус-вiрусної iнфекцiї. Тому, нашою метою було створен- © Л.О. Бiлявська, Н.В. Нестерова, О.Ю. Повниця, С. I. Войчук, Т.М. Бобко, 2014 ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2014, №11 139 ня клiтинної моделi змiшаної адено-герпетичної iнфекцiї та дослiдження особливостей дiї препарату рибамiдил за умов коiнфiкування клiтин. Матерiали i методи. Об’єкти дослiджень. Використано культуру перещеплюваних клiтин MDBK (нирки телят), отриману з Iнституту мiкробiологiї Болгарської академiї наук. Клiтини культивували вiдповiдно до стандартної методики [4]. Як модельнi вiруси були використанi аденовiрус людини 5-го серотипу (HAdV-5) та вiрус простого герпесу 1-го типу (HSV-1/US), одержанi з колекцiї Будапештського медич- ного унiверситету (Угорщина) та Iнституту антивiрусної хiмiотерапiї Центру клiнiчної та теоретичної медицини (Нiмеччина). Культивували та зберiгали вiруси за описаними ранiше методиками [5]. Препарат рибамiдил (рибавiрин) — 1-β-D-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксила- мiд, аналог рибозиду iмiдазолкарбоксимiду, фосфат якого є ключовим продуктом бiосин- тезу пуринових нуклеотидiв, ресинтезовано в Iнститутi органiчного синтезу Латвiйської академiї наук. Моделювання змiшаної адено-герпетичної iнфекцiї клiтин MDBK. Клiтини вирощували до щiльностi 2·106 кл/мл, вiдмивали вiд сироватки i вносили вiрус в об’ємi 0,3 мл/пробiрку iз розрахунку: аденовiрус 3, 6 чи 12 ВУО/кл (включення утворююча одиниця на клiтину) та вiрус простого герпесу з множиннiстю iнфiкування 0,01 чи 0,02 БУО/кл (бляшко утво- рююча одиниця на клiтину). Iнфiкування клiтин проводили одночасно обома вiрусами чи послiдовно з рiзницею в 24 год, з попереднiм зараженням аденовiрусом. Адсорбцiя вiрусу вiдбувалась протягом 1 год при 20 ◦C, клiтини двiчi вiдмивали вiд не адсорбованого вi- русу розчином Хенкса (“БiоТестМед”, Україна), додавали пiдтримуюче середовище з 45% RPMI 1640 (“Sigma”, США), 45% DMEM (“БiоТестМед”, Україна), 5% сироватки ембрiону теляти (“Sigma”, США) та iнкубували в термостатi при 37 ◦С в атмосферi 5% СО2. Вiдбiр матерiалу для аналiзу проводили через 24–96 год пiсля iнфiкування клiтин. Визначення iнфекцiйного титру вiрусiв. Iнтенсивнiсть репродукцiї вiрусiв у клiти- нах та iнфекцiйний титр вiрусiв дослiджували цитоморфологiчним методом з використан- ням 0,01% барвника акридинового оранжевого (“Sigma”, США), визначаючи вiдсоток iнфi- кованих клiтин, за утворенням вiрусоспецифiчних внутрiшньоядерних включень. Метод дає можливiсть виявляти репродукцiю вiрусу, збiльшення клiтин iз включеннями пропорцiйне наростанню iнфекцiйного титру вiрусу [6]. Титр вiрусу (ВУО/мл) визначали за формулою: титр вiрусу = A ·B C , де A — загальна кiлькiсть клiтин з включеннями у пробiрцi, B — дослiджуване розведення вiрусу (зворотна величина), C — об’єм iнокуляту. Вплив препарату рибамiдил на репродукцiю вiрусiв визначали за редукцiєю числа iнфi- кованих клiтин у дослiдi в порiвняннi з контролем за формулою [7]: Вiдсоток iнгiбування репродукцiї = 100 − (Д · 100/K), де K — кiлькiсть клiтин з включеннями в контролi, Д — кiлькiсть клiтин з включеннями в дослiдi. Статистичну обробку даних виконували згiдно зi стандартними пiдходами до обчислен- ня статистичних помилок (стандартне вiдхилення), використовуючи комп’ютерну програму Microsoft Excel 2010 [8]. Iмунофлюоресцентний аналiз. Препарати обробляли за прямим (сироваткою мишi про- ти HSV-1, мiченою FITC, НДI грипу, Росiя) та непрямим методом (сироваткою кроля проти 140 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2014, №11 Рис. 1. Цитоморфологiчний аналiз: а — неiнфiкованi клiтини MDBK; б — HAdV-5 включення; в — HSV-1/US включення; г — герпетичнi (бiла стрiлка) та аденовiруснi включення (чорна стрiлка) Рис. 2. Iмунофлюоресцентний аналiз клiтин: а — неiнфiкованi клiтини MDBK; б — популяцiя клiтин, коiнфi- кованих HAdV-5 та HSV-1/US i оброблених сироваткою кроля проти гексону аденовiрусу та антисироваткою до глобулiнiв кроля мiченою FITC; в — популяцiя клiтин, коiнфiкованих HAdV-5 та HSV-1/US i оброблених сироваткою мишi проти HSV-1 мiченою FITC гексону аденовiрусу та антисироваткою до глобулiнiв кроля, мiченою FITC, “Thermo scien- tific”, США) [9, 10]. Зразки дослiджували в люмiнесцентному мiкроскопi МЛ-2 (ЛОМО, Росiя). Електронно-мiкроскопiчнi дослiдження. Процедури, пов’язанi з фiксацiєю клiтин, їх зневодненням, замiщенням i заливанням у смоли, проводили за методикою Bozzola [11]. Ультратонкi зрiзи, отриманi на ультрамiкротомi LKB 8800, контрастували уранiлацетатом i цитратом свинцю та дослiджували на мiкроскопi JEM-1400 (“Jeol”, Японiя). Результати та їх обговорення. Iнфiкованi клiтини, в яких репродукуються вiруси HAdV-5 та HSV-1/US, виявляли цитоморфологiчним методом за утворенням в ядрах спе- цифiчних ДНК-вмiсних включень обох вiрусiв (рис. 1). Аденовiруснi включення мають ви- гляд зернистого, гранулярного чи центроядерного яскраво-зеленого свiчення ядра, оточе- ного темною, гомогенною зоною, тодi як для герпетичних включень характерне рiвномiрне, дифузне, димчаcто-зелене свiчення ядра iз яскравою оранжево-зеленою ядерною мембра- ною. Включення мiстять ДНК вiрусiв, специфiчнi вiруснi антигени, скупчення капсомерiв вiрусiв (що формують паракристали) та кристалоподiбнi скупчення повних i не повних нук- леокапсидiв. Наявнiсть змiшаної iнфекцiї популяцiї клiтин MDBK пiдтверджено методом iмунофлуоресцентного аналiзу (рис. 2). При репродукцiї HAdV-5 та HSV-1/US в клiтинах MDBK iнфекцiйнi вiруси виявляли вже через 24 год, через 48 год пiсля зараження їх титр становив 7,55 та 5,5 lg ВУО/мл вiдпо- вiдно. Показано, що одночасне iнфiкування клiтин двома вiрусами призводило до взаємного пригнiчення репродукцiї вiрусiв (табл. 1). Рiвень пригнiчення залежав вiд використаної мно- жинностi iнфiкування клiтин вiрусом герпесу та не залежав вiд множинностi iнфiкування аденовiрусом. Спостерiгалося значне зниження кiлькостi iнфiкованих клiтин з вiрусiндуко- ваними включеннями для обох вiрусiв: HSV-1/US в 1,5–3,0 раза та для HAdV-5 в 9,4 раза. За результатами титрування iнфекцiйностi вiрусiв HAdV-5 та HSV-1/US, синтезова- них в епiтелiальнiй культурi клiтин за умов змiшаного iнфiкування, встановлено зниження iнфекцiйного титру вiрусiв на три порядки для аденовiрусу (4,9 lg ВУО/мл) та на два по- рядки для герпесвiрусу (3,8 lg ВУО/мл). Таблиця 1. Формування специфiчних внутрiшньоядерних включень залежно вiд типу змiшаної iнфекцiї та множинностi iнфiкування клiтин MDBK Варiант iнфiкування клiтин Множиннiсть iнфiкування∗ Кiлькiсть iнфiкованих клiтин, % Одночасне iнфiкування Послiдовне iнфiкування HAdV-5 HSV-1/US HAdV-5 HSV-1/US HAdV-5 12 47 0 76 0 HAdV-5 6 26 0 — — HSV-1/US 0,02 0 100 — — HSV-1/US 0,01 0 82 0 50 HAdV-5 + 12 6 67 — — + HSV-1/US 0,02 HAdV-5 + 6 12 67 — — + HSV-1/US 0,02 HAdV-5 + 12 5 25 94 6 + HSV-1/US 0,01 HAdV-5 + 6 17 50 — — + HSV-1/US 0,01 ∗Множиннiсть iнфiкування для HAdV-5 — ВУО/кл., HSV-1/US — БУО/кл. P < 0,05. ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2014, №11 141 Рис. 3. Ультратонкi зрiзи клiтин MDBK: а — неiнфiкованi клiтини; б — клiтини, iнфiкованi HSV-1/US; в — клiтини, iнфiкованi HAdV-5; г — клiтини, коiнфiкованi HAdV-5 (чорна стрiлка) та HSV-1/US (бiла стрiлка) У випадку суперiнфiкування клiтин MDBK вiрусом HSV-1/US через 24 год пiсля iнфiку- вання їх HAdV-5 спостерiгалося стимулювання репродукцiї HAdV-5 на 24% та пригнiчення репродукцiї вiрусу герпесу на 88% (див. табл. 1). Дослiджено ультраструктуру неiнфiкованих та iнфiкованих (HAdV-5 та HSV-1/US) клi- тин за допомогою електронної мiкроскопiї (рис. 3). Iнтактнi клiтини MDBК мали округлу чи овальну форму i велике ядро, у вакуолях виявлялись нещiльнi округлi тiльця помiрної електронної щiльностi, ядерний хроматин був розмiщений по всьому об’єму ядра, в центрi якого спостерiгали одне чи декiлька великих ядерець. При моноiнфекцiї клiтин аденовi- 142 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2014, №11 русом чи герпесвiрусом були виявленi такi змiни субклiтинних структур: збiльшення ядра та перегрупування хроматину до периферiї (маргiнацiя); формування вiрусоспецифiчних включень, в основному гранулярного i фiбрилярного типу, кристалоподiбних внутрiшньо- ядерних скупчень повних, що мiстять ДНК та електроннощiльну серцевину, i неповних нуклеокапсидiв. Спостерiгались гiпертрофiя ядерної мембрани, що поєднувалась з розши- ренням перинуклеарного простору, та зникнення ядерець, при цьому цитоплазма характери- зувалась бiльш вираженою вакуолiзацiєю в порiвняннi з неiнфiкованими клiтинами. Також з’являлись численнi округлi мiтохондрiї та трубчато-ретикулярнi утворення, ендоплазма- тичний ретикулум бiльш розширений i оконтурований, а клiтинна оболонка гiпертрофована i мала незвичну форму. Всi цi морфологiчнi змiни призводили до повної деструкцiї клiтин на 72-гу–96-ту год. Натомiсть змiшана iнфекцiя клiтин вiрусами HAdV-5 та HSV-1/US характеризувалась нижчим рiвнем розвитку морфологiчних змiн та наявнiстю невеликої кiлькостi вiрусних ка- псидiв. Електронно-мiкроскопiчне вивчення ультраструктурних зрiзiв виявило багато пус- тих вiрусних капсомерiв, що на вiдмiну вiд моноiнфекцiї свiдчить про пригнiчення вiрусної репродукцiї. Створену модель одночасного змiшаного iнфiкування клiтин MDBK використали для дослiдження антивiрусної дiї препарату рибамiдил. Попереднiй аналiз антивiрусної дiї пре- парату рибамiдил показав, що вiн виявляє виражену антигерпетичну та антиаденовiрусну активнiсть [12, 13]. Препарат в концентрацiї 62 мкг/мл, що на 99% пригнiчував репродук- цiю обох вiрусiв, вносили пiсля iнфiкування клiтин у складi пiдтримуючого середовища. При вивченнi дiї препарату рибамiдил на моноiнфекцiю клiтин MDBK показано, що ре- продукцiя аденовiрусу пригнiчувалась повнiстю (100%), а репродукцiя вiрусу герпесу — на 79% (в 5 разiв). При коiнфiкуваннi клiтин також вiдмiчено 100% iнгiбування синтезу специфiчних аденовiрусних включень та зменшення в 2,4 раза (59%) кiлькостi iнфiкованих HSV-1/US клiтин вже через 24 год дослiдження. Отже, за умов змiшаної iнфекцiї ефектив- нiсть препарату рибамiдил вiдносно HSV-1/US знижувалась на 20% (табл. 2). Таким чином, створено модель подвiйної адено-герпетичної iнфекцiї епiтелiальних клi- тин MDBК, охарактеризовано особливостi репродукцiї вiрусiв в умовах змiшаної iнфекцiї Таблиця 2. Антивiрусна дiя препарату рибамiдил за умов коiнфекцiї клiтин MDBK аденовiрусом та вiрусом герпесу Варiант обробки клiтин Множиннiсть iнфiкування∗ Кiлькiсть iнфiкованих клiтин, % Iнгiбування репродукцiї, % HAdV-5 HSV-1/US HAdV-5 HSV-1/US HAdV-5 3 21 0 — — HAdV-5 + 3 0 0 100 — + рибамiдил∗∗ HSV-1/US 0,01 0 100 — — HSV-1/US + 0,01 0 21 — 79 + рибамiдил HAdV-5 + 3 5 95 76 5 + HSV-1/US 0,01 HAdV-5 + 3 0 39 100 59 + HSV-1/US + 0,01 рибамiдил ∗Множиннiсть iнфiкування для HAdV-5–ВУО/кл, HSV-1/US — БУО/кл. ∗∗Концентрацiя 62 мкг/мл. P < < 0,05. ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2014, №11 143 та дослiджено ефективнiсть препарату рибамiдил при коiнфiкуваннi клiтин. Данi дослiд- ження важливi для розумiння можливих взаємодiй мiж вiрусами за умов пермiсивностi клiтинної моделi для обох iнфекцiй та ролi даних процесiв у розвитку резистентностi вiру- сiв до антивiрусних препаратiв. 1. Kinchington P., Romanowski E., Gordon G. Prospects for adenovirus antivirals // J. Antimicrob. Chemo- therapy. – 2005. – 55. – P. 424–429. 2. Ершов Ф.И., Коваленко А.Л., Романцов М.Г. и др. Герпетическая инфекция: вопросы патогенеза, методические подходы к терапии: Руководство для врачей / Под. ред. М. Г. Романцова, С.Ю. Голу- бева. – Москва, 1997. – 97 с. 3. Da Palma T., Doonan B.P., Trager N.M., Kasman L.M. A systematic approach to virus-virus interacti- ons // Virus Res. – 2010. – 149, No 1. – P. 1–9. 4. European Collection of Animal Cell Cultures Catalog. – 4th ed. – Porton Down, Salisbury (UK) PHLS Centre of Applied Microbiology and Research. – 1990. – 386 p. 5. Berencsi Gy., Dyachenko N. S., Tarassishin L.A. et al. Changes of adenovirus hexon associated with different passage history of Ad h1 // Acta microbial. Hung. – 1986. – 33, No 3. – P. 233–243. 6. Носач Л.Н., Дяченко Н.С. Цитопатология аденовирусной инфекции. – Киев: Наук. думка, 1982. – 124 с. 7. Носач Л.Н., Повница О.Ю. Доклиническое исследование специфического антивирусного действия лекарственных средств в культуре клеток на модели аденовируса. Методические рекомендации // Вестн. фармакологии и фармации. – 2007. – № 9. – С. 52–64. 8. Лапач С.Н., Чубенко А.В., Бабич П.Н. Статистические методы в медико-биологических исследова- ниях с использованием Excel. – Киев: Морион, 2001. – 408 с. 9. Bordin P., Merlin U., Pugina P. Reliability of the herpes simplex virus immunofluorescent test in corneal disease // Eur. J. Ophthalmol. – 1992. – No 2, Iss. 4. – P. 175–178. 10. Gardner P. S., McGuckin R., McQuillin J. Adenovirus demonstrated by immunofluorescence // Br. Med. J. – 1972. – No 3. – P. 175. 11. Bozzola J. J. Conventional Specimen Preparation Techniques for Transmission Electron Microscopy of Cultured Cells // Electron microscopy: methods and protocols. – 2nd ed. / Ed. by John K. – Totowa: Humana Press, 2007. – P. 1–18. 12. Носач Л.Н., Дяченко Н.С., Жовноватая В.Л. Антиаденовирусная активность субстанции и лекар- ственной формы рибамидила // Мiкробiол. журн. – 2009. – 71, № 5. – С. 60–67. 13. De Clercq E. Antiviral agents: characteristic activity spectrum depending on the molecular target with which they interact // Adv. Virus. Res. – 1993. – 42. – P. 1–55. Надiйшло до редакцiї 11.07.2014Iнститут мiкробiологiї i вiрусологiї iм. Д.К. Заболотного НАН України, Київ Л.А. Белявская, Н. В. Нестерова, О. Ю. Повница, С.И. Войчук, Т.Н. Бобко Оценка антивирусной активности препарата рибамидил на модели смешанной адено-герпетической инфекции Создана модель смешанной адено-герпетической инфекции клеток MDBK и охарактеризиро- ваны особенности репродукции вирусов. Одновременное инфицирование клеток двумя виру- сами приводит к взаимному подавлению репродукции вирусов; суперинфицирование клеток HSV-1/US, предварительно инфицированных HAdV-5, стимулирует репродукцию HAdV-5 и подавляет репродукцию HSV-1/US. Изучено действие препарата рибамидил на модели смешанной одновременной вирусной инфекции клеток. Выявлено 100% ингибирование ре- продукции аденовируса в условиях моно- и смешанной инфекции. Показано, что в условиях смешанной инфекции эффективность препарата рибамидил относительно HSV-1/US сни- жается. 144 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2014, №11 L.O. Biliavska, N.V. Nesterova, O.Yu. Povnitsa, S. I. Voychuk, T.N. Bobko Estimation of the antiviral activity of ribamidil within the model of mixed adeno-herpetic infection A model of mixed adeno-herpetic infection of cells MDBK is developed, and features of the reproduc- tion of viruses are described. The simultaneous infection of cells caused the inhibition of reproduc- tion of both viruses. The amplification of HadV-5 reproduction and the inhibition of HSV-1/US reproduction in the case where cells were superinfected by herpesvirus are shown. The efficiency of ribamidil has been studied under conditions of mixed infection of cells. 100% inhibition of the adenovirus reproduction by ribamidil under the conditions of mono- and mixed infections is detected. Under the conditions of mixed infection, the efficiency of ribamidil against HSV-1 decreases. ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2014, №11 145

Оцінка антивірусної активності препарату рибамідил на моделі змішаної адено-герпетичної інфекції

Репозитарії

Схожі ресурси